抵抗素、和肽素、氧化型低密度脂蛋白在急性缺血性腦卒中患者中的表達及臨床意義

高善玉 尤年興

揚州大學附屬常熟市第二人民醫院神經內科，江蘇常熟 215500

目前臨床上主要通過影像學檢查等來檢測病情嚴重程度，有可能會延誤病情治療的最佳時機。早期診斷并評估患者病情，能夠制定針對性治療方案改善患者病情，提高預后。血清標志物具有良好敏感性與特異性，所以在排除其他疾病的情況下，利用血清標志物檢測有利于急性腦梗死患者的治療。抵抗素是一種炎癥因子，在糖尿病、缺血性心臟病等疾病中均有表達，并參與其疾病的發展，還與其預后密切相關。和肽素屬于下丘腦分泌的激素，而氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL）是缺血性腦卒中發病的重要標志物，能夠通過促進血管壁炎癥反應等，在急性缺血性腦卒中發生及發展過程中發揮著重要作用。因此推測血清抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平與急性缺血性腦卒中患者可能存在一定程度相關性。鑒于此，本研究回顧性分析江蘇省揚州大學附屬常熟市第二人民醫院收治的85 例急性缺血性腦卒中患者臨床資料，探討血清抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平與急性缺血性腦卒中患者疾病嚴重程度、神經損傷等的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年6月至12月揚州大學附屬常熟市第二人民醫院收治的85 例急性缺血性腦卒中患者作為急性缺血性腦卒中組，選取同期在江蘇省揚州大學附屬常熟市第二人民醫院進行健康體檢的85 名健康人作為健康對照組。急性缺血性腦卒中組中，男45 例，女40 例；年齡55～72 歲，平均年齡（64.42±2.10）歲；根據美國國立衛生研究院卒中量表（National Institutes of Health stroke scale，NIHSS）評 分：輕 度43 例，中度25 例，重度17 例；入院時腦梗死面積：腔隙性腦梗死34 例，中等面積腦梗死26 例，大面積腦梗死25 例。健康對照組中，男43 例，女42 例；年齡55～72 歲，平均年齡（64.53±4.33）歲。兩組的性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經過醫院倫理委員會批準，且所有患者家屬均知情并簽署家屬知情同意書。納入標準：①急性起病符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》中對急性缺血性腦卒中患者的診斷；②本次發病前患者的改良Rankin 量表（modified Rankin scale，mRS）評分＜1 分。③健康對照組均無急性缺血性腦卒中病史，急性缺血性腦卒中家族史，變態反應性疾病史，近期感染史。排除標準：①肝、腎功能障礙者，非急性缺血性腦卒中者；②重大器官損傷者；③患有免疫性疾病者。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 取兩組研究對象發病24 h 內靜脈血液，置一次性的抗凝管中保存，使用3000 r/min 轉速離心機離心，離心半徑10 cm，離心10 min 后分離上清，在-80℃環境中保存。

1.2.2 抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平檢測 采用雙抗體酶聯免疫吸附法對抵抗素、和肽素進行檢測，采用酶聯免疫吸附法對ox-LDL 進行檢測。取50 mmol 碳酸鹽包緩沖液（北京索萊寶科技有限公司，貨號：G0220；規格：500 ml）對ox-LDL 進行稀釋，且加入聚苯乙烯的反應孔中，加蓋處理后，在4℃下置留24 h，次日洗滌3 次后，拋干，在每孔中均加入稀釋液（pH 值=7.4，0.02 mol/L Tris-HCl 緩沖液）稀釋待測標本0.1 ml，加入陽性、陰性對照標本，在42℃下置留60 min，將液體移除并洗滌3 次后，拋干，在每孔中加入ox-LDL抗體0.1 ml，再次置留60 min，將液體移除并洗滌3次，拋干，并在每孔中加入底物液（0.1 mol/L 的NaHPO，0.05 mol/L 的枸櫞酸）混勻，且加入0.1 ml 鄰苯二胺，遮光20 min，再次加入2 mol/L HSO0.05 ml 放置各孔內，終止反應。使用酶標儀檢測A450，分析ox-LDL 水平。

1.3 觀察指標及評價標準

對急性缺血性腦卒中組患者進行抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平、腦梗死面積、神經功能缺損程度、預測值及ROC 曲線進行分析。①比較不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平。①采用MRI 檢測腦梗死灶最大層面直徑＜1.5 cm，為腔隙性腦梗死；梗死灶最大層面直徑1.5～5 cm，為中等面積腦梗死；梗死灶最大層面直徑＞5 cm，為大面積腦梗死。②神經功能損傷程度檢測：采用NIHSS 對急性缺血性腦卒中患者神經功能評估，0～1 分表示正常，2～4 分表示輕度卒中，5～15分表示中度卒中，＞15 分表示重度卒中。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 兩組研究對象抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較

急性缺血性腦卒中組患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1 兩組研究對象抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較（±s）

2.2 不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較

不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。中等、大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于腔隙性腦梗死患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中等面積腦梗死患者，差異有統計學意義（P＜0.05）（表2）。

表2 不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較（±s）

2.3 不同神經功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較

不同神經功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。中度、重度神經功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于輕度神經功能損傷程度患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。重度神經功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中度神經功能損傷程度患者，差異有統計學意義（P＜0.05）（表3）。

表3 不同神經功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較（±s）

2.4 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標聯合檢測對急性缺血性腦卒中的預測價值

ROC 分析抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標聯合檢測預測急性缺血性腦卒中的曲線下面積分別為0.850、0.949、0.921、0.986，見表4、圖1（封三）。

表4 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標聯合檢測對急性缺血性腦卒中的預測價值

圖1 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標聯合檢測診斷急性缺血性腦卒中的ROC 曲線（見內文第87頁）

3 討論

急性缺血性腦卒中是一種急性腦血管疾病，其發病機制復雜，其主要是由于由血液循環障礙和腦缺血缺氧引起的缺血性壞死或腦組織軟化。急性缺血性腦卒中又稱為急性腦梗死，具有發病急、起病快、預后差等特點，是臨床上嚴重威脅人類健康的常見疾病。

抵抗素屬于半胱氨酸分泌蛋白家族，是由脂肪細胞分泌的一種炎癥因子，能夠參與糖尿病、缺血性心臟病等疾病的發展。抵抗素在缺血性腦血管疾病中也發揮著重要作用，有研究表明，抵抗素是一種炎癥因子，在動脈粥樣硬化患者機體中其水平的變化與炎癥標志物超敏C-反應蛋白呈正相關。抵抗素能夠通過激活三磷酸肌醇使血管外平滑肌加速增殖，進而使動脈粥樣硬化過程加快。其能夠通過巨嗜細胞分泌，不僅能夠誘導平滑肌細胞的遷移，加速動脈粥樣硬化的發展，還能夠促使纖維細胞因子的表達，致使纖維帽變薄，導致不穩定斑塊風險。本研究結果顯示，急性缺血性腦卒中組患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。中等、大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于腔隙性腦梗死，差異有統計學意義（P＜0.05）；大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中等面積腦梗死，差異有統計學意義（P＜0.05）。中度、重度神經功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于輕度神經功能損傷程度患者，差異有統計學意義（P＜0.05）；重度神經功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中度神經功能損傷程度患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。提示急性缺血性腦卒中組患者抵抗素水平參與急性缺血性腦卒中的發生，與患者梗死面積、神經功能損傷有關。ROC 分析抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標聯合預測急性缺血性腦卒中的曲線下面積分別為0.850、0.949、0.921、0.986，提示3 種指標聯合預測急性缺血性腦卒中價值高。

和肽素是由神經垂體分泌的一種糖基化肽，由30 多個氨基酸組成。和肽素屬于精氨酸加壓素末端的一部分，是一種生物活性肽，是由多個氨基酸殘基組成，具有調節滲透壓和維持血流動力的生物學功能。和肽素能夠參與機體應激反應，屬于應激反應標志物，當機體發生急性缺血性腦卒中時，其機體內精氨酸加壓素水平急劇上升，導致血容量大幅度升高，且直接導致細胞水腫。有研究表明，其在急性腦梗死、腦出血等重癥疾病的早期診斷及預后判斷中發揮著重要作用，是檢測臨床疾病指標的重要因子。本研究顯示血清和肽素在預測急性缺血性腦卒中風險方面表現出較高的效能，提示和肽素水平升高是急性缺血性腦卒中風險預測因子。

ox-LDL 是動脈粥樣硬化斑塊特有的成分，腦動脈粥樣硬化及血栓形成是缺血性腦卒中的主要發生原因。腦梗死早期是由于腦組織內大量缺血和缺氧，使免疫系統滋生大量炎癥細胞導致LDL-C 轉換形成ox-LDL。有研究發現，在急性缺血性腦卒中患者機體內，其水平明顯升高。王春陽等研究發現，血漿ox-LDL 是急性缺血性腦卒中合并頸動脈斑塊患者預后的影響因素，尤其對大動脈粥樣硬化型、小動脈閉塞型腦卒中患者預后有影響；血漿ox-LDL 水平越高，患者預后越差。當急性缺血性腦卒中發生時，其氧化反應急劇加重，并導致神經功能進一步損傷。ox-LDL屬于缺血性腦卒中的預后不良重要的檢測指標。較多的ox-LDL 會對動脈壁內皮細胞、平滑肌細胞造成嚴重的毒副作用，使血管內皮細胞大量受損，同時還能夠促進血小板的聚集增加內皮細胞的粘附作用，進一步加快血管壁的損傷。趙連江等研究表明，血清CAM、GDF-15、ox-LDL 水平在急性缺血性腦卒中患者中明顯增高，且與NIHSS 評分均呈正相關，可作為判定病情嚴重程度的重要指標，且3 種指標聯合檢測對于急性缺血性腦卒中更具有重要意義。

綜上所述，抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平在急性缺血性腦卒中患者中高表達，且與患者腦梗死面積大小、神經功能損傷嚴重程度有關，高水平的抵抗素、和肽素、ox-LDL 是急性缺血性腦卒中的風險預測因子，3 種指標聯合預測急性缺血性腦卒中具有一定的價值。