潔凈區懸浮粒子監測標準適用性探討

文/于志深

制藥企業潔凈環境監控的要點有二——環境微生物監控和懸浮粒子監控。目前，制藥企業潔凈區懸浮粒子監測的標準有ISO 14644-1 與國標GB/T 16292-2010，但它們都不是強制標準，那么在實際生產中到底應該執行哪個標準？尤其是ISO 14644-1 在2015 年修訂后，在最少取樣點、結果判定等方面有了不同規定，使得標準的適用問題更加突出，本文從標準的歷史沿革進行梳理，解決制藥企業在標準適用方面的疑惑，以更好地指導實踐工作。

ISO14644-1 標準簡介

國際標準化組織簡稱ISO，是由多個國家聯合成立的非政府性國際組織，是世界上最大的國際標準化機構，目前有正式成員國120 多個，中國也是成員國之一。ISO 的宗旨是在世界范圍內促進標準化工作及其有關活動的開展，以利于國際間的物資交流和相互服務，并且發展在科技界及經濟活動方面的合作。ISO 制定的標準僅是推薦給世界各國采用，是非強制性標準。但是由于ISO 頒布的標準在世界上具有很強的權威性、指導性和通用性，對世界標準化進程起著十分重要的作用，所以各國都非常重視ISO 標準。

ISO 14644 的總標題是“潔凈室和相關受控環境”，其對潔凈室的定義為：塵埃粒子數量、濃度受控并被分級的房間，房間在建設和使用時需控制室內污染物的引入、產生和滯留。ISO 14644 適用于在產品或工藝完整性的保護方面均需要污染控制的行業，如航天、微電子、醫藥、醫療器械、保健品及食品行業。ISO 14644 共由10個部分組成，其中ISO 14644-1 是第一部分：根據粒子濃度對空氣潔凈度分級。ISO 14644-1 采用統一的微粒濃度標準值衡量了不同工業領域的潔凈間。藥品生產中的潔凈室除要對環境中的塵粒進行控制外，還要對房間（區域）內的微生物數量進行控制。我國《藥品生產質量管理規范》（以下簡稱“GMP”）的“無菌藥品”附錄中對潔凈級別確認，其規定的懸浮粒子測試方法就參照了ISO 14644-1；另外，歐盟GMP、美國cGMP（動態藥品生產管理規范）等也都調用了ISO 14644-1 標準。由此可見，ISO 14644-1 雖是推薦性標準，但仍具有很高的權威性。

ISO 14644-1 根據粒徑在0.1～5μm 范圍的粒子濃度的不同，將潔凈室劃分為9 級，現在我國制藥行業普遍采用4 個級別的分法，分別對應ISO 的4.8、5、7、8 級。ISO 14644-1 中 規定了潔凈級別確認時的取樣規則，包括最少取樣點、最小取樣量的確定。ISO 14644-1 最初制定于1999 年，經過多年應用后，根據ISO 系統化回顧和用戶、專家的反饋，于2015 年進行了修訂，最顯著的改變是對取樣點的選擇和數量采用了一個更加連續的統計方法：評估數據的收集。ISO 14644-1：2015 附錄A“根據粒子濃度對空氣潔凈度進行分級的基準方法”中對取樣點的最小數量用表格進行了規定，不同面積對應不同的最少取樣點，取消了原來的計算公式及95% 置信區間的計算。

GB/T 16292 的歷史沿革

GB/T 16292-2010，即《醫藥工業潔凈室（區）懸浮粒子的測試方法》，也對最少取樣點、最小取樣量進行了規定；其中對最少取樣點的確定提供了兩種方法，其中一種是引自ISO 14644-1：1999 的公式法，即對潔凈室面積開根號，并對采樣點數小于9 的潔凈室計算置信區間；另外一種是查表法，即根據不同的潔凈區面積和潔凈級別由表格給出對應的不同的取樣點數目。追溯這一標準的歷史，GB/T 16292-2010的前一個版本是GB/T 16292-1996，而這一舊版本標準前言中明確說明了“本標準等效采用美國聯邦標準FS-209E-1992《潔凈室和潔凈區內空氣浮游粒子等級》，并參考JGJ71-90《潔凈室施工及驗收規范》制定”，上文提到的這兩種標準中對最少采樣點數目的確定方法便是查表法。GB/T 16292-2010 前言中明確說明“本標準參考了ISO 14644-1《潔凈間以及相關環境控制 第1 部分：空氣潔凈度級別》和JGJ 71-90《潔凈室施工及驗收規范》而制定”，內容中增加了確定最少取樣點數目的方法，也就是增加了ISO 14644-1：1999 中的公式法。因此可以看出，GB/T 16292-2010中最少取樣點數目確定的依據來源有二，其一是ISO 14644-1，其二是美國聯邦標準FS-209E。按照標準引用的慣例，凡是不注日期的引用文件，都應該適用其最新版本。ISO 14644-1：2015 是國際標準ISO 14644-1 的第二版，明確指出此第二版取消并代替了第一版ISO 14644-1：1999，這次技術修訂的改動是比較大的。從其對最少取樣點的確定原則可以看出，與第一版有很大的不同。因此，GB/T 16292-2010 中最少采樣點數目確定規章中的第一個方法——依據ISO 14644-1：1999制定的公式法——應該被新方法代替。

另外，我國1998 版GMP對潔凈級別的劃分參照了美國聯邦標準FS-209E，分為100、10 000、100 000、300 000 四級，自2010 年修訂后改為與歐盟cGMP、世界衛生組織GMP 相同的A、B、C、D 四級的分法。而GB/T 16292-2010 是參照美國標準制定的，因此它在發布后不久便出現了適用問題。GB/T 16292-2010 是2010年9月2日發布，2011 年2 月1 日開始實施。GMP（2010 年修訂）是2011 年1 月17日衛生部令第79 號公布,自2011年3 月1 日起施行。GB/T 16292-2010 制定時我國2010 版GMP 還未公布，而新版GMP 公布實施后，GB/T 16292-2010 中的第二種方法查表法就已經不適用于藥品生產企業了，不過我國的醫療器械行業對潔凈級別的劃分還是與美國標準相同，因此GB/T 16292-2010在醫療器械生產中仍適用。

到2021年為止，GB/T 16292-2010實施已有11 年，卻未見修訂，不過2021 年8 月20日，國家市場監督管理總局、中國國家標準化管理委員會發布了GB/T 25915.1-2021《潔凈室及相關受控環境 第1 部分：按粒子濃度劃分空氣潔凈度等級》，代替GB/T 25915.1-2010 《潔凈室及相關受控環境 第1 部分：空氣潔凈度等級》，并 于2022 年3 月1 日起開始實施，制藥企業可參考這一新標準。

法規要求

《中華人民共和國標準化法》（以下簡稱《標準化法》）規定“標準包括國家標準、行業標準、地方標準和團體標準、企業標準。國家標準分為強制性標準、推薦性標準，行業標準、地方標準是推薦性標準”。GB/T 16292-2010 是推薦性國家標準，是“國家鼓勵采用”的標準。《標準化法》還規定“國家積極推動參與國際標準化活動，開展標準化對外合作與交流，參與制定國際標準，結合國情采用國際標準，推進中國標準與國外標準之間的轉化運用”，ISO 14644-1 也 是我國眾多行業采用的國際標準之一，并被轉化運用為國內標準，如前文提到的GB/T 16292-2010、GB/T 25915.1-2021。同時，我國的GMP 是以局令形式發布的部門規章，關于空氣懸浮粒子的測定方法，在其無菌附錄中被描述為“測試方法可參照ISO 14644-1”。

標準制定都是建立在科學技術研究成果和社會實踐經驗的基礎上的，科學技術總在不斷進步，因此標準也需要不斷完善提高，因此我們應與時俱進，使用現行的標準。2016 年9 月24 日，國家藥品審核查驗中心針對企業提出的ISO 14644-1:2015 出臺后版本適用的問題，回復稱：企業在進行測試時應使用現行的ISO標準進行測試，基于現行ISO 標準進行變更控制，評估變更影響，制定并落實變更計劃。可見國際標準是值得參照執行的合法有效標準。GB/T 16292-2010 與ISO 14644-1:2015 都不是強制性標準，但在企業沒有更優的標準進行參照時，還是要選定一個來作為企業的執行標準，對企業產生強制約束性。

采用不同標準時還需要把握一個原則：我國的GMP 附錄是強制執行的標準規范，遇到其他非強制標準與GMP 附錄不一致的情況時，需執行附錄規定。如對潔凈區的分級，我國GMP 附錄中A級既要求靜態符合規定，又要求動態符合規定，既考慮0.5 μm 粒徑的粒子又考慮5.0 μm 粒徑的粒子，而ISO 14644-1:2015 中對5.0 μm 粒徑的粒子的規定與我國GMP 附錄不一致，此時就必須執行GMP 附錄規定。

潔凈級別確認與監測

潔凈室隔離系統內的懸浮粒子在線監測設備

潔凈區懸浮粒子的監測可以分為兩種情況：一種是潔凈區級別確認，通常是在潔凈區投入使用前對空調凈化系統進行驗證時，以及在使用一段時間后進行再驗證時需要確認；另一種是潔凈區的日常監測。

歐盟GMP 附錄1“無菌藥品的生產”中，將潔凈室和潔凈通風設備的級別確認與監測分開進行描述，明確潔凈室和潔凈通風設備應按ISO 14644-1 劃分級別，級別的劃分應明確區別于工藝的環境監測。我國的GMP 附錄1“無菌藥品”的第三章“潔凈度級別及監測”的第九條講明了潔凈級別的劃分，第十條規定了潔凈區懸浮粒子的監測，雖然我國GMP 未將這兩者區分在不同章節，但也明確了日常監測的采樣量可與進行潔凈度級別和空氣凈化系統確認時的空氣采樣量有所不同。而在國家食品藥品監督管理局藥品認證管理中心編寫的《藥品GMP指南》無菌藥品分冊中則明確指出：潔凈區的潔凈級別確認是設施驗證的 一 部 分，并需要定期進行再確認；潔凈級別確認和潔凈區監測是兩個環節，應該明確予以區分并分別進行管理；潔凈級別的確認可以按照ISO 14644-1的有關要求實施；潔凈區（室）監測中的取樣點和取樣量可以比進行潔凈級別確認時的取樣點和取樣量少，應該通過正式的風險分析研究和對監測結果的分析（至少要有6 個月以上的運行數據作為分析基礎），來確定監測頻次和限度；同時，監測頻次和限度的確定也要考慮到生產工藝因素，對于監測限度及取樣點應該定期進行回顧驗證，以保證監測行為的有效性。

涉及醫藥潔凈廠房監測的標準還有2020 年12 月31 日發布的T/ZAPA 0001-2020，即《醫藥潔凈廠房運行維護技術規范》。這一標準由鄭州市空氣凈化協會組織編寫，實施日期為2021 年1 月1日，屬于我國《標準化法》中規定的團體標準。其引用的文件包括GB/T 16292、GB/T 25915、ISO 14644-1 等標準，該標準中規定“潔凈區內的懸浮粒子的潔凈度、濃度限值的測試應按ISO 14644-1 標準規定；測試采樣點、位置次數、測試方法及所需用的測試儀器應按GB/T 16292 的規定”。

結語

綜上所述，潔凈區級別確認時懸浮粒子的監測需符合我國GMP“無菌藥品”附錄中的規定，附錄未規定的內容則可參照ISO 14644-1:2015 執行。對于潔凈區日常監測，制藥企業可根據生產線的設置情況，針對不同的潔凈級別，并結合產品生產風險控制要求，制定合理的取樣點數目及布置，具體可以參照ISO 14644-1:2015、GB/T 16292-2010 的要求；同時，也可以參照執行符合科學性、規范性的其他推薦性標準、行業標準、地方標準及團體標準。