潔凈室VHP傳遞窗性能測試技術的應用

農　敏　譚婷心

潔凈室VHP傳遞窗性能測試技術的應用

農敏譚婷心

（廣西梧州制藥（集團）股份有限公司，廣西 梧州 543000）

在無菌藥品的生產過程中，VHP（氣化過氧化氫）傳遞窗可用于由低級別向高級別潔凈區傳遞物料，并對窗體及所要傳遞的物料進行表面滅菌。為了考察VHP傳遞窗的性能是否能達到GMP的要求，文章采用不同的技術手段對VHP傳遞窗性能進行測試，可以證明該VHP傳遞窗能達到使用要求，把物料對潔凈室的污染降低到最低程度，減少因物料污染給藥品帶來污染的風險。

VHP傳遞窗；性能測試技術；潔凈區

引言

新版GMP顯著提高了無菌藥品生產質量的相關法規要求，與歐盟GMP接軌，提出了A、B、C、D分級以及更為嚴格的環境懸浮粒子和微生物方面的控制要求。新版GMP無菌附錄1第四十五條要求，必要時，可采用熏蒸的方法降低潔凈區內衛生死角的微生物污染，應當驗證熏蒸的殘留水平。針對這種情況，VHP傳遞窗則提供了可以驗證的滅菌技術。

在藥品生產過程中，必須保證向無菌區域傳遞物料的安全，向關鍵生產區域傳遞的物料、器具等，均需要經過滅菌方式方可傳入高級別潔凈區，而對于不能承受高溫滅菌的物品，則可以選用VHP滅菌傳遞窗。

本次研究的研究對象是凈化型VHP傳遞窗，其采用VHP熏蒸的方式，對窗體及所需要傳遞的物料進行表面滅菌，滅菌效果徹底，能殺死絕大多數病原菌及病毒，滅菌后無殘留，所耗費的時間也相對較短。對VHP傳遞窗的性能進行測試，考察其滅菌過程參數符合情況、過濾器完整性、腔體自凈效果、腔體潔凈度、VHP氣體濃度和分布以及VHP滅菌效果，證明此測試方法的有效性，減少由于VHP傳遞窗滅菌不完全等因素導致污染的情況發生，保證藥品生產的質量。

1　VHP傳遞窗構造

VHP傳遞窗為具備各種功能控制組件的獨立制動的系統，其各個部件如下。

（1）傳遞窗腔體：腔體材料為304不銹鋼板，VHP往高效過濾器進入通往腔體內，配備有回風口用于循環排風，傳遞窗的前后配制有玻璃視鏡，可用于觀察墻內滅菌過程。

（2）進風系統和排風系統：該系統主要由進風風機和排風風機組成，分別位于VHP傳遞窗的進口和出口處，風機的葉輪和電機部分完全隔離，高濃度的VHP不能腐蝕風機的任何元器件。

（3）VHP蒸汽發生系統：主要由儲液罐、蠕動泵、蒸發室和預熱器四個部分組成，此系統能夠在高溫的狀態下，短時間內產生大量的過氧化氫氣體，用于腔體內的滅菌。

（4）控制系統：控制系統由PLC進行控制，其依照控制界面傳導的指令，可以處理所有與傳遞窗操作相關的操作，可以通過手動或者自動控制該滅菌過程，對系統進行相應的管理和監控，并且可以進行系統安全和數據方面的提取，系統還可以對用戶登錄/登出系統的時間、參數設置和修改和操作人員簽名進行控制。

2　VHP傳遞窗構造及滅菌過程概述

VHP傳遞窗整個滅菌過程包括六個階段。

（1）腔體自凈：此狀態時，無菌空氣由低噪聲離心風機壓入，再經過高效過濾器均壓以后，通過排風管對腔體進行自靜；

（2）腔體干燥：此狀態時，腔體內部進行預熱干燥，當干燥時間達到設定值后，進入下一階段；

（3）滅菌提升：待預熱器、蒸發室達到預設溫度至滅菌溫度后，開始腔體滅菌；

（4）滅菌維持：當腔體內過氧化氫氣體濃度上升至設定值時，開始滅菌計時，使腔體內的過氧化氫氣體濃度和相對濕度保持穩定狀態，達到設定的滅菌溫度后，進入下一階段；

（5）腔體置換：待傳遞窗腔體內殘余過氧化氫濃度≤1 ppm時，通風階段結束；

（6）結束運行。

3 性能測試部分

3.1 材料與試劑

PAO氣溶膠、VHP蒸汽化學試紙條、食品級35%過氧化氫溶液、嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片、TSB培養基、試管。

3.2 儀器與設備

生化培養箱、ATI-2H光度計、TDA-6C氣溶膠發生器、MET ONE 3445懸浮粒子計數器（采樣量100 L）。

3.3 測試方法

3.3.1 高效過濾器完整性測試

對高效過濾器進行完整性測試，可考察其過濾器是否存在泄漏，確保腔體內的自凈效果達到要求。

（1）測試步驟：①在高效過濾器的上游發氣溶膠作為塵源，待氣溶膠在腔體內混合均勻后，把該濃度設定為100%基準值；②在上游的氣溶膠濃度達到20 ug/L～80 ug/L的時候，手持采樣頭在高效過濾器下方進行掃描，檢測時采樣頭距離高效過濾器2 cm～3 cm，掃描速度在3 cm/s～5 cm/s；③檢測氣溶膠的濃度，此時光度計上顯示的濃度和上游的濃度比值，為泄漏率。

（2）判定標準。過濾器和框架泄露限度應≤0.01%。

（3）試驗結果。高效過濾器完整性測試的光度計掃描結果顯示，透過率均小于0.1%，結果符合要求，說明該VHP傳遞窗高效過濾器完整無泄漏，可提供潔凈氣流。

3.3.2 VHP系統自凈時間測試

通過在VHP傳遞柜內部制造一定濃度粒子下的污染環境，然后進行粒子采樣，計算粒子到達相應級別靜態標準的時間，該時間即為自凈時間。通過考察自凈時間是否能達到標準要求，可證明該系統的送風系統所送出的潔凈氣流能夠及時把污染氣體清除，達到自凈的效果。

（1）測試步驟：①在VHP傳遞窗內放置粒子計數器，利用氣溶膠發生器持續發煙至粒子超出B級潔凈區潔凈級別（0.5 μm粒子）100倍（即352000粒/ m3以上）以上后停止發煙；②打開懸浮粒子計數器連續采樣，設置每一分鐘記錄一次粒子數據，直至達到潔凈室B級級別的靜態標準要求；③統計粒子達到B級級別的自凈時間，測試共進行三次。

（2）判定標準。經過自凈后，VHP傳遞窗內空氣潔凈度應能達到B級潔凈室靜態標準要求（B級區：≥0.5 μm粒子不得過3520粒/ m3），且自凈時間T≤15 min。

（3）測試結果。自凈時間測試結果如表1所示。

表1 自凈時間檢測結果

通過三次測試數據表明，三次自凈時間分別為9 min、10 min和10 min，測試結果均符合要求，說明該VHP傳遞窗自凈效果良好，可快速凈化由粒子帶來的污染，也符合相應潔凈區域潔凈度要求，該測試方法有效。

3.3.3 滅菌過程參數符合情況測試

通過考察滅菌過程各相關運行參數是否符合要求，來確保此過程是符合既定的規程來進行滅菌的，從而證明滅菌過程無任何偏差，減少物料污染的風險。

（1）測試步驟。進行VHP滅菌程序，觀察并記錄滅菌過程中相關參數。

（2）判定標準。滅菌過程參數應符合標準要求。

（3）測試結果。滅菌過程參數測試結果如表2所示。

通過三次滅菌參數測試數據表明，各滅菌步驟測試結果均符合要求，說明該VHP傳遞窗滅菌過程是完全符合既定設定程序要求的，該滅菌過程有效。

表2 滅菌過程參數檢測結果

3.3.4 VHP氣體分布測試

VHP氣體分布測試，是為了確認待滅菌物品以最大裝載量，并按照與生產操作相同條件下放置的情況下，VHP氣體仍然能夠均勻分布于傳遞窗內各個測試點。

（1）檢測方法：①于VHP傳遞窗內放置與生產操作相同最大裝載量物品；②分別將VHP蒸汽化學試紙條均勻分布于傳遞窗內15個測試點（共分三層分布，每層分布5個測試點，分布如圖1所示）；③啟動VHP傳遞窗自動滅菌運行程序，記錄滅菌時VHP濃度值，滅菌結束后，觀察化學試紙條變色情況，測試共進行三次。

（2）判定標準。滅菌時過氧化氫濃度峰值應＞300 ppm，化學試紙條均能顯著變色，各指示條變色后顏色基本一致，無顯著性差異。

（3）試驗結果。VHP氣體分布測試結果如表3所示。

通過三次測試數據表明，滅菌時傳遞窗內VHP濃度均能超過300 ppm，經過滅菌后，化學試劑條的顏色均能顯著變色，且無顯著差異，說明在該滿載情況下，VHP氣體均能均勻分布于腔體內，并能達到要求的濃度，測試符合要求，該測試方法有效。

表3 VHP氣體分布測試結果

3.3.5 VHP滅菌效果測試

通過檢測滅菌過程VHP的滅菌效力進行確認，確保其通過VHP滅菌后，能夠殺死腔體內中所有微生物，達到預期的滅菌效果。

（1）檢測方法：①VHP傳遞窗滿載情況下，按VHP氣體分布測試點布置嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片（孢子量106）；②運行VHP傳遞窗自動滅菌程序，并記錄運行參數；③待滅菌程序完成并通風結束后，迅速將嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片取下，并在無菌條件下接種至TSB培養基中；④在無菌條件下，將一片未經過接觸VHP的嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片接種至TSB培養基中，作為陽性對照管，另一支只含TSB培養基的試管作為陰性對照管；⑤將所有試驗培養基試管至于生化培養箱中（55℃～60℃）培養7天，觀察培養基是否渾濁，測試共進行三次。

（2）判定標準：①試驗結束后，觀察接種有試驗樣品菌片的TSB培養基，應不渾濁，陽性對照應有菌生長（渾濁），陰性對照應無菌生長，則此次滅菌效果判定合格；②若有試驗樣品菌片的TSB培養基有菌生長，陽性對照有菌生長，陰性對照無菌生長，則判定此次滅菌效果不合格；③若陽性對照無菌生長或陰性對照有菌生長，則試驗樣品結果無論如何，均判定此次試驗無效。

（3）試驗結果。VHP滅菌效果測試結果如表4所示。

通過三次檢測數據表明，經過VHP傳遞窗在線滅菌后，各測試點的TSB培養結果均無菌生長，陽性對照均有菌生長，陰性對照均無菌生長，說明在滿載物料的情況下，經過VHP滅菌程序后，均能有效殺滅傳遞窗空間內微生物，可使芽孢數量下降6個對數單位，滿足了滅菌的要求，減少了因由低級別潔凈區向高級別潔凈區傳遞物料而產生的風險，且滅菌結束后VHP的殘留均小于1 ppm，符合殘留量要求。

表4 VHP滅菌測試結果

4 討論

本文主要闡述了VHP傳遞窗性能測試技術的應用，通過對VHP傳遞窗進行性能測試，其測試結果完全符合要求，證明了該測試技術的可靠性和有效性，該傳遞窗能用于藥品無菌制劑生產線上物料的傳遞，能充分說明該性能測試方法是合乎日常生產實際的。

然而，該VHP傳遞窗的性能測試方法往往通常不止上述這幾項測試方法，對滅菌效果有效性影響的因素還有很多，比如傳遞窗的密封性是否會直接影響腔體內VHP的濃度，從而對滅菌效果造成影響；系統的蠕動泵充氣速率也有較大影響，充氣速率的快和慢，往往會影響過氧化氫氣體的濃度變化，從而影響滅菌效果，同時還應當注意檢查蠕動泵系統的完整性，看是否存在泄漏的風險；還有就是在充氣和保壓階段，充氣時間的長短，還有過氧化氫的注射流量也對滅菌效果有較大影響，一般延長充氣時間，加大過氧化氫的用量，都會識得滅菌效果更佳；另外裝載模式也會對滅菌效果有較大影響，因為被滅菌的物料表面必須與VHP充分的進行接觸，若裝載量過大，容易存在部分死角而達不到充分的滅菌效果，增加物料傳遞的污染風險，所以裝載物應留有部分間隙以防滅菌不完整。

5 結束語

VHP傳遞窗的性能測試技術還有待于專業技術人員更深入的研究與探討，設計出更多符合測試設備性能的技術項目，減少由低風險潔凈區向高風險潔凈區傳遞物料的風險，從而更充分保障藥品生產的質量控制過程，生產出質量合格的產品。

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Application of VHP Transfer Window Performance Test Technology in Clean Room

In the production process of sterile drugs, VHP (vaporized hydrogen peroxide) transfer window can be used to transfer materials from low-level to high-level clean areas, and sterilize the window and the materials to be transferred. In order to investigate whether the performance of VHP transfer window can meet the requirements of GMP, this paper uses different technical means to test the performance of VHP transfer window, which can prove that the VHP transfer window can meet the use requirements, reduce the pollution of materials to the clean room to a minimum, and reduce the risk of drug pollution caused by material pollution.

VHP transfer window; performance testing technology; clean area

TQ46

A

1008-1151(2022)06-0056-04

2022-03-26

農敏（1984－），女，廣西橫州人，廣西梧州制藥（集團）股份有限公司工程師，從事藥品設備、藥品設備技術研究工作。

譚婷心（1985－），女，廣西博白人，廣西梧州制藥（集團）股份有限公司工程師，從事藥品技術、藥物警戒研究工作。