郴州地區急性下呼吸道感染住院兒童中人腺病毒分型及流行病學特點分析*

陳孝會 邱麗霞

湖南省郴州市第一人民醫院檢驗科 423000

腺病毒首次被發現的時間為二十世紀五十年代，發現者為Rowe，其是通過人體的腺樣組織發現該病毒，因此將其命名為腺病毒[1]。急性下呼吸道感染(ALRTI)是世界范圍內尤其是發展中國家5歲以下兒童死亡的一個重要因素，每年大約有200萬兒童死于急性下呼吸道感染[2]，人腺病毒感染在世界范圍內均具備較高的發病率，其可導致多種疾病的發生。在檢測人腺病毒分子生物學分型方法上，目前應用的方法主要為PCR技術和基因測序技術[3]。目前有研究報道分析了嬰幼兒急性下呼吸道感染中腺病毒的檢測與臨床特征，但其大多均未開展分型分析，同時關于急性下呼吸道感染患兒中，人腺病毒感染的分型情況以及相應的流行病學特點分析數量并不多[4]。本次研究選取郴州市第一人民醫院兒童醫院呼吸內科收治的518例診斷為急性下呼吸道感染兒童的鼻拭子標本，采用PCR-熒光探針法檢測待測樣本中的人腺病毒以及3、7型別鑒定，探討郴州地區急性下呼吸道感染兒童中人腺病毒感染情況，3、7型別分布及相關流行病學特點，以及人腺病毒引起的兒童急性下呼吸道感染的臨床特點，為兒童人腺病毒防控提供依據，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取郴州市第一人民醫院兒童醫院呼吸內科2021年1月1日—9月30日收治的518例診斷為急性呼吸道感染患兒。入組患兒中男310例，女208例；年齡1個月～6歲，患兒臨床癥狀及體征主要為咳嗽、咳痰、發熱、憋喘、肺部啰音等。入組患兒鼻拭子標本均經直接免疫熒光法檢測呼吸道相關病毒，包含呼吸道合胞病毒、流感病毒(A、B型)、副流感病毒(1、2、3型)、鼻病毒。納入標準:急性下呼吸道感染診斷標準參照《諸福棠實用兒科學》(第7版)[5]；經醫院倫理委員會批準并獲得監護人的同意，確定研究對象及標本收集。所有患兒痰培養或咽拭子培養為陰性，排除細菌性感染。排除標準：免疫系統疾病患者；凝血功能障礙患者；入組前接受抗菌藥物治療的患者；合并其他可能影響研究結果的疾病。

1.2 研究方法 病毒核酸提取：將標本于室溫自然解凍，置漩渦振動器上充分震蕩，取200μl混合液放天隆科技病毒核酸提取板中上機自動提取核酸。病毒核酸檢測：采用湖南圣湘生物科技有限公司生產的腺病毒及腺病毒 3、7 型核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)檢測待測樣本中的人腺病毒以及3、7型別鑒定。呼吸道病毒篩查試劑使用DiagnosticHybrids，Inc.海德診斷有限公司的七項呼吸道病毒檢測試劑盒(免疫熒光法)，項目包含呼吸道合胞病毒、流感病毒(A、B型)、副流感病毒(1、2、3型)、鼻病毒。

1.3 觀察指標 (1)本組患兒人腺病毒陽性率、性別與年齡情況；(2)人腺病毒的基因分型結果；(3)人腺病毒混合感染情況；(4)不同臨床特征呼吸道感染患兒的人腺病毒感染情況。

2 結果

2.1 本組患兒人腺病毒陽性情況 本組患兒中人腺病毒陽性率為10.04%(52/518)，見表1。

表1 本組患兒的人腺病毒陽性率情況

2.2 人腺病毒的基因分型結果分析 人腺病毒陽性樣品序列主要為人腺病毒7型與3型，見表2。

表2 人腺病毒的基因分型結果分析

2.3 人腺病毒混合感染情況分析 52份人腺病毒陽性樣品中5份為單純感染，47份為混合感染，主要和呼吸道合胞病毒、人鼻病毒混合感染，見表3。

表3 人腺病毒混合感染情況分析

2.4 不同臨床特征呼吸道感染患兒的人腺病毒感染情況分析 52份人腺病毒陽性患兒中診斷為肺炎46例，支氣管炎3例，咳喘待查3例；人腺病毒感染患兒與非感染患兒的臨床癥狀差異無統計學意義(P>0.05)，見表4。

表4 不同臨床特征呼吸道感染患兒的人腺病毒感染情況分析

3 討論

兒童急性下呼吸道感染以嬰幼兒為主要群體，尤其是6個月以內的嬰兒，其發病率相對較高[6]。人腺病毒一般會造成呼吸系統不適，對嚙齒類動物有致癌能力，或能轉化體外培養的嚙齒類動物細胞，但對人體不出現致癌性。目前我市未開展人腺病毒核酸檢測，通過PCR-熒光探針法檢測人腺病毒，根據檢出率可為此項目的開展與否提供數據支撐。針對3、7型腺病毒核配區設計的特異性引物和特異熒光探針對3、7型腺病毒進行檢測，根據檢出情況，可為我市對3、7型腺病毒的防治提供依據。本研究報道中，人腺病毒的陽性率為10.04%，與前人研究報道中12.50%的結果基本相符[7]。2012—2013年深圳市因呼吸道疾病住院的兒童中HAdV-7感染占HAdVs感染總人數的36.3%,僅次于HAdV-3(46.3%)[8]。本研究結果顯示，郴州地區急性下呼吸道感染住院兒童感染的腺病毒分型主要為3型人腺病毒與7型人腺病毒，但是7型人腺病毒(Hadv-7)為46.15%，多于3型人腺病毒(Hadv-3)的28.85%，其次為未確定型。要確定該未確定型有賴于對其開展全基因組的擴增，通過全基因水平對其實施進化和重組分析[9]。本研究結果顯示，人腺病毒感染患兒的疾病類型以肺炎為主，52份人腺病毒陽性患兒中診斷為肺炎46例，支氣管炎3例，咳喘待查3例；人腺病毒感染患兒與非感染患兒的臨床癥狀無明顯差異。但其具備的合并感染率處于較高水平，因此對于人腺病毒感染的病原學意義和肺炎或嚴重呼吸道感染之間的相關性，還需要開展進一步研究予以分析[10]。

綜上所述，郴州地區急性下呼吸道感染兒童中人腺病毒陽性率較高，主要類型為3、7型人腺病毒。人腺病毒主要型別分布和前人研究基本一致，只是優勢株發生變化，提示人腺病毒流行可能容易出現優勢株更迭情況，同時人腺病毒感染的地域差異影響還需開展進一步分析。