ERK2、nm23、MMP9的表達在乳腺病變中的意義*

邱 鵬 河北省邢臺市人民醫院腫瘤內一科 054031

乳腺癌發病率逐年上升，且有年輕化趨勢，嚴重危害女性生命安全[1]。近年隨著乳腺病變分子生物學研究逐漸深入，多種基因蛋白對乳腺癌的發生、發展、侵襲、轉移作用機制逐漸清晰，對乳腺癌的診斷、治療、預后提供更深層次評估。細胞外信號調節激酶-2(Extracellular signal-reg-ulated kinase 2，ERK2)是促分裂原活化蛋白激酶家族成員之一，在細胞增殖、凋亡或分化等方面傳遞調控信號，可促進惡性腫瘤發生、浸潤、轉移[2]。nm23基因是一種腫瘤轉移抑制基因，在惡性腫瘤細胞的植入和轉移過程中具有重要抑制作用，其低表達時可促進腫瘤進展和轉移[3]。基質金屬蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9，MMP9)可參與腫瘤新生血管形成，且可破壞基底膜，促進腫瘤細胞的浸潤和轉移[4]。因此，推測ERK2、nm23、MMP9基因蛋白異常表達可能與乳腺良、惡性病變有關。本文旨在觀察ERK2、nm23、MMP9的表達在乳腺病變中的意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月—2020年10月本院收治的95例乳腺病變患者為研究對象，患者及家屬均簽署知情同意書，年齡26～58歲，平均年齡(41.36±4.58)歲。(1)納入標準：①影像學檢查發現乳腺病變，首次發現病變；②入組前未接受系統治療；③在本院擬行手術治療。(2)排除標準：①合并其他部位良、惡性腫瘤者；②合并全身性感染疾病；③合并凝血功能障礙。本研究經本院醫學倫理委員會審核批準。

1.2 方法 病理組織學及ERK2、nm23、MMP9表達檢查方法：(1)病理組織學檢查：取患者術后病理組織為標本，每例標本分為兩部分，一部分術后行病理組織學檢查，依據病理組織學檢查結果參照《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范(2015版)》[5]中相關標準判定病變良、惡性以及淋巴結轉移情況。(2)ERK2、nm23、MMP9表達檢查：將另一部分標本采用4%中性甲醛固定液固定保存，行蘇木素—伊紅(hematoxylin-eosin staining，HE)和免疫組化染色；ERK2、nm23、MMP9基因蛋白表達檢測均采用免疫組織化學法，其中兔抗人ERK2單克隆抗體購自NeoMarker Fremont公司，鼠抗人nm23和MMP9單克隆抗體、免疫組織化學檢測試劑盒、二氨基聯苯胺(Diaminobenzidine staining，DAB)酶底物顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術開發公司。工作濃度為1∶50，ERK2、nm23、MMP9均以DAB顯色，采用磷酸鹽緩沖液沖洗，光學顯微鏡下觀察。判定標準：ERK2、nm23、MMP9蛋白均表達于細胞質，染色結果根據著色強度無、淺黃/黃色、棕黃色分別記0、1、2分；陽性細胞數<10%計0分，10%～50%計1分，>50%計2分；兩項相乘>0分為陽性，反之為陰性。

2 結果

2.1 乳腺病變情況 經病理組織學檢查結果顯示，95例乳腺病變患者中，惡性病變32例，其中淋巴結轉移13例，淋巴結未轉移19例；良性病變63例，其中乳腺纖維瘤28例，乳腺增生35例。

2.2 不同乳腺病變類型患者ERK2、nm23、MMP9表達陽性率比較 乳腺癌患者ERK2、MMP9表達陽性率均高于乳腺纖維瘤、乳腺增生患者，nm23表達陽性率低于乳腺纖維瘤、乳腺增生患者，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同乳腺病變類型患者ERK2、nm23、MMP9陽性率比較[n(%)]

2.3 淋巴結轉移與未轉移乳腺癌患者ERK2、nm23、MMP9陽性率比較 淋巴結轉移乳腺癌患者ERK2、MMP9陽性率均高于淋巴結未轉移患者，nm23陽性率低于淋巴結未轉移患者，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 淋巴結轉移與未轉移乳腺癌患者ERK2、nm23、MMP9陽性率比較[n(%)]

3 討論

乳腺病變是女性多發病，可分為良性病變和惡性病變，其中乳腺癌是常見的乳腺惡性病變，若治療不及時，腫瘤細胞進一步擴散，可導致不良預后。因此，準確評估乳腺病變尤為重要。

研究顯示，乳腺良、惡性病變患者中多種相關基因蛋白表達明顯不同，如蛋白水解酶、信號轉導因子等，且隨惡性病變進展相關基因蛋白表達隨之出現變化，與患者預后密切相關[6]。本文結果中，乳腺癌患者ERK2、MMP9陽性率均高于乳腺纖維瘤、乳腺增生患者，nm23陽性率低于乳腺纖維瘤、乳腺增生患者；進一步對比淋巴結轉移與未轉移乳腺癌患者ERK2、nm23、MMP9陽性率發現，淋巴結轉移乳腺癌患者ERK2、MMP9陽性率均高于淋巴結未轉移患者，nm23陽性率低于淋巴結未轉移患者，說明ERK2、MMP9、nm23基因蛋白異常表達與乳腺良、惡性病變以及乳腺癌淋巴結轉移有關。分析原因可能為，ERK2是一類絲氨酸蛋白激酶，主要在細胞質內，可通過旁分泌或自分泌促進細胞增殖和惡變，刺激腫瘤細胞DNA合成，其陽性表達率高可促進細胞惡性轉化，誘發癌變及腫瘤轉移[7]。nm23基因是目前研究較多的轉移抑制基因，由結構功能密切相關的基因族構成，研究顯示，nm23基因低表達與惡性腫瘤轉移和預后不良密切相關[8]。腫瘤浸潤轉移與轉移抑制基因失活有關，腫瘤轉移抑制基因可抑制腫瘤細胞的轉移表型，從而抑制腫瘤浸潤轉移。nm23可通過抑制ERK信號轉導系統活性，進而減少乳腺癌細胞增殖能力，因此nm23基因陽性表達率高對乳腺癌的侵襲和轉移具有一定抑制作用。MMP9是一類蛋白水解酶，可降解細胞外基質中膠原和彈力蛋白，促進腫瘤細胞穿過基底膜屏障，從而使腫瘤浸潤和轉移[9]。另外，MMP9除降解細胞外基質，還參與腫瘤新生血管形成，可促進腫瘤細胞浸潤和轉移灶形成[10]。故通過檢測乳腺病變患者ERK2、MMP9、nm23基因蛋白表達情況，可能有助于對乳腺癌的診斷、轉移和預后綜合判斷。

綜上所述，ERK2、MMP9、nm23基因蛋白異常表達與乳腺良、惡性病變有關。