血清Presepsin、外周血Treg水平與膿毒癥患者病情及預(yù)后結(jié)局的相關(guān)性分析

張賓，代洪娜，胡瑩瑩

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院1.急診科；2.血管外科，河南 洛陽 471000）

每年全球膿毒癥患者可達(dá)＞3 100 萬，其病死率＞25%，且該病存活患者中＞20% 伴有認(rèn)知功能障礙。目前，該病多通過中性粒細(xì)胞比例、體溫、白細(xì)胞計(jì)數(shù)等常規(guī)指標(biāo)，以及分泌物、血培養(yǎng)等進(jìn)行鑒別，但常規(guī)監(jiān)測指標(biāo)對其診斷特異性較差，分泌物及血液培養(yǎng)、檢測又耗時(shí)較長，無法用于對疾病早期診斷，故尋求簡單、有效的早期指標(biāo)意義重大［1］。有研究表明，膿毒癥發(fā)生多器官功能障礙與患者體內(nèi)炎性反應(yīng)持續(xù)加重、相關(guān)介質(zhì)瀑布式激活有關(guān)［2］。該過程可誘導(dǎo)、激活免疫細(xì)胞，其中可溶性白細(xì)胞分化抗原14 亞型（Presepsin）對機(jī)體入侵的病原體具有識別、感知、激活免疫應(yīng)答的功能，而調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（Treg）淋巴細(xì)胞與機(jī)體清除病原體能力有關(guān)。本研究探究兩者與膿毒癥及其預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年5 月至2020 年11 月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的112 例膿毒癥患者作為研究對象。其中，男性62 例，女性50 例；年齡46～61歲，平均（50.81±12.04）歲；體質(zhì)量指數(shù)（BMI）19.76～26.15 kg/m2，平均（22.36±2.59）kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合膿毒癥相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］；②重癥監(jiān)護(hù)室入住時(shí)間＞24 h；③通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有糖皮質(zhì)激素等藥物長期服用史；②合并代謝綜合征、惡性腫瘤及甲狀腺功能亢進(jìn)癥；③肝、腎功能疾病達(dá)終末期等。另取該院50 例健康體檢者作為對照組。其中，男性28 例，女性22 例；年齡42～57 歲，平均（48.67±13.41）歲；BMI 19.58～25.97 kg/m2，平均（21.84±2.72）kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：①胸透檢查正常；②無出血性或缺血性腦血管病史、急性心肌梗死史及惡性腫瘤、病毒性肝炎等慢性病史；③近兩月未患感染性疾?。虎軐?shí)驗(yàn)室檢查各項(xiàng)指標(biāo)無異常。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 血清Presepsin 檢測 取受試者空腹靜脈血2 mL，離心10 min，轉(zhuǎn)速3 000 r/min，分離血漿，以雙抗體夾心法對血清Presepsin 進(jìn)行測定。

1.2.2 外周血Treg 檢測 取5 mL 空腹靜脈血，離心10 min，轉(zhuǎn)速1 000 r/min，取上清液，以流式細(xì)胞儀檢測其Treg 水平。

1.3 觀察指標(biāo)

①膿毒癥患者血清Presepsin、外周血Treg 水平：對膿毒癥組及對照組Presepsin 和Treg 水平進(jìn)行比較。②膿毒癥與其外周血Treg、血清Presepsin 間相關(guān)性：采用二元Logistic 回歸分析Presepsin 血清水平、Treg 水平與膿毒癥的關(guān)系。③不同預(yù)后間外周血Treg、血清Presepsin 水平：觀察膿毒癥28 d 末死亡與存活情況，比較其Treg、Presepsin 水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，比較用t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析用二元Logistic 回歸分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Presepsin、外周血Treg 水平比較

膿毒癥組Treg 外周血含量及血清Presepsin 均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清Presepsin、外周血Treg 水平比較（）

表1 兩組血清Presepsin、外周血Treg 水平比較（）

2.2 外周血Treg、血清Presepsin 與膿毒癥間相關(guān)性分析

采用二元Logistic 回歸分析，患者Treg 及Presepsin 水平與膿毒癥呈正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）。見表2。

表2 膿毒癥與外周血Treg、血清Presepsin 水平相關(guān)性分析參數(shù)

2.3 膿毒癥不同預(yù)后間外周血Treg、血清Presepsin 水平比較

膿毒癥患者中存活85 例，死亡27 例，其中死亡組Presepsin、Treg 均高于存活組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 血清Presepsin、外周血Treg 不同預(yù)后水平比較（）

表3 血清Presepsin、外周血Treg 不同預(yù)后水平比較（）

3 討論

目前膿毒癥臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)為血培養(yǎng)，但其過程耗時(shí)較長，且具有較高的假陰性率，不利于早期診斷及預(yù)后的改善。隨著生物標(biāo)志物檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，降鈣素原、C 反應(yīng)蛋白等逐漸應(yīng)用于膿毒癥的鑒別，但其存在特異性較差、跨度較大等不足，故尋求更為有效、靈敏的診斷性指標(biāo)十分重要［4］。有研究表明，膿毒癥成年患者中新型標(biāo)志物Presepsin 水平升高較早且迅速，可能與機(jī)體吞噬病原體過程有關(guān)［5］。故可試將其作為膿毒癥早期指標(biāo)，而Treg 為機(jī)體反向反應(yīng)因子，可對機(jī)體病原微生物清除產(chǎn)生影響，兩者與膿毒癥的關(guān)系研究較少，故本研究試探討其與膿毒癥病情和預(yù)后相關(guān)性，以期為其作為該病鑒別、診斷提供依據(jù)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，膿毒癥組患者血清Presepsin 及Treg 外周血含量均顯著高于對照組，比較有差異，表明膿毒癥患者體內(nèi)均存在Presepsin 及Treg 水平異常高表達(dá)狀態(tài)，結(jié)合二元Logistic 回歸分析得知，Presepsin 血清水平每提升1 單位，患者膿毒癥患病風(fēng)險(xiǎn)提高1.017 倍；同樣Treg 外周血含量每提升1 單位，膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加1.973 倍，進(jìn)一步證明了膿毒癥與外周血Treg水平和血清Presepsin 含量密切相關(guān)，可能是因?yàn)槟摱景Y患者體內(nèi)炎性反應(yīng)過度激活，導(dǎo)致其體內(nèi)淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞間的比值改變，致使臟器、組織等的炎性浸潤外，還可促進(jìn)、激活相關(guān)免疫細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答等一系列過程［6］。其中Presepsin 位于吞噬細(xì)胞表面，感知到入侵的病原體并識別后，反饋并激活機(jī)體的免疫應(yīng)答過程。當(dāng)免疫細(xì)胞吞噬相關(guān)病原微生物時(shí)，溶酶體參與并使大量Presepsin 入血，從而使其血清含量升高［7］；而膿毒癥體內(nèi)炎癥浸潤等過程導(dǎo)致相關(guān)免疫細(xì)胞激活后，Treg 淋巴細(xì)胞作為負(fù)向調(diào)節(jié)、促炎因子表達(dá)增加，對機(jī)體清除病原體的過程有抑制作用，從而降低了機(jī)體病原體清除效率，間接促進(jìn)病原體的擴(kuò)散與擴(kuò)增，增加機(jī)體感染載量，其還可導(dǎo)致機(jī)體Treg/Th17 失衡，致使T 細(xì)胞功能紊亂加重，直接影響免疫應(yīng)答，促進(jìn)感染的發(fā)生、加重［8］。

不同預(yù)后患者對比顯示，死亡組患者血清Presepsin、外周血Treg 均顯著高于存活組，比較有差異，說明膿毒癥患者體內(nèi)Presepsin 及Treg 過高表達(dá)是其不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素。陳梅等［9］對膿毒癥患兒下外周血中血乳酸、Th17 及Treg 水平變化進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)，存活組患兒上述各指標(biāo)水平均明顯較死亡組低，證明影響膿毒癥患兒預(yù)后死亡的原因與乳酸堆積引起的酸中毒、Th17 及Treg的激活過度有關(guān)。本研究中同樣存在Treg 異常、過度激活，表明其同樣與成年膿毒癥患者死亡密切相關(guān)，原因可能是其高水平表達(dá)使機(jī)體清除病原體功能降低，從而間接促進(jìn)病情的加重、進(jìn)展，導(dǎo)致其死亡。劉暉等［10］對炎癥因子和血清Presepsin 與膿毒癥患兒預(yù)后影響分析后發(fā)現(xiàn)，Presepsin 在膿毒癥患兒血清中水平和其體內(nèi)PCT及CRP 水平呈現(xiàn)較顯著的正相關(guān)關(guān)系，后兩者常用作診斷膿毒癥的標(biāo)志物，但診斷價(jià)值有限，而Presepsin 表現(xiàn)出的特異性及敏感度均較佳，故推薦用于膿毒癥患兒的早期診斷。本研究發(fā)現(xiàn)成年膿毒癥患者中，預(yù)后死亡組Presepsin 水平亦高于存活組，與其結(jié)論趨勢一致，表明其對成年膿毒癥預(yù)后判別同樣可用，但本研究時(shí)間較短，樣本量選取有限，且未對膿毒癥和與其癥狀類似的系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)綜合征患者間Treg、Presepsin 水平進(jìn)行對比、判別，后續(xù)需對其進(jìn)行更深入、全面的研究，以期為膿毒癥診斷提供高特異性、高靈敏度診斷指標(biāo)。

綜上所述，膿毒癥與外周血Treg、血清Presepsin 表達(dá)水平關(guān)系密切，且呈正相關(guān)關(guān)系，直接或間接的促進(jìn)了膿毒癥感染的加重，且兩者水平與患者預(yù)后結(jié)局有關(guān)。