VSTM2A、MICA基因多態性與非小細胞肺癌發病風險及患者臨床病理特征的關系

王英英，朱 嬌，趙 燕，葉 倩，劉 花

1.陜西中醫藥大學附屬醫院腫瘤二科，陜西咸陽 712000；2.兵器工業五二一醫院腫瘤血液病科，陜西西安 710065；3.陜西中醫藥大學附屬醫院腫瘤醫院二病區，陜西咸陽 712000；4.陜西中醫藥大學研究生學院，陜西咸陽 712046

肺癌是全球最常見的惡性腫瘤，2018年新發肺癌人數約210萬，預計死亡人數約180萬[1-3]。非小細胞肺癌(NSCLC)是肺癌的主要病理組織類型，占肺癌的80%[4-6]。NSCLC早期無明顯臨床表現，大多數患者確診時已發生轉移。盡管近年來治療技術快速發展，但NSCLC患者的預后仍然較差，5年生存率僅為20%左右[7-8]。因此，早期診斷NSCLC對于改善患者預后具有重要意義。V-組跨膜結構域包含物2A (VSTM2A)由240個氨基酸組成，包含一個N端信號肽、兩個糖基化位點和一個免疫球蛋白V組結構域[9-10]。既往研究表明，VSTM2A在調節前脂肪細胞分化中發揮作用，VSTM2A-rs7457728位點的基因多態性參與結腸癌、宮頸癌和前列腺癌的發生、發展[11]。主要組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)位于6號染色體上，編碼一種跨膜蛋白，除中樞神經系統外，幾乎在所有人體組織中都有表達[12-13]。研究報道，MICA具有高度的基因多態性，MICA-rs2516448位點的基因多態性參與胃癌、肝癌和乳腺癌等多種癌癥的發生[14]。然而，VSTM2A和MICA在NSCLC中的作用尚不清楚。因此，本研究對VSTM2A-rs7457728和MICA-rs2516448位點基因多態性與NSCLC發病風險及臨床病理特征的關系進行探討，以期為NSCLC的臨床診斷提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2020年1月陜西中醫藥大學附屬醫院收治的90例NSCLC患者為肺癌組，另選取同期90例健康志愿者為對照組。肺癌組男43例，女47例；年齡39～68歲，平均(54.32±6.57)歲。對照組男45例，女45例；年齡37～70歲，平均(55.88±7.21)歲。兩組年齡、性別比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。肺癌組納入標準：病理學檢查證實為NSCLC；未接受放化療；患者臨床資料完整。排除標準：合并其他惡性腫瘤；合并重要器官嚴重器質性病變；病理診斷為小細胞肺癌或不明確者。對照組納入標準：體檢顯示身體健康；無NSCLC家族史。排除標準：拒絕參與本研究；臨床資料不完善。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準，研究對象簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑 Mass ARRAY質譜儀購自美國Sequenom公司；DNA提取試劑盒購自美國賽默飛世爾科技公司；引物由上海生工生物工程有限公司設計合成，引物序列如下，VSTM2A-rs7457728上游引物:5′-AGTTCTTCTTCAATTTCTTTCA-3′，下游引物:5′-TTCATGCAACACTGTAGAGCT-3′；MICA-rs2516448上游引物:5′-TATAATTGGGCCCCAATTTACAGAT-3′，下游引物:5′-ATTTCCGGGTAGCA GTTTAGACCA-3′。

1.3方法 受試者于清晨空腹采集靜脈血3 mL，抗凝后置于-80 ℃保存。按照試劑盒說明書操作，離心后提取靜脈血中的DNA，采用Sequenom Mass ARRAY質譜儀對VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點進行基因分型檢測。

2 結 果

2.1兩組VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點等位基因及基因型分布比較 經驗證，肺癌組和對照組VSTM2A-rs7457728和MICA-rs2516448位點的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律，具有群體代表性。肺癌組VSTM2A-rs7457728位點C等位基因、CC基因型頻率明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。對照組MICA-rs2516448位點T等位基因、TT基因型頻率明顯低于肺癌組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點等位基因及基因型分布比較[n(%)]

組別nMICA-rs2516448基因型TTCTCCMICA-rs2516448等位基因TC肺癌組9035(38.89)42(46.67)13(14.44)112(62.22)68(37.78)對照組9020(22.22)45(50.00)25(27.78)85(47.22)95(52.78)χ27.98424.586P0.018<0.001

2.2VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點基因多態性與NSCLC發病風險的關系 Logistic回歸分析發現，攜帶VSTM2A-rs7457728位點CC基因型、MICA-rs2516448位點TT基因型是NSCLC發病的危險因素(P<0.05)，見表2。

表2 VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點基因多態性對NSCLC發病風險影響的Logistic回歸分析

2.3VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點基因多態性與NSCLC患者臨床病理特征的關系 VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點基因多態性與NSCLC分化程度、臨床分期和是否發生淋巴結轉移無關(P>0.05)。腺癌患者MICA-rs2516448位點TT基因型頻率明顯高于鱗癌患者，差異有統計學意義(P<0.05)；VSTM2A-rs7457728位點基因多態性與NSCLC病理類型無關(P>0.05)，見表3。

表3 VSTM2A-rs7457728、MICA-rs2516448位點基因多態性與NSCLC患者臨床病理特征的關系(n)

3 討 論

本研究分析了VSTM2A-rs7457728和MICA-rs2516448位點基因多態性與NSCLC發病風險的關聯性，發現VSTM2A-rs7457728位點CC基因型和MICA-rs2516448位點TT基因型是NSCLC發病的危險因素(P<0.05)；此外，腺癌患者MICA-rs2516448位點TT基因型頻率高于鱗癌患者(P<0.05)，這些結果表明，VSTM2A-rs7457728和MICA-rs2516448位點的基因多態性與NSCLC發病風險之間存在關聯，且MICA-rs2516448位點的基因多態性與NSCLC患者的病理類型有關。

VSTM2A基因在人類基因組中的位置位于染色體7p11.2，編碼的VSTM2A屬于分泌性蛋白[15]。既往研究發現，VSTM2A參與多種癌癥的發生，如結腸癌、前列腺癌及宮頸癌等[16]。然而，關于其在NSCLC中的作用研究較少。1項對宮頸癌的全基因組關聯研究顯示，VSTM2A-rs7457728位點的基因多態性可導致宮頸癌發病風險升高，提示VSTM2A-rs7457728位點可能是與癌癥易患性有關的重要位點[17]。本研究結果表明，VSTM2A-rs7457728位點中C等位基因突變顯著增加了NSCLC的發病風險，這與許冰霜等[16]對宮頸癌的研究結果一致。

MICA在正常組織細胞中表達較少，其高表達于乳腺癌、卵巢癌、結腸癌和肝癌等多種惡性腫瘤中。人類MICA基因位于染色體6p21.3，基因具有高度多態性[18]。既往研究發現，MICA基因多態性與多發性骨髓瘤、胃癌和口腔鱗癌發病風險增加有關[19]。蔣麗琴等[20]發現，MICA-rs2516448位點的基因多態性可導致卵巢癌發病風險增高，本研究也發現MICA-rs2516448位點中T等位基因突變顯著增加了NSCLC的發病風險，且腺癌中TT基因型頻率高于鱗癌。

綜上所述，VSTM2A和MICA基因多態性與NSCLC的發病風險有關，然而，本研究納入樣本量有限，仍需進行大樣本量的多中心研究對結果進行驗證。