歐前胡素固體分散體凝膠骨架緩釋片的制備及藥動學評價

徐志杰

歐前胡素固體分散體凝膠骨架緩釋片的制備及藥動學評價

徐志杰

威海海洋職業學院，山東 威海 264300

制備歐前胡素固體分散體（imperatorin solid dispersion，IMP-SD）凝膠骨架緩釋片（hydrogel matrix sustained-release tablets）（IMP-SD-HMSRT），并研究口服藥動學行為及體內外相關性。溶劑揮發法制備IMP-SD。在單因素考察的基礎上，選擇HPMC K15M用量、聚乙二醇（PEG）400比例和PEG總用量為主要影響因素，緩釋片在2、6、12 h累積釋放率的綜合評分為響應值，采用Box-Behnken設計-效應面法優化IMP-SD-HMSRT最佳處方，并考察在家兔體內的藥動學行為。利用Loo-Rigelman法評價其體內外相關性。IMP-SD-HMSRT最佳處方為HPMC K15M用量為48 mg/片、PEG 400比例為58%、PEG總量為26.5 mg/片。HMSRT的12 h累積釋放率達到95.54%。藥動學結果顯示IMP-SD- HMSRT的max波動小，max延后至（4.08±0.43）h，與歐前胡素普通片相比IMP-SD-HMSRT的相對生物利用度提高至219.76%。IMP-SD-HMSRT在pH 6.8磷酸鹽緩沖液中體外釋藥行為與體內吸收存在相關性。IMP-SD-HMSRT釋藥緩慢，促進了藥物吸收，體內吸收與體外釋藥具有良好的相關性。

歐前胡素；固體分散體；凝膠骨架緩釋片；Box-Behnken設計-效應面法；藥動學

歐前胡素（imperatorin）主要存在于白芷、歐前胡、防風、獨活等中藥植物中，屬于香豆類化合物，研究表明它具有抗炎、抗抑郁、鎮痛等作用[1]，在心血管系統和神經系統中應用較多[2-3]。據報道[4]，歐前胡素脂溶性較好，但水中溶解度僅為2.45 μg/mL，溶出度差，導致藥物難以吸收。尚曙玉等[5]將其制備成固體分散體后口服生物利用度提高至2.03倍。但歐前胡素具有一定的毒性[6]，固體分散體的快速釋藥使歐前胡素的血藥濃度波動較大，容易加劇毒副作用，因此有必要進一步制備成緩釋制劑。另外，歐前胡素在胃腸道均有吸收[7]，適合制備成緩釋制劑。凝膠骨架緩釋片（hydrogel matrix sustained-release tablets，HMSRT）具有釋藥變異小、制備工藝簡單、適合大規模生產、輔料成本低廉等優勢，是緩釋制劑研究熱點之一[8-10]，可有效抑制血藥濃度波動，減少患者服藥次數、增強順應性及藥效[11]。為解決歐前胡素固體分散體（imperatorin solid dispersion，IMP-SD）血藥濃度波動較大缺點，提高其安全性及有效性，本研究采用HPMC K15M為凝膠骨架緩釋片的緩釋材料，聚乙二醇（PEG）類物質（PEG 400和PEG 4000混合物）作為釋藥速率調節劑，將IMP-SD進一步制備成凝膠骨架緩釋片（hydrogel matrix sustained-release tablets，IMP- SD-HMSRT），并對體內藥動學進行研究，為歐前胡素新制劑研究提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Quintix125D-1CN型電子分析天平，賽多利斯科學儀器北京有限公司；DF-101S磁力攪拌器，河南天辰儀器設備有限公司；1100型高效液相色譜儀，安捷倫公司；RC-6D型藥物溶出試驗儀，天津創興電子設備有限公司；YP-1型壓片機，寧波天辰機械設備有限公司；HB-800型超聲儀，張家港市海博設備有限公司；RF01型旋蒸蒸發儀，上海況勝實業公司；YD-4片劑硬度儀，天津創興電子設備有限公司。

1.2 材料

歐前胡素對照品，批號110826-202021，質量分數99.6%，中國食品藥品檢定研究院；羥丙基甲基纖維K15M（HPMC K15M），批號181208，西安天正藥用輔料有限公司；歐前胡素原料藥，批號20191025，質量分數為98%，南京春秋生物工程有限公司；淀粉，批號190910，曲阜市天利藥用輔料有限公司；聚乙二醇400（PEG 400），批號20200315，山東瑞生藥用輔料有限公司；聚乙二醇4000（PEG 4000），批號20191224，山東瑞生藥用輔料有限公司；聚乙烯吡咯烷酮（PVP K30），Sigma-Aldrich公司；硬脂酸鎂，批號151026，湖北興銀河化工有限公司；甲醇，色譜級，德國Merck公司。

1.3 動物

日本大耳兔，雌雄兼用，體質量1.8～2.4 kg，購自吉林大學動物實驗中心［許可證號：SCXK（吉）2016-007］。所有動物實驗遵循威海海洋職業學院有關實驗動物管理和使用的規定，均符合3R原則。

2 方法與結果

2.1 IMP-SD-HMSRT的制備

2.1.1 IMP-SD的制備及晶型分析 參考文獻方法[5]制備IMP-SD。取10 g歐前胡素原料藥和50 g PVP K30置于1000 mL圓底燒瓶中，加入600 mL無水乙醇得混懸液。置于45 ℃水浴中磁力攪拌5 h（轉速為800 r/min），減壓旋蒸除去有機溶劑得殘留物，收集并研磨成細粉，即得IMP-SD，過24目篩，置于干燥器中保存。

取歐前胡素原料藥、PVP K30、物理混合物（比例同IMP-SD）和IMP-SD粉末約8 mg，置于玻璃槽中，壓制平整，進行X射線粉末衍射（X-ray powder diffraction，XRPD）分析。掃描條件為銅靶，掃描速度：5°/min，掃描范圍（2）：3°～45°，結果見圖1。歐前胡素在3°～45°有大量的晶型衍射峰，在物理混合物的XRPD圖譜中仍可觀察歐前胡素原料藥到在9.6°、9.9°、16.1°、18.0°、19.8°、24.1°、35.2°等處的特征晶型衍射峰，說明簡單混合未改變歐前胡素存在狀態。在IMP-SD的XRPD圖譜中歐前胡素的晶型衍射峰均消失不見，說明歐前胡素轉變成為無定型物質，同時也證明IMP-SD制備成功。

2.1.2 IMP-SD-HMSRT的制備 IMP-SD-HMSRT的處方工藝研究均按200片進行制備。保持IMP-SD含量為240 mg/片（以歐前胡素計40 mg/片），加入處方量的HPMC K15M和釋藥速率調節劑（PEG 400與PEG 4000混合物）等輔料，加入淀粉補充片質量至0.5 g/片，混勻。6%淀粉漿制軟材，20目篩制粒，真空干燥12 h，20目篩整粒，加入0.8%硬脂酸鎂，混勻后壓制成直徑1.1 cm片劑，即得IMP-SD-HMSRT。

圖1 XRPD結果

2.2 HPLC法測定歐前胡素含量

2.2.1 色譜條件 色譜柱為Agilent XDB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫為30 ℃；流動相為甲醇-水（60∶40）；檢測波長為300 nm；體積流量為1.0 mL/min。理論塔板數以歐前胡素計不低于8000，色譜圖見圖2，結果表明輔料不干擾歐前胡素含量測定，專屬性高。

圖2 陰性溶液(A)、歐前胡素對照品(B) 和IMP-SD- HMSRT樣品(C) 的HPLC圖

2.2.2 對照品溶液的配制及線性關系考察 采用甲醇配制質量濃度為500 μg/mL的歐前胡素對照品儲備液。取適量，流動相稀釋至20、10、5、1、0.1、0.05 μg/mL，各質量濃度平行3份。進樣，記錄歐前胡素各質量濃度（）的峰面積（），作線性回歸得回歸方程＝18.106 5＋0.774 6，＝0.999 7，線性范圍為0.05～20 μg/mL。

2.2.3 供試品溶液的配制 取10片IMP-SD- HMSRT，研磨至細粉，稱取0.5 g置于100 mL量瓶中，加入50 mL甲醇震蕩混勻，超聲10 min，放置20 min，并用甲醇-水（60∶40）定容。取適量過0.45 μm微孔濾膜，取續濾液0.5 mL置于25 mL量瓶中，甲醇-水（60∶40）定容，即得IMP-SD-HMSRT供試品溶液。

2.2.4 重復性考察 按照“2.2.3”項下方法平行制備6份IMP-SD-HMSRT供試品溶液，分別進HPLC測定歐前胡素含量，計算其RSD為1.62%，結果表明重復性良好。

2.2.5 精密度考察 取質量濃度為0.05、5、20 μg/mL的歐前胡素對照品溶液分別作為低、中、高質量濃度，連續進樣6次進行分析。結果顯示低、中、高質量濃度的RSD值分別為0.95%、0.69%、0.74%，結果表明本實驗精密度良好。

2.2.6 穩定性考察 取IMP-SD-HMSRT供試品溶液置于室溫，分別于0、2、4、8、12、24 h進樣分析，計算得歐前胡素質量濃度的RSD為1.12%，結果表明供試品溶液在24 h內穩定性良好。

2.2.7 加樣回收率考察 取9份0.25 g的IMP-SD- HMSRT細粉置于100 mL量瓶中，分成低、中、高3組，分別加入歐前胡素對照品10、20、30 mg，按照“2.2.3”項下所述方法分別制備IMP-SD-HMSRT的供試品溶液，進樣測定歐前胡素含量。結果顯示，歐前胡素平均加樣回收率為99.43%，RSD為1.24%。

2.3 IMP-SD-HMSRT釋放度測定方法

轉籃法考察體外釋藥情況。設置溶出儀轉速為75 r/min，溫度為（37.0±0.5）℃，取6片IMP-SD- HMSRT同時放入900 mL蒸餾水的溶出杯中。分別于0、2、4、6、8、10、12 h取樣3 mL至離心管中，密封，并補加3 mL蒸餾水（溫度為37 ℃）。0.45 μm微孔濾膜（水膜）過濾樣品，進樣測定歐前胡素含量，計算各點累積釋放率，繪制體外釋藥曲線。

2.4 單因素試驗考察各因素對IMP-SD-HMSRT釋藥的影響

2.4.1 骨架材料型號對IMP-SD-HMSRT釋藥的影響 固定IMP-SD含量為240 mg/片，骨架材料用量為45 mg/片，PEG 400與PEG 4000用量比為1∶1，PEG總用量為20 mg/片等條件不變，分別考察骨架材料型號（HPMC K4M、HPMC K15M、HPMC K30M）對IMP-SD-HMSRT體外釋藥的影響，結果見圖3。HPMC K4M相對分子質量較小，藥物釋藥容易，因而體外釋藥相對較快；而HPMC K30M相對分子質量較大，形成的凝膠層相對較厚，導致體外釋藥相對較慢。HPMC K15M作為骨架材料時由于分子量適中，制得的IMP-SD-HMSRT體外釋藥行為相對理想，故后續研究均采用HPMC K15M作為IMP-SD-HMSRT的骨架材料。

2.4.2 HPMC K15M用量的考察 固定IMP-SD含量為240 mg/片，HPMC K15M為骨架材料，PEG 400與PEG 4000用量比為1∶1，PEG總用量為20 mg/片等條件不變，分別考察HPMC K15M用量（30、45、60 mg/片）對IMP-SD-HMSRT釋藥行為的影響，結果見圖4。當HPMC K15M用量為30 mg/片時體外釋藥相對較快，用量為60 mg/片體外釋藥相對較慢，而用量為45 mg/片時IMP-SD- HMSRT體外釋藥相對適中，可見其用量對IMP-SD- HMSRT體外釋藥影響較大，后續需要進一步優化。

圖3 骨架材料型號的考察(, n = 3)

圖4 HPMC K15M用量的考察(, n = 3)

2.4.3 PEG 400用量比例的考察 固定IMP-SD含量為240 mg/片，HPMC K15M為骨架材料，用量為45 mg/片，PEG總用量為20 mg/片（PEG 400與PEG 4000混合物）等條件不變，分別考察PEG 400所占PEG總用量比例（30%、50%、70%）對IMP-SD- HMSRT釋藥的影響，結果見圖5。PEG 400和PEG 4000的相對分子質量不同，因而兩者比例不同時對IMP-SD-HMSRT體外釋藥產生一定影響。PEG 400用量比例相對較大時（70%）體外釋藥相對較快，比例相對較小時（30%）為體外釋藥相對較慢，當用量為50%時IMP-SD-HMSRT體外釋藥相對適中。可見PEG 400用量比例對IMP-SD-HMSRT體外釋藥影響較大，后續需要進一步優化。

2.4.4 PEG用量的考察 固定IMP-SD含量為240 mg/片，HPMC 15M為緩釋材料，PEG 400用量比例為50%等條件不變，分別考察PEG總用量（30、20、10 mg/片）對IMP-SD-HMSRT釋藥行為的影響，結果見圖6。PEG物質在IMP-SD-HMSRT中起到調節釋藥速率的作用，當PEG用量較大時（30 mg/片）體外釋藥相對較快，比例相對較小時（10 mg/片）為體外釋藥相對較慢，后續需對PEG用量進一步優化。

圖5 PEG 400用量比例的考察(, n = 3)

圖6 PEG用量的考察(, n = 3)

2.5 Box-Behnken響應面法優化IMP-SD-HMSRT處方

2.5.1 實驗方案 根據單因素考察結果，選擇HPMC K15M用量（30、45、60 mg/片，1）、PEG 400所占PEG總用量的比例（30%、50%、70%，2）和PEG總用量（10、20、30 mg/片，3）作為主要影響因素，各影響因素的水平見表1。

對于IMP-SD-HMSRT來講，在2 h的累積釋放率（2）應防止出現突釋或遲釋，6 h的累積釋放率（6）應防止出現釋藥不足或過度釋藥，12 h累積釋放率（12）應達基本釋放完畢要求。采用綜合評分（）進行評價，公式為＝|2－0.3|×100＋|6－0.7|×100＋|12－0.95|×100，以綜合評分為響應值，采用Box-Behnken響應面法優化IMP-SD- HMSRT處方，根據實驗組合分別制備不同處方的IMP-SD-HMSRT，并分別測定2、6、12 h的累積釋放率，計算值，結果見表1。

2.5.2 模型的擬合及最佳處方 對實驗數據進行擬合，得出的2次多元回歸方程為＝6.48＋2.811＋2.592－13.233－0.6812－5.6513－0.8523＋8.5712＋5.1222＋11.7032，方差分析見表2。擬合結果顯示，2＝0.987 1，adj2＝0.970 6，說明擬合值與實測值相關性良好。模型＜0.000 1（具極顯著性意義），失擬項的＝0.148 3＞0.05（無顯著性意義），說明該模型未知因素干擾小。根據方差分析結果，方程中1、2、3、13、12、22和32各項均具顯著性或極顯著意義（＜0.05、0.01）。固定HPMC K15M用量、PEG 400比例和PEG總量的某一因素，得其他2因素對綜合評分的三維曲面圖，見圖7。

表1 Box-Behnken試驗設計結果(n = 3)

Table 1 Experiments results of Box-Behnken (n= 3)

序號X1/(mg?片?1)X2/%X3/(mg?片?1)L2/%L6/%L12/%Y序號X1/(mg?片?1)X2/%X3/(mg?片?1)L2/%L6/%L12/%Y 130 (?1)30 (?1)20 (0)33.765.488.216.11045701024.750.480.239.7 245 (0)50 (0)2031.473.294.45.31145703034.676.297.112.9 345502033.670.796.55.91260302022.757.884.619.9 460 (+1)5010 (?1)15.853.475.150.71345502030.673.597.36.4 53070 (+1)2045.176.594.821.81445301021.962.478.732.0 645502034.674.195.69.31545303033.272.398.18.6 760702023.458.390.422.91660503023.874.994.511.6 8305030 (+1)35.877.694.314.11745502032.771.696.25.5 930501026.254.883.430.6

當固定某一因素不變時，隨著其他2因素的增加總評分均呈現先下降后上升趨勢，總評分越小，表明釋藥過程越理想。得到的IMP-SD-HMSRT最佳處方為HPMC K15M用量48.18 mg/片，PEG 400比例58.26%，PEG總量26.62 mg/片；預測的總評分為4.7。

表2 方差分析

Table 2 Analysis of variance

因素方差自由度均方F值P值因素方差自由度均方F值P值 模型2 746.409305.1659.64＜0.000 1X12309.421309.4260.480.000 1 X163.28163.2812.370.009 8X22110.481110.4821.590.002 4 X253.56153.5610.470.014 3X32576.13135.82112.60＜0.000 1 X31 399.2011399.20273.47＜0.000 1殘差35.8275.12 X1X21.8211.820.360.569 4失擬度25.1738.293.150.148 3 X1X3127.691127.6924.960.001 6純誤差10.6542.66 X2X32.8912.890.560.476 8總誤差2 782.2216

圖7 各因素與響應值的三維圖

2.6 工藝驗證

為便于操作，將IMP-SD-HMSRT最佳處方調整為HPMC K15M用量為48 mg/片，PEG 400比例為58%，PEG總量為26.5 mg/片。平行制備3批IMP-SD-HMSRT，分別測定2、6、12 h的累積釋放率，并按照“2.5.1”項下方法計算綜合評分。3批IMP-SD-HMSRT體外釋藥結果見圖8，說明確定的最佳處方工藝重復性良好，綜合評分分別為5.1、4.6、4.8，均與預測值4.7接近，且12 h平均累積釋放率達到95.54%。

圖8 IMP-SD-HMSRT體外釋藥曲線(, n = 6)

2.7 歐前胡素普通片及IMP-SD片的制備和體外釋藥比較

取歐前胡素和IMP-SD粉末適量，分別加入淀粉混合均勻，6%淀粉漿制軟材，20目篩制粒，真空干燥12 h，20目篩整粒，加入0.8%硬脂酸鎂，混勻后壓制成直徑1.1 cm片劑，即得歐前胡素普通片及IMP-SD片。

按“2.3”項下方法比較歐前胡素普通片、IMP- SD片和IMP-SD-HMSRT體外釋藥情況，結果見圖9。IMP-SD片在0～4 h釋藥速率較快，在4 h基本釋放完畢。將IMP-SD制備成IMP-SD-HMSRT后釋藥緩慢，12 h累積釋放率為96.07%，而歐前胡素普通片在12 h累積釋放率僅為33.40%。由于IMP-SD- HMSRT具有明顯的緩釋特征，為與后續藥動學研究保持一致，因此增加了18 h取樣點。

圖9 歐前胡素普通片、IMP-SD片和IMP-SD-HMSRT體外釋藥曲線(, n = 6)

2.8 藥動學研究

2.8.1 給藥及取血方案 取18只健康家兔，分為歐前胡素普通片組、IMP-SD片組和IMP-SD-HMSRT組，給藥前禁食0.5 d，但可自由飲水。用開口器將片劑送入家兔口中，溫水送服。歐前胡素普通片組于0.25、0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8 h于耳緣靜脈處取血約1 mL置于肝素化離心管中。IMP-SD片和IMP-SD-HMSRT組分別增加取血點至12 h和18 h。血漿樣品均于3500 r/min離心3 min，取血漿密封，置于?18 ℃冰箱保存。

2.8.2 血漿樣品的處理[5]甲醇配制質量濃度為800 ng/mL的異歐前胡素作為內標溶液。常溫解凍后吸取血漿樣品100 μL置離心管中，加入內標溶液40 μL，醋酸乙酯-石油醚（1∶1）2 mL，渦旋6 min，5000 r/min離心5 min。取上層有機相，置于空白離心管中，45 ℃的氮氣緩慢吹干，于殘渣加入100 μL甲醇復溶，繼續于5000 r/min離心5 min即得血漿樣品，待測。

2.8.3 溶液配制及線性曲線考察 采用甲醇稀釋配制成質量濃度為1000、500、250、100、50、25 ng/mL的歐前胡素對照品溶液，分別取100 μL，45 ℃的氮氣緩慢吹干，加入100 μL空白血漿，渦旋6 min，即得歐前胡素血漿對照品溶液。按照“2.8.2”項下所述方法處理樣品，進HPLC測定歐前胡素與內標的峰面積。歐前胡素與內標的峰面積比（）對歐前胡素質量濃度（）進行線性回歸后得回歸方程為＝1.426 8＋10.265 9，＝0.992 2，因此，歐前胡素血漿對照品在20～1000 ng/mL線性關系良好。

2.8.4 專屬性考察 取空白血漿、歐前胡素＋空白血漿和血漿樣品分別進HPLC，色譜圖見圖10，可見，血漿內源性物質不干擾歐前胡素及內標色譜峰，因此專屬性較高。

2.8.5 穩定性考察 取歐前胡素普通片給藥1.5 h的血漿樣品，于0、1、3、6、9、12 h進HPLC測定，計算歐前胡素與內標峰面積之比的RSD為7.64%，所以血漿樣品穩定性較好。

2.8.6 精密度考察 取質量濃度為25、250、1000 ng/mL血漿對照品溶液，連續進樣6次，計算得歐前胡素與內標異歐前胡素峰面積之比的RSD分別為6.35%、7.09%、5.78%，所以日內精密度良好。取質量濃度為25、250、1000 ng/mL血漿對照品溶液，每天測定1次，連續測定6 d，計算得歐前胡素與內標峰面積之比的RSD分別為9.15%、10.26%、7.78%，所以日間精密度良好。

圖10 空白血漿(A)、歐前胡素＋空白血漿(B) 和血漿樣品(C) 的HPLC圖

2.8.7 回收率考察 取質量濃度為25、250、1000 ng/mL的歐前胡素對照品溶液，按照“2.8.2”項下所述方法制備血漿對照品溶液，進樣測定歐前胡素與內標的峰面積，計算兩者峰面積比值，帶入＝1.426 8＋10.265 9計算歐前胡素的測得質量濃度，并與實際質量濃度相比計算回收率。結果顯示，平均回收率為95.64%，RSD為7.71%。

2.8.8 藥動學結果 主要藥動學參數采用藥動學分析軟件DAS 2.0進行擬合，結果見表3。歐前胡素不同片劑的藥-時曲線見圖11。IMP-SD片的達峰時間（max）、達峰濃度（max）、藥時曲線下面積（AUC0～t）等與歐前胡素普通片相比具有顯著性差異（＜0.05、0.01），其中max顯著性提前，max顯著性提高，波動幅度較大，相對生物利用度提高至191.47%。IMP-SD-HMSRT的max顯著性延后至（4.08±0.43）h，max降低至（344.67±43.81）ng/mL，血藥濃度波動幅度明顯降低，體內平均滯留時間（MRT）顯著延長（＜0.01），與歐前胡素普通片相比相對生物利用度提高至219.76%，其生物利用度提高幅度高于IMP-SD片。

表3 主要藥動學參數(, n = 6)

Table 3 Main pharmacokinetic parameters (, n = 6)

參數單位歐前胡素片IMP-SD片IMP-SD-HMSRT Tmaxh1.53±0.260.94±0.23*4.08±0.43**## Cmaxng?mL?1405.08±57.33789.66±157.74**344.67±43.81*## T1/2h4.17±0.383.81±0.338.25±1.63**## AUC0～tng?h?mL?11 249.16±184.242 391.73±387.09**2 745.15±416.94**# AUC0～￥ng?h?mL?11 302.85±198.612 483.22±414.84**2 849.18±427.13**# MRTh2.32±0.312.71±0.373.54±0.46**## F%?191.47219.76

與歐前胡素普通片比較：*＜0.05**＜0.01；與IMP-SD片比較：#＜0.05##＜0.01

*< 0.05**< 0.01imperatorin tablets;#< 0.05##< 0.01IMP-SD tablets

2.9 體內外相關性評價

采用Loo-Rigelman法計算IMP-SD-HMSRT體內吸收率（a）[12-13]。

式中(A)表示時間體內藥量，(A)￥為體內總藥量，ρ表示時間血藥濃度，10表示藥物從中央室消除速率常數，d表示時間內的血藥濃度曲線下面積，e為周邊室內藥物量，p表示周邊室藥量

按此公式計算a，并作為因變量，以各時間點的累積釋放率F為自變量進行線性回歸，評價IMP-SD-HMSRT體內外相關性。結果顯示（表4），IMP-SD-HMSRT在pH 6.8磷酸鹽緩沖液中相關系數最高（＝0.981 9），回歸方程為a＝2.008 4F－11.697 3。因此IMP-SD-HMSRT可采用pH 6.8磷酸鹽緩沖液（轉籃法，75 r/min）來預測體外釋放及體內吸收情況。

3 討論

緩釋材料HPMC型號（K4M、K15M、K30M）對IMP-SD-HMSRT體外釋藥影響較大，當HPMC K4M和HPMC K30M作為緩釋材料時容易出現釋藥過快或釋藥過慢情況[14-16]，可能是由于相對分子質量太大或太小時，均影響了凝膠層的緩釋效果。HPMC K15M相對分子質量適中，故選為緩釋材料，其用量對體外釋藥影響較大[16-17]，結合單因素實驗，確定其優化范圍為30～60 mg/片。

圖11 歐前胡素普通片、IMP-SD片和IMP-SD-HMSRT 藥-時曲線(, n = 6)

HMSRT一般是通過擴散及溶蝕機制釋放藥物，因此，需加入一定量的PEG作為釋藥速率調節劑[10]，PEG型號（PEG 400或PEG 4000）對釋藥影響也較大，單獨采用PEG 400或PEG 4000時釋藥速率均不理想，因而采用兩者混合物作為釋藥速率調節劑[9-10,18]。結合單因素實驗結果，確定PEG400所占比例優化范圍為30%～70%，PEG總量優化范圍為10～30 mg/片。

表4 IMP-SD-HMSRT的評價結果(n = 6)

Table 4 Evaluation results of IMP-SD-HMSRT (n = 6)

溶出介質溶出條件回歸方程相關系數 0.01 mol?L?1鹽酸溶液轉籃法，75 r?min?1Fa＝1.794 1 Ft－9.971 50.769 6 pH 4.5醋酸-醋酸鈉緩沖液轉籃法，75 r?min?1Fa＝2.312 8 Ft－17.248 00.908 5 水轉籃法，75 r?min?1Fa＝2.205 7 Ft－16.078 40.968 2 pH 6.8磷酸鹽緩沖液轉籃法，75 r?min?1Fa＝2.008 4 Ft－11.697 30.981 9

制備的IMP-SD-HMSRT釋藥過程可能是：IMP-SD-HMSRT進入水相后緩釋片表層的HPMC高分子材料遇水發生水化，即在緩釋片表層形成凝膠層，該凝膠層對內部藥物釋放起到阻滯效果。同時，IMP-SD-HMSRT處方中釋藥速率調節劑PEG物質遇水發生溶解，在凝膠阻滯層中留下釋藥通道。隨著時間的延長骨架材料逐漸溶蝕，直至藥物釋放完畢[17]，體外釋藥示意圖見圖12。

歐前胡素原料藥溶解度較差，在8 h后血藥濃度已低于定量限。IMP-SD在一定程度上促進了藥物吸收，但在12 h后血藥濃度已低于定量限。而IMP-SD-HMSRT增加了藥物在胃腸道滯留時間，有助于藥物被充分吸收，因而18 h時間點血藥濃度仍在定量限之上，為真實反映IMP-SD-HMSRT體內藥動學行為，故IMP-SD-HMSRT測定時間點設定至18 h。

圖12 IMP-SD-HMSRT體外變化過程

家兔口服藥動學結果顯示，IMP-SD片的max顯著性提前，max與歐前胡素普通片相比提高了1.95倍，這與SD提高藥物溶解度、提高藥物溶出速率及累積溶出度有關，但體內血藥濃度波動幅度較大，可能會對安全性造成影響。而IMP-SD- HMSRT使max大大降低，這是由于緩釋片中的高分子材料HPMC K15M口服遇水后形成凝膠層，控制了IMP-SD中藥物的釋放速率，同時也影響了入血速度，使max顯著性延后[19]，max波動幅度減小，且IMP-SD-HMSRT的生物利用度提高幅度高于IMP-SD片，說明HMSRT有助于藥物被充分吸收，提高生物利用度[19-20]。本研究成功制備了IMP-SD- HMSRT，后期還需對其劑量[20]、給藥方案、質量標準以及藥效學評價等繼續進行研究。

志謝：本研究由山東省職業教育欒會妮名師工作室資助（2019）

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Preparation of imperatorin solid dispersion hydrogel matrix sustained-release tablets and pharmacokinetic evaluation

XU Zhi-jie

Weihai Ocean Vocational College, Weihai 264300, China

To prepare imperatorin solid dispersion (IMP-SD) hydrogel matrix sustained-release tablets (IMP-SD- HMSRT), and investigate the pharmacokinetic behavior and-correlation.Solvent evaporation was used to prepare IMP-SD. On the basis of single factor investigation, HPMC K15M dose, PEG 400 proportion and amounts of PEG dose were selected as main influencing factors, composite score of cumulative rate of 2, 6, and 12 h of IMP-SD-HMSRT was used as response value, Box-Behnken design-response surface method was employed to optimize formulation of IMP-SD-HMSRT, and the pharmacokinetic behavior in rabbits was studied. Loo-Rigelman method was used for the evaluation ofandcorrelation.The optimal formulation of IMP-SD-HMSRT: HPMC K15M dose was 48 mg/tablet, PEG 400 proportion was 58%, PEG total dose was 26.5 mg/tablet. The accumulative release of IMP-SD-HMSRT could achieve 95.54% whthin 12 h. Pharmacokinetic results showed thatmaxfluctuated slightly, andmaxwas delayed to (4.08 ± 0.43) h. The relative bioavailability of the IMP-SD-HMSRT was enhanced to 219.76% comparing to imperatorin tablets.release behavior of IMP-SD-HMSRT in pH 6.8 phosphate buffer saline was associated with itspharmacokinetics.The drug release of IMP-SD-HMSRT was slowly, and promoted absorption. The correlation between the absorptionand releaseis fine.

imperatorin; solid dispersion; hydrogel matrix sustained-release tablets; Box-Behnken design-response surface method; pharmacokinetics

R283.6

A

0253 - 2670(2022)17 - 5321 - 09

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.17.008

2022-02-17

國家自然科學青年基金資助項目（51804021）

徐志杰（1984—），女，碩士，講師，研究方向為現代給藥系統與制劑新技術。Tel: (0631)7697687 E-mail: xzj18669333606@126.com

[責任編輯 鄭禮勝]