兩種生化分析儀檢測ALT結果分析

楊 雪 李俊良 李桂花 李聚林　

兩種生化分析儀檢測ALT結果分析

楊 雪1李俊良2李桂花3李聚林4

（1.中國人民解放軍聯勤保障部隊第九二四醫院，廣西桂林 541002；2.廣西龍潭醫院，廣西柳州 545005；3.廣西桂平市中醫醫院，廣西桂平 537200；4.廣西血液中心，廣西柳州 545005）

目的：通過兩種生化分析儀檢測丙氨酸氨基轉移酶結果分析，進一步了解兩種生化分析儀檢測ALT結果的差異及其影響因素。方法：用兩臺型號、規格及新舊不同的生化分析儀分別對同樣的40份無償獻血者血漿標本ALT及1份中值質控品進行ALT酶活力（U/L）檢測，并分別對其檢測結果進行均數比較、正態分布的W檢驗、Pearson相關檢驗、回歸分析，X-Y散點圖、離群值檢驗等。結果：兩種生化分析儀對40份標本的 ALT酶活力水平（U/L）均數值分別為26.48±14.97、25.30±15.20（＞0.05）；W1=0.952，W2=0.948（均＞0.05）；兩組檢測數據直線相關（r=0.994，＜0.05）；回歸方程Y=1.01x-1.46；無離群值。結論：兩種生化分析儀檢測ALT結果具有可比性，注意把握有關影響因素對搞好ALT檢測有重要意義。

生化分析儀；檢測ALT；結果；分析；可比性；影響因素

引言

丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）廣泛存在于人體多種組織和細胞中，是反映肝損傷的一個很靈敏的指標，并作為我國供血（漿）者及血制品的篩選項目，保障受檢者健康、臨床醫療質量與血液安全。全自動生化分析儀集自動化技術、光學、微電子與計算機科學、網絡技術以及臨床生化檢測全過程監測與數據處理、遠程管理于一身，具有操作簡單、使用方便、準確性好、精密度高、性能穩定可靠、工作效率高、可節省大量人力物力等特點[1]，較適合于目前速率法檢測ALT等生化指標的測定，在我國已得到較廣泛應用，并成為當今醫療衛生機構包括采供血系統不可缺少的主要生化檢測設備。由于該生化分析儀品種多、結構與性能不盡相同，國內國外產品琳瑯滿目，多數使用單位通常都配置兩臺或兩臺以上，以滿足工作需要。因此，對機構內部全自動生化分析儀之間檢測結果的比對分析，就成為室內質控與室間質評的重要內容，是檢驗結果數據共享與互認的基礎，有利于提高檢測質量水平，更好地保障受檢者健康與生命安全。為此對兩種生化分析儀檢測ALT結果進行分析，報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器

正常在用的兩臺全自動生化分析儀，其中儀器1為國產儀器，啟用不到兩年，儀器2為進口儀器，已使用多年。

1.2 試劑

復合質控品（英國RANDOX），ALT靶值為36U/L，可控范圍（36±3.5）U/L，批號1011UN，效期為2019年1月。速率法檢測試劑分別來自上海科華公司（批號2016052N，效期為2017年5月26日）與浙江夸克公司（批號160421，效期為2017年4月20日）。

1.3 血樣收集與檢測

參照我國《血站技術操作規程》與美國臨床和實驗室標準化協會（CLSI）EP9-A3文件[2,3]，選擇性收集無償獻血者新鮮血液樣本40份，其中ALT酶活力水平≤10 U/L的7份，11-39 U/者26份、ALT酶活動力水平＞40 U/者7份，包括ALT酶活動力水平＞50 U/的樣本3份，經37±1℃水箱放置10 min直到凝固并收縮出血清后，方能離心上機。有纖維蛋白絲或凝塊則吸出血清上機。自血液采集到開始使用儀器檢測不超過24 h，使用儀器1檢測后2 h內送儀器2檢測。ALT質控樣品隨同40份標本一起檢測，并記錄檢測結果。

1.4 對兩種生化儀的ALT檢測結果分析方法

根據40份ALT血樣以及1份質控樣品的檢測結果，對兩儀器的檢測數據作均數比較、W檢驗、Pearson相關檢驗、回歸分析，繪制散點圖，離群值檢驗，比較兩臺儀器檢測數據的均數差異、正態分布情況和兩臺儀器檢測結果的相關性，評估與診斷兩儀器檢測結果的可比性。

1.5 統計學處理

采用Excel 2003和SPSS13.0統計軟件處理數據，計量資料采用±描述，兩樣本均數比較用方差分析F檢驗，并對兩組變量進行Pearson相關檢驗，＜0.05表示兩變量存在直線相關。離群值檢驗用拉依達檢驗法，正態分布使用W檢驗[4]。

2 結果

儀器1與儀器2兩種生化分析儀的ALT檢測結果分析見表1與圖1。

表1 儀器1與儀器2兩種生化分析儀的ALT檢測結果分析（n=40）

儀器1為X，儀器2為Y，n40；回歸方程Y=1.01x-1.46。兩組數據無離群值。

3 討論

據對儀器1和儀器2兩種生化分析儀檢測ALT結果分析顯示，在質控樣品檢測提示兩檢測系統處于在控的條件下，或儀器提示為“在控”時，儀器１和儀器2兩種生化分析儀對40例獻血者血漿的ALT酶活力水平（U/L）均數比較無明顯差異（＞0.05），兩組檢測數據直線相關（r=0.994），并均呈正態分布（＞0.05），對質控樣品檢測結果也基本與其質控品生產商提供的靶值36 U/L水平相當（見表1），兩種儀器檢測同一樣本的40例獻血者血清的XY散點圖無明顯區別，圖示無離群點，兩組數據離群值檢驗也未發現離群點（見表1與圖1）。兩儀器檢測ALT結果具有可比性（見表1）。由于ALT是定量項目，在實際工作中，兩組均數間比較通常也足以證明可比性。由于考慮本組兩儀器產地、儀器型號、結構性能、監測環境、實驗用水、試劑、使用年度、質量管理、操作者水平等諸多差異，特增加了W檢驗、Pearson相關檢驗、回歸分析、X-Y散點圖、離群值檢驗，結果表明這些檢驗與兩組均數比較結果的相關性，也進一步驗證了“試驗標本數至少40份”的正確度估計方法具有的適用性與可靠性[2]。。

全自動生化分析儀可通過雙波長例如（340 nm與405 nm）獲得兩個波長的吸光度差有效扣除標本溶血、黃疸、混濁的影響，以免妨礙檢測靈敏度。雙試劑法孵育時間長，防干擾能力強，可提高工作試劑的穩定性和檢測準確性[5]。液體型雙試劑可提高檢測結果的重復性[6]。儀器加樣精度高，試劑倉與反應盤恒溫可靠，具有自動清洗和攪拌功能，在降低和清除干擾的同時，也提高并改善了反應系統性能。試驗用水超純凈（電導率1 μs/cm），檢測環境衛生及恒濕、防震、防風、防強光和抗電磁干擾等條件控制，試劑與質控品的正確應用，以及計量管理的規范化和儀器制造商或經銷商工程技術人員的定期與及時檢測、校準與調試，單位醫學工程部、醫學裝備科或設備科工程師們的及時檢查、維護維修等管理，均對有效保障生化分析儀在ALT檢驗結果的準確性與可靠性方面發揮重要作用

全自動生化分析儀的應用除了應注意結合儀器的性能特征與熟練掌握儀器操作技能以外，尚須熟練掌握相關檢驗質控業務工作要領，其中包括注意利用儀器的質控定標功能以及檢測時加入質控樣品隨測試樣本進行檢測規則，但不主張也不建議均以廠家質控給出的靶值直接作為判斷是否失控的標準，因為廠家給出的靶值會因為儀器不同、試劑不同、檢測環境不同以及操作人員技能等因素存在差異。常規的檢驗科實驗室應以每天檢測質控所長期累計下來的統計均值做為靶值，按照Westguard規則判斷是否失控，依照其采用多個質控規則，從而增加了誤差檢出能力，識別質控品在控、該分析批在控或失控、屬隨機誤差還是系統誤差等[7]。質控品檢測值的穩定只能證明檢測系統穩定，重復性好，至于檢測是否存在系統偏差，還需要參加臨檢中心組織的室間質評[7]。而較為系統與全面地檢查考核兩種生化分析儀或兩種檢測系統的比對、驗證或檢測結果分析，應包括正確度、精密度、線性范圍、攜帶污染、干擾實驗等的綜合評價，注意查找偏差來源，包括樣本種類、標本數量、運輸和貯存條件、操作人員、實驗室環境（溫濕度、光電磁干擾等）[1]。

美國臨床和實驗室標準化協會（clinical and laboratory standards institute，CLSI）EP9-A3等文件[3]，在檢測系統和檢測方法對比方面，對實驗方法、數據處理、統計學方法等都作了更改，如EP15-A提供了用戶驗證精密度方案，此方案只需5 d，每天每個濃度重復測定4次，而EP5-A2方案則需20 d。故新方案的應用范圍更廣，更科學[8,9]，較好地考慮了標本保存不穩定對檢測結果的影響以及降低成本等問題。

丙氨酸氨基轉移酶（ALT）又稱谷丙轉氨酶，廣泛存在于多種組織和細胞中，如肝、腎、心、骨骼肌、十二指腸、脾、肺等。ALT主要分布于肝臟，其次為腎臟、心臟及肌肉，肝內ALT活性遠比其他臟器內ALT活性高，血清中含量很少，由于肝臟內ALT最高，（約2850 U），為血漿的數百倍。當肝細胞損害時，大量ALT滲入血漿中，使血液內ALT顯著升高，ALT是反映肝損傷的一個很靈敏的指標[7]。ALT個體差異較大，性別、年齡、飲酒、疲勞、肥胖、運動等也可影響ALT水平。男性ALT水平普遍高于女性，甚至是女性的4.48倍[10]。

轉氨酶是催化α氨基酸和α酮酸之間氨基移換反應的一組，其中，以丙氨酸氨基轉移酶（ALT）和天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）最具有臨床意義，是臨床實驗室最常用的檢驗項目之一，如傳染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝、膽管炎、心肌梗死、心肌炎、心力衰竭時肝淤血和腦出血，骨骼肌疾病；腎臟及胰腺組織壞死伴有急性肝炎的傳染性單核細胞增多癥，及外科手術、麻醉、劇烈運動、早期妊娠等，以及氯丙嗪、異煙肼、奎寧、水楊酸制劑、乙醇、鉛、汞、四氯化碳、有機磷等可引起ALALT活性增高，磷酸吡多醛缺乏癥可導致ALT活性降低[5]。

ALT的升高多為生理因素，與體檢者的性別、年齡、職業、季節、獻血次數有關，據對某市20560名健康獻血者通過多重線性回歸顯示，諸多影響ALT增高的因素當中季節和性別是2類影響最大的因素，這2類因素當中男性和秋季獻血的影響最為突出。而且不同年齡組中28歲～37歲為最高組，18歲～27歲組最低。ALT與職業的關系密切，學生ALT值明顯低于整個人群，公務員高于其他職業的人群。表明性別、年齡、職業ALT的差異與其對應人群參與社會活動的活躍程度、高脂飲食、酒類攝取等方面的因素相聯系。有文獻報道由飲食引起的脂肪性肝病的發病率不斷升高，可高達10%[11]。此外，非酒精性脂肪肝檢出率與不良生活習慣有密切關系。常見的危險因素有缺乏體力勞動、大量飲酒、飲酒、肥胖、高血糖等[12]。體重質量指數、飲酒、運動及體力勞動、熬夜、服用藥物是ALT升高的影響因素；清淡飲食是ALT升高的保護因素；吸煙對ALT的影響不大。單因素分析與多因素Lougistic回歸分析結果基本一致[13]。

ALT檢測無論在臨床疾病診療、參軍入伍、入學、就業、防疫保健、健康體檢等都是一項較為重要的生化檢驗的重要項目而得以廣泛應用。隨著科技的進步以及人們生活水平與健康需求的不斷提高，ALT檢測技術和儀器設備也有了飛速的發展，ALT檢測越來越準確、快捷、方便、自動化性能優異，檢測方法先后有酮體粉法、賴氏法、干化學法、速率法，從而進一步促進了ALT檢測的應用，更有效地提高了臨床服務質量與人民的健康保障水平和血液安全。

速率法中的單試劑法和雙試劑法都可用于常規測定，目前，更推薦使用雙試劑法，尤其是液體雙試劑法。雙試劑法孵育時間較長，能有效消除干擾反應，提高檢測準確性，是目前ALT測定的首選方法。值得注意的是，使用雙試劑法進行ALT檢測的實驗室，須注意辨別雙試劑的真偽。真正的雙試劑，在試劑2中僅含α-酮戊二酸。假的雙試劑，在試劑2中含有α-酮戊二酸和NADH，而在試劑1中卻沒有NADH。使用假的雙試劑時，在孵育期中因為沒有NADH參與，不能消除α-酮酸的影響。因此，這種雙試劑就等于單試劑[5]。

ALT檢測是我國獻血者獻血前與獻血后血液檢測的必檢項目[2,14,15]，《獻血漿者須知》（2021年版）也明確了丙氨酸氨基轉移酶（ALT）用速率法測定，應當≤50 U/L。我國采供血機構自本世紀以來已越來越廣泛地應用全自動生化分析儀進行獻血者的ALT檢測，并注意保證實驗室按照安全、準確、及時、有效和保護獻血者隱私等原則開展血液檢測工作[14]。隨著血液需求逐年增長，血液集中化檢測工作陸續開展，檢測壓力不斷加大，并存在獻血前初篩與獻血后復檢測系統的多樣化，如配置的全自動生化分析儀不同產地、不同型號、不同實驗室、不同使用場地、新老儀器間的同時使用，以及全自動生化分析儀與普通可見光分光光度計、紫外分光光度計、干式生化儀等并存，分別用于質控抽查或常規檢查、獻血前獻血者篩查等。檢測方法有速率法、賴氏法、干化學法，相互間必要的檢測結果驗證和比對，使彼此檢測結果更準確、可靠，將必然有助于提高工作效率，減少浪費與糾紛，或免去大型設備攜帶不方便、運行條件苛刻、不利于野外或流動作業與較快較便捷獲得檢測結果等。如果檢測結果不準確、不可靠、不及時則容易造成傷病員得不到及時救治、影響血液質量，或引起獻血者不滿，對獻血者保留不利[16]，也不利于保障臨床用血需求與安全。因此，如何結合有關實際有效提高及穩定檢測質量，有利于檢測結果的比對與互認，努力保障臨床醫療質量與安全，將對提高檢測系統功效、保障受檢者與受血者身心健康與生命安全，節約資源、減少浪費等有益[17]，無論在常態或非常態時期都有重要意義，符合我國頒布《醫療器械監督管理條例》保證醫療器械的安全、有效，保障人體健康和生命安全的原則與目的要求[18,19]。

本組兩種生化分析儀檢測ALT結果分析表明兩種生化分析儀對質控樣品的檢測結果一致，兩組均數比較無明顯差異（＞0.05），檢測數據直線相關（r=0.994），XY散點圖結合兩組數據離群值檢驗均未發現離群值（點），回歸方程顯示兩種生化分析儀檢測值緊貼回歸直線較均勻分布，兩變量關系確切，由一個變量可推算另一個變量。可認為兩種生化分析儀檢測ALT結果具有可比性與可靠性。

4 結束語

丙氨酸氨基轉移酶（ALT）廣泛存在于人體多種組織和細胞中，是反映人體多種組織與器官損傷的重要指標，結合全自動生化分析儀操作簡單、準確性好，自動控制與抗干擾能力強，利用速率法ALT值檢測，對臨床疾病的診斷和治療、防疫保健，控制有關病源微生物流行傳播，保障獻血者健康與血液安全，提高臨床醫療質量與全民健康水平都有重要意義。了解并掌握ALT檢測與健康的各種影響因素，將對人們的健康與工作有益。

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Analysis of ALT Results Detected by Two Biochemical Analyzers

Objective: By analyzing the results of alanine aminotransferase detected by two biochemical analyzers, we can further understand the difference of ALT results detected by two biochemical analyzers and its influencing factors. Methods: ALT enzyme activity (U/L) of 40 plasma samples from the same unpaid blood donors and 1 median quality control sample were detected by two biochemical analyzers with different models, specifications and old and new, and the test results were compared by means, W test of normal distribution, Pearson correlation test, regression analysis, X-Y scatter diagram, outlier test, etc. Results: The mean values of ALT enzyme activity (U/L) of 40 samples of the two biochemical analyzers were 26.48±14.97, 25.30±15.20 (>0.05); W1=0.952, W2=0.948 (>0.05); there was a linear correlation between the two groups (r=0.994,<0.05); regression equation Y=1.01x-1.46; no outliers. Conclusion: The results of ALT detected by the two biochemical analyzers are comparable. It is of great significance to grasp the relevant influencing factors for ALT detection.

biochemical analyzer; detect ALT; results; analysis; comparability; influencing factors

R446

A

1008-1151(2022)07-0084-04

2022-05-07

楊雪（1983－），女，中國人民解放軍聯勤保障部隊第九二四醫院派駐門診部護士長，副主任護師，研究方向為采供血與門診部護理管理。

李俊良（1982－），男，廣西龍潭醫院醫學裝備科工程師，研究方向為信息管理與醫用設備管理。