lncRNA H19、VEGF、TSGF在卵巢癌中的表達及與卵巢超聲血流參數的相關性

蘇立貞,孟 潔,晉 婕

1.西安高新醫院生殖醫學科,陜西西安 710075;2.西安高新醫院輸血科,陜西西安 710075;3.西安金域醫學檢驗所有限公司,陜西西安 710075

卵巢癌是女性高發的惡性腫瘤之一，發病率僅次于宮頸癌，病死率高居婦科惡性腫瘤的首位，嚴重威脅女性健康[1]。卵巢癌發病初期癥狀不明顯但進展迅速，臨床確診時多已發展到中晚期，錯過了最佳治療時機。早期卵巢癌患者5年生存率高達90%，而晚期卵巢癌患者5年生存率顯著下降，僅為20%～30%[2]。因此，早發現、早治療對提高卵巢癌患者治療效果、延長生存期至關重要。長鏈非編碼RNA H19(lncRNA H19)可通過調節癌細胞增殖、遷移來促進上皮性卵巢癌的發生、發展[3]。血管內皮生長因子(VEGF)可以促進內皮細胞增殖，增加腫瘤組織內血管的通透性，誘導形成新生血管，促進腫瘤轉移[4]。腫瘤特異性生長因子(TSGF)與腫瘤形成、生長密切相關，而且有助于惡性腫瘤血管網的形成，參與腫瘤的形成和轉移過程[5]。卵巢癌的卵巢超聲血流參數具有低阻力、高流速的特點，因此，超聲檢查可用于卵巢癌鑒別診斷、評估分期及血管新生情況[6]。本研究主要探討lncRNA H19、VEGF、TSGF在卵巢癌患者中的表達情況，并分析其與卵巢超聲血流參數的相關性，旨在為卵巢癌患者的病情評估提供新的思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 采用回顧性分析的方法，選取2019年1月至2020年12月西安高新醫院收治的卵巢癌患者116例作為卵巢癌組，患者年齡30～65歲，平均(45.3±8.1)歲。納入標準：(1)首次確診為卵巢癌的患者,臨床資料完整；(2)符合《卵巢惡性腫瘤診斷與治療指南(2021年版)》[7]的相關診斷標準；(3)經術后病理組織檢查確診為卵巢癌。排除標準:(1)合并其他惡性腫瘤；(2)合并生殖系統嚴重疾病；(3)合并重要器官功能不全；(4)無性生活史，不能進行陰道超聲檢查；(5)有精神疾病史。選取同期100例卵巢良性腫瘤患者作為良性組，年齡30～65歲，平均(44.9±8.0)歲，良性組患者均經術后病理組織檢查確診為卵巢良性腫瘤。同期收集100例健康體檢女性作為對照組，年齡30～65歲，平均(45.0±8.5)歲。良性組與對照組均無陰道超聲檢查禁忌證。3組年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2指標檢測方法 抽取所有研究對象空腹靜脈血5 mL注入無添加劑的干燥試管，顛倒混勻數次后以3 000 r/min的速度離心10 min，吸取上清液置于-80 ℃超低溫冰箱中保存，統一檢測。lncRNA H19采用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)進行檢測，儀器為ABI 7500型熒光定量PCR儀。VEGF、TSGF采用羅氏Cobas e601全自動電化學發光免疫分析儀及其配套試劑進行檢測。所有操作均由同一檢驗師在同一臺儀器上完成，嚴格按照標準操作規程進行檢測，室內、室間質控均在控。

1.3超聲檢查 采用美國GE公司生產的Voluson E8超聲儀，探頭頻率2.5～10.0 Hz。所有研究對象避開月經期，囑其排尿后仰臥，采取膀胱截石位，外陰消毒后將探頭涂抹耦合劑，套上避孕套后將探頭置入陰道內進行掃查。圖像穩定后連續測量3次卵巢超聲血流參數[收縮期峰值血流速度(PSV)、舒張末期血流速度(EDV)、血管搏動指數(PI)、阻力指數(RI)]，取平均值進行記錄。

2 結 果

2.13組lncRNA H19、VEGF、TSGF水平比較 卵巢癌組lncRNA H19、VEGF、TSGF水平明顯高于良性組及對照組，良性組lncRNA H19、VEGF、TSGF水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組lncRNA H19、VEGF、TSGF水平比較

2.2lncRNA H19、VEGF、TSGF單獨及聯合檢測對卵巢癌的診斷價值 lncRNA H19、VEGF、TSGF聯合檢測診斷卵巢癌的靈敏度和特異度分別為88.3%和85.9%,曲線下面積(AUC)為0.902，高于各項指標單獨檢測，見表2和圖1。

表2 lncRNA H19、VEGF、TSGF單獨及聯合檢測對卵巢癌的診斷效能

圖1 lncRNA H19、VEGF、TSGF單獨及聯合檢測診斷卵巢癌的ROC曲線

2.33組PSV、EDV、PI、RI比較 卵巢癌組PSV、EDV明顯高于良性組、對照組，PI、RI明顯低于良性組、對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；良性組PSV、EDV明顯高于對照組，PI、RI明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 3組PSV、EDV、PI、RI比較

2.4卵巢癌患者lncRNA H19、VEGF、TSGF水平與卵巢超聲血流參數的相關性 卵巢癌患者lncRNA H19、VEGF、TSGF水平與PSV、EDV均呈正相關(P<0.05)，與PI、RI均呈負相關(P<0.05)，見表4。

表4 卵巢癌患者lncRNA H19、VEGF、TSGF水平與卵巢超聲血流參數的相關性

3 討 論

卵巢癌是女性腫瘤死亡的第5大原因，發病機制尚未完全明確，可能與內分泌功能改變、遺傳因素、微生物感染等相關[8-9]。卵巢癌早期發病隱匿，且缺乏早期評估患者病情的方法，75%的卵巢癌患者確診時已處于Ⅲ期或Ⅳ期，發生盆腹腔轉移[10]。因此，早發現、早治療是提高卵巢癌患者生存率的關鍵。血清學指標檢測因具有創傷小、可重復檢測的特點而被廣泛應用于臨床。經陰道超聲檢查是婦科疾病的常用檢查手段之一，可以為卵巢癌病情評估提供參考。

lncRNA H19是最早被證實的與腫瘤相關的非編碼RNA。lncRNA H19位于染色體11P15.5編碼區域，在細胞質和細胞核中均有表達，主要影響細胞的增殖和分化[11]。既往研究顯示，lncRNA H19在卵巢癌患者中呈高表達，是影響患者預后的危險因素[12]。VEGF是一種寡二聚體糖蛋白，是最重要的促血管生長因子，具有促進血管內皮細胞分裂和增殖的作用，可作為卵巢癌早期診斷、鑒別、預后判斷的參考指標[13]。TSGF是由腫瘤血管分泌的生長因子，富含糖蛋白和氨基酸，可促進腫瘤血管生成，在腫瘤早期就可以大量釋放入血[14]。研究發現，TSGF在卵巢癌患者中具有較高的臨床應用價值，可用于早期診斷、預測復發[15]。本研究中，卵巢癌患者lncRNA H19、VEGF、TSGF水平明顯高于卵巢良性腫瘤患者和健康體檢女性，說明這些指標均參與了卵巢癌的發生。采用ROC曲線分析lncRNA H19、VEGF、TSGF對卵巢癌的診斷價值，發現3項指標聯合檢測的診斷價值明顯提高，靈敏度和特異度分別可達88.3%和85.9%，優于各項指標單獨檢測。

臨床上常常采用PI、RI作為判斷良惡性腫瘤的參考指標，而PSV、EDV則是輔助參考標準[16]。本研究顯示，與良性組比較，卵巢癌組的PSV、EDV明顯升高，而PI、RI明顯下降，符合卵巢癌患者卵巢超聲血流參數高流速、低阻力的特征，在卵巢癌的發生、發展過程中，癌細胞處于高代謝狀態，其異常增殖、生長需要大量的新生血管，導致血流加速、阻力下降。相關性分析結果顯示，lncRNA H19、VEGF、TSGF水平與卵巢超聲血流參數密切相關，提示lncRNA H19、VEGF、TSGF在一定程度上可以反映卵巢癌的血流情況，但具體機制有待進一步研究。

綜上所述，lncRNA H19、VEGF、TSGF水平在卵巢癌患者中明顯升高，且其水平與卵巢超聲血流參數密切相關。聯合檢測上述3項指標有助于卵巢癌患者的早期診斷及病情評估，值得臨床推廣應用。但本研究樣本量較小，可能存在選擇偏倚，后期仍需擴大樣本量進一步對結果進行驗證。