山羊產氣莢膜梭菌病的病理學診斷與防治

隨韶璞，張海濤，朱廣琴

（徐州生物工程職業技術學院，江蘇 徐州 221000）

產氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens）是一種厭氧性的革蘭氏陽性細菌，因具有莢膜而得名[1]。它作為一種重要的人獸共患病原菌，廣泛存在于動物的食物和糞便、天然水體及土壤中，能引發人和動物食物中毒、氣性壞疽、壞死性腸炎等多種疾病[2]。正常情況下產氣莢膜梭菌不致病，但在不利條件下，如養殖環境差、管理不良、飼料突然改變或搭配不當等，容易造成畜禽消化系統功能紊亂，有益菌群減少，產氣莢膜梭菌數量增加，繼而產生毒素引發疾病[3]。產氣莢膜梭菌外毒素種類較多，但以4種外毒素最為主要，分別是α、β、ε和ι，據此可將產氣莢膜梭菌分為5種毒素型，分別是A型、B型、C型、D型、E型[4]。近年來，隨著人們對梭菌毒素的深入研究，發現產氣莢膜梭菌至少還存在另外14種毒素，其中β2（cpb2）和腸毒素（cpe）與人和動物疾病有著密切關系[5-7]。羊腸毒血癥是由D型產氣莢膜梭菌引發的一種急性、非接觸性、傳染性疾病[8]，死亡率高，且起病急，羊發病后具體癥狀為：糞便呈黏性黃褐色，病羊站立不穩、低頭拱背等。一旦羊群發病，會給養羊業造成極大的經濟損失[9]。養殖人員須及時做好防控措施，杜絕羊腸毒血癥的蔓延和肆虐，從而保障經濟效益。

1 發病情況

2021年10月徐州市某養殖場山羊發病，病羊消瘦，發病2～3 d后拉稀，呼吸困難，繼而死亡。

2 臨床癥狀

羔羊3～15日齡拉黃色黏性糞便，呼吸困難，精神萎靡，體溫略高（38～39 ℃）。20日齡開始表現為四肢軟弱無力，站立不起，消瘦。

3 剖檢結果

病羊剖檢可見腸鼓氣，腸黏膜脫落，十二指腸和空腸段呈現不同程度的出血；腎臟腫大且質脆。死亡較長時間的病羊腎臟切開之后，皮質部質地較軟，呈軟泥狀，髓質部較皮質部稍堅實；肺淤血、水腫，呈深紅色；胃內充滿大量未消化飼料。

4 病理組織學檢查結果

取病變明顯的腸、腎臟、肺臟、肝臟、心臟和脾臟等組織制作石蠟切片染色，進行病理組織學檢查。結果可見小腸黏膜上皮呈現大量的壞死脫落，黏膜下層出現水腫、疏松，固有層小血管擴張充血，大量淋巴細胞浸潤（圖1）。腎臟髓質部小血管擴張充血、出血。腎臟腎小管上皮細胞嚴重變性、壞死（圖2），部分腎小管上皮細胞發生脂肪變性（圖3）。肺臟肺泡腔內可見水腫液以及少量淋巴細胞、嗜中性白細胞和巨噬細胞等炎性細胞浸潤（圖4），局部肺泡內存在脫落的肺泡上皮細胞和大量紅細胞。肝臟肝血竇擴張，含有程度不等的紅細胞，部分肝細胞發生輕度脂肪變性（圖5），匯管區部位的肝細胞壞死，形成了大小不等的凝固性死灶，并有淋巴細胞浸潤。心內膜下心肌纖維發生渾濁腫脹，胞漿淡染，心肌細胞顆粒變性（圖6）。心肌纖維之間組織結構疏松，水腫（圖7）。脾臟內彌散性分布大量紅細胞，脾小體結構消失，淋巴細胞數量減少（圖8）。

圖1 小腸黏膜大量淋巴細胞浸潤

圖2 腎小管上皮細胞嚴重變性

圖3 腎小管上皮細胞發生脂肪變性

圖4 肺泡腔內炎性細胞浸潤

圖5 肝細胞輕度脂肪變性

圖6 心肌細胞顆粒變性

圖7 心肌纖維間組織結構疏松

圖8 脾臟內淋巴細胞數量減少

5 討論

診斷山羊產氣莢膜梭菌病的方法多樣，包括涂片、厭氧菌培養、免疫學ELISA法、單克隆抗體法、基因芯片法等，其中，涂片法操作簡單，但特異性和敏感性均不高，如果僅靠涂片有可能引起誤診；厭氧菌培養準確性較高，但花費時間較長，并且容易受到其他因素的影響，比如操作不當會造成假陰性結果[10-11]。免疫學ELISA方法需要酶標儀等特殊設備，不僅敏感性和特異性不高，且非特異反應容易影響結果，因此使用限制極大[12]。單克隆抗體法的特異性雖高，但敏感性較低[13]。基因芯片檢測可靠性雖強，但價格昂貴，且關于產氣莢膜梭菌的芯片也較少，因此該方法尚不能普及[13-14]。由此看來，在實際生產中，采用病理組織學檢查結合涂片顯微鏡觀察法診斷山羊產氣莢膜梭菌病是一種較為可靠的方法。

近年來，由產氣莢膜梭菌引起的腸毒血癥在世界各地蔓延，呈全球流行態勢，給各國畜禽養殖業的發展帶來嚴重危害[15]。產氣莢膜梭菌毒素耐酸不耐熱，且易被胰蛋白酶和胃蛋白酶分解，由于母畜分泌的初乳有對胰蛋白酶起到抑制作用的成分，所以幼齡動物比成年動物更易染病。研究發現，綿羊較容易被產氣莢膜梭菌感染，特別是2～12月齡且膘情良好的羊只，而山羊被感染報道較少。羊只染病具有季節性，以夏秋兩季高發[16]。D型產氣莢膜梭菌可引發羊腸毒血癥，又稱為軟腎病或類快疫，病變腎臟腫大、出血，質地變軟，呈現典型的“軟腎”癥狀[17-18]，和本病例出現癥狀一致。研究顯示，本病的另一特征性病變是腸胃內充滿氣體和液體內容物，十二指腸內存在出血點，且腸黏膜充血、出血或潰瘍，導致腸壁呈現紅色，因此俗稱“紅腸子”[19]，解剖發現死亡山羊也有此特點。感染產氣莢膜梭菌β毒素的動物主要病變部位是空腸，而十二指腸常無明顯變化。家畜空腸感染產氣莢膜梭菌β毒素后，表現空腸黏膜出血性壞死，腸壁變薄，進而引發腸壁破裂和腸穿孔，空腸近端常伴有出血灶，以及黏膜壞死，被感染空腸常在微細血管內發現血栓，這可能是因為十二指腸中含有較高水平的胰蛋白酶，胰蛋白酶受到胰蛋白酶抑制劑抑制，對毒素的分解作用減弱，進而增加了壞死性腸炎的發病概率[20]。上述各臟器的病理變化與本病例中觀察到的基本一致，因此可以確定病羊感染由產氣莢膜梭菌引起的羊腸毒血癥。本次剖檢結果顯示，病羊腎臟切開后，沒有灰白色漿液流出，組織也沒有發生嚴重氣腫。此外，本病例中存在一些不同的病變，病羊的心肌表現為不同程度的變軟，還發現2只病羊的腿肌變為灰白色。此外該養殖場飼養員曾診斷病羊為硒中毒，但經檢測硒濃度，未發現硒超標，并且產氣莢膜梭菌感染不會引起腿肌“白肌病”癥狀，因此腿肌的這種變化是否存在其他感染或應激還有待進一步研究。

6 防治措施

6.1 提高飼養管理水平

飼喂優質飼料，滿足羊的營養需要。羊舍應建于地勢相對較高的位置，以利于保持干燥。嚴禁霜草地帶放牧，飼料保持多樣化，合理搭配，以保證羊只的營養需要，提高羊只的抵抗力。控制飼料中蛋白質的含量，不能過高也不能過低[21]。

6.2 加強環境衛生消毒

勤打掃羊舍，保持干燥、清潔，注意通風，以防因圏內NH3等氣體濃度過高，導致羊只抵抗力下降，從而誘發羊只梭菌病[22]。注意提高羊舍環境水平，養殖設施應定期殺菌消毒，杜絕有害病原菌的傳播，降低羊群發病率。一旦發現患病羊只，應及時隔離，避免疾病大面積傳播[9,23]。

6.3 預防免疫

根據所在地區該病的發生規律、流行特點和疫苗的免疫特性，制定符合本羊場的免疫程序，在每年春、秋兩季給羊只接種“羊快疫、猝狙、腸毒血癥、羔羊痢疾”四聯菌苗[24-25]。