子宮內膜癌中Survivin、TRF1的表達及與預后相關性分析

白雨昕

黑龍江省佳木斯市中心醫院婦科 154002

子宮內膜癌是女性生殖道三大惡性腫瘤之一，主要的臨床表現為陰道流血、陰道異常流液、疼痛等，且會并發貧血、不孕，嚴重危及患者生命安全[1]。目前該病的真正發病原因迄今不明，臨床研究表明[2]，子宮內膜癌發生、發展與細胞異常凋亡、端粒功能異常相關。存活素(Survivin)是凋亡蛋白抑制劑家族的成員，可抑制凋亡，促進細胞增殖，并誘導或者增強血管發生；端粒重復序列結合因子1(TRF1)能夠抑制染色體末端和干擾端粒酶的結合進而調控端粒長度[3]。Survivin、TRF1與子宮內膜癌的發生發展密切相關，本文探討Survivin、TRF1在子宮內膜癌中的表達意義，分析其與預后的相關性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年5月—2019年5月在我院確診的52例子宮內膜癌患者進行分析。年齡45～70(60.51±8.71)歲；分化程度：高、中、低分別為26、13、13例；臨床分期：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期分別為28、15、9例；病理類型：腺癌30例、乳頭狀癌14例、透明細胞癌8例；形態：彌漫型29例、局灶型23例；淋巴結轉移12例、未轉移40例；肌層浸潤23例、肌層未浸潤29例。納入標準：依據《子宮內膜癌篩查和早期診斷專家共識(草案)》中的診斷標準[4]，經病理學檢查診斷為子宮內膜癌患者；預測生存期在3個月以上者；年齡45～70歲者；知情本次研究者。排除標準：不能夠與醫護人員正常溝通者；經過放化療治療者；臨床病理和隨訪資料不完整者；伴有心腦血管疾病，肝腎功能不全者。

1.2 試劑及藥品 兔抗人Survivin單抗、TRF1多克隆抗體購于上海碧云天公司；二氨基聯苯胺(DBA)顯色試劑盒及免疫組織化學試劑盒均購于北京中杉金橋生物公司。

1.3 方法 (1)Survivin、TRF1的表達情況：用10%甲醛固定子宮內膜癌、癌旁組織標本，用石蠟包埋后，切4μm薄片，烘干、脫蠟后滴加兔抗人Survivin單抗、TRF1多克隆抗體，然后進行蘇木素染色。以自制磷酸鹽緩沖液(PBS)為陰性對照，用已知陽性組織切片為陽性對照。其中Survivin陽性判定標準：陽性細胞——細胞核或細胞質內出現棕黃色、深棕色顆粒。在400倍鏡下觀察陽性細胞<10%判定為陰性，≥10%判定為陽性。TRF1陽性判定標準：陽性細胞——胞質內出現棕黃色細顆粒。在400倍鏡下觀察陽性細胞<30%判定為陰性，≥30%判定為陽性[5]。(2)臨床特征：統計患者年齡、分化程度、臨床分期、病理類型、淋巴結轉移情況、肌層浸潤情況、形態。(3)生存狀況：電話隨訪2年，統計患者生存狀況，并利用Prism繪制生存曲線。

2 結果

2.1 子宮內膜癌和癌旁組織標本Survivin、TRF1的表達情況比較 相比癌旁組織標本，子宮內膜癌組織標本中Survivin、TRF1陽性表達率明顯更高(P<0.05)。詳見表1。

表1 子宮內膜癌和癌旁組織標本Survivin、TRF1的表達情況比較[n(%)]

2.2 子宮內膜癌組織中Survivin、TRF1的表達與臨床特征的關系分析 在子宮內膜癌組織中，Survivin的陽性表達率隨著分化程度的降低、臨床分期的增加、淋巴結轉移、肌層浸潤而增高；TRF1的陽性表達率隨著肌層浸潤而增高(P<0.05)。詳見表2。

表2 子宮內膜癌組織中Survivin、TRF1的表達與臨床特征的關系分析[n(%)]

2.3 Survivin、TRF1陽性和陰性表達子宮內膜癌患者24個月生存狀況比較 子宮內膜癌患者24個月生存率為78.85%(41/52)，其中Survivin陽性表達患者24個月生存率為72.73%(24/33)，低于陰性表達患者的89.47%(17/19)，但差異無統計學意義(χ2=2.027，P=0.155)；TRF1陽性患者24個月生存率為77.08%(37/48)，低于陰性表達患者的100.00%(4/4)，但差異無統計學意義(χ2=1.163，P=0.281>0.05)。

3 討論

子宮內膜癌病因并不十分清楚，可能與激素分泌有關，也可能與基因突變有關[6]。然而，近年來臨床研究表明[7-8]，子宮內膜癌通常是由于細胞異常分化、凋亡造成的，其中細胞異常凋亡是關鍵，并且端粒是調節細胞增殖與凋亡的重要分子結構之一。Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成員，與腫瘤細胞的分化增殖及浸潤轉移密切相關；TRF1是端粒長度的負調控因子，能夠導致端粒逐漸和持續性縮短[9-10]。故研究Survivin、TRF1在子宮內膜癌發生、發展、預后中的作用具有重要的意義。本文通過52例子宮內膜癌患者發現，相比癌旁組織標本，子宮內膜癌組織標本中Survivin、TRF1陽性表達率明顯更高。分析原因，TRF1能夠縮短端粒長度，進而使得細胞增殖與凋亡失衡，并且在高表達情況下保護端粒末端，使得癌細胞具有永生的功能；另外，Survivin是凋亡抑制蛋白，能夠抑制癌細胞凋亡，促進癌細胞增殖[11-12]。

同時本文結果顯示，在子宮內膜癌組織中，Survivin的陽性表達率隨著分化程度的降低、臨床分期的增加、淋巴結轉移、肌層浸潤而增高；TRF1的陽性表達率隨著肌層浸潤而增高；子宮內膜癌患者24個月生存率為78.85%，其中Survivin陽性表達患者24個月生存率為72.73%，低于陰性表達患者的89.47%；TRF1陽性患者24個月生存率為77.08%，低于陰性表達患者的100.00%。分析原因，Survivin能夠抑制子宮內膜癌細胞的凋亡，促進子宮內膜癌增殖，Survivin高表達在子宮內膜癌的發展、預后中起重要的作用；TRF1打破正常細胞增殖和凋亡平衡，在高表達的情況下，抑制子宮內膜癌細胞的凋亡，使得癌細胞數量逐漸增加，組織逐漸增大發展，導致患者預后較差。

綜上所述，Survivin、TRF1在子宮內膜癌中均呈現高表達，且與臨床特征和患者預后密切相關，可指導臨床進行子宮內膜癌診斷與治療。