不同廠家阿莫西林膠囊聚合物含量的考察及影響因素

＊葉寧 吳愫青

（廣東省珠海市食品藥品檢驗所 廣東 519000）

阿莫西林，又名羥氨芐青霉素，是臨床上一種常用的口服半合成青霉素，屬于廣譜抗生素，通過抑制細菌細胞壁的合成，引起細菌迅速溶解破裂，從而起到殺菌消炎的作用，對革蘭陰性菌和陽性菌均有強而迅速的殺滅作用，對鉤端螺旋體亦有殺滅作用。《中國藥典》收載的阿莫西林劑型有片劑、膠囊、顆粒、干混懸劑。阿莫西林膠囊口服易吸收，使用方便，是該品種市面上最主要的劑型，并且起效快，臨床使用廣泛。藥品質量安全關系患者安全、醫院利益，阿莫西林在臨床應用中大約存在5%～6%的不良反應發生率，少數嚴重者會導致死亡，因此嚴格控制阿莫西林膠囊中高分子聚合物的含量有著重要的意義[2-3]。本文通過考察不同區域藥企阿莫西林膠囊聚合物的含量，為各企業優化工藝流程、嚴格把關原輔料的供應提供一定的參考，也可臨床安全用藥提供科學依據。

1.儀器與試藥

(1)儀器

METTLER-TOLEDOXS205電子分析天平；Elmasomicp P300H超聲波清洗器；Agilent 1260 infinity II高效液相色譜儀；色譜柱：Puxiang G-10 400×10mm凝膠色譜柱。

(2)試藥

青霉素對照品（由中國食品藥品檢定研究院提供；批號：130437-201707，含量：94.1%）磷酸氫二鈉，廣州化學試劑廠；磷酸二氫鈉，廣州化學試劑廠；無水碳酸鈉，天津市大茂化學試劑廠，均為分析純；水為超純水。

2.方法

(1)色譜條件

pH8.0的0.05mol/L磷酸鹽緩沖液[0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(95:5)]為流動相A（鹽相），水為流動相B（水相），波長254nm，進樣量100μl，柱溫：25℃，流速：1.5ml/min。

(2)試劑配制

精密稱定青霉素對照品適量，置50ml量瓶中，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。另精密稱取供試品適量（約相當于阿莫西林0.2g），置10ml量瓶中，加2%碳酸鈉溶液5ml使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

(3)系統適用性要求

精密稱取供試品適量（約相當于阿莫西林0.2g），置10ml量瓶中，加2%碳酸鈉溶液4ml使溶解，用0.3mg/ml的藍色葡聚糖2000溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。量取100μl注入液相色譜儀，用流動相A進行測定，記錄色譜圖，高聚體的峰高與單體與高聚體之間的谷高比應大于2.0（圖1）。

圖1 系統色譜圖

(4)測定法

取供試品溶液注入色譜儀，以流動相A為流動相進行測定，記錄色譜圖（圖2）。另精密量取對照溶液注入色譜儀，以流動相B為流動相，同法測定。按外標法以峰面積計算，結果乘以校正因子0.1，含阿莫西林聚合物以阿莫西林計，不得過標示量的0.2%。

圖2 樣品色譜圖

3.結果

我國地域遼闊，各個行政區之間的溫濕度差異很大，我們將25家藥企按照東北、華北、華東、西南、華南五個區域劃分進行考察，通過數據統計分析得出，各個區域之間的聚合物含量結果不存在顯著性差異。但是，假設將聚合物含量結果落在0～0.05%之間的作為低風險考察區域，0.05%～ 0.10%之間的作為中風險考察區域，大于0.10%的作為高風險考察區域，大于0.15%的作為極高風險考察區域，現在根據阿莫西林聚合物含量的結果對阿莫西林膠囊質量進行風險評估，我們發現，13家企業的聚合物含量結果落在低風險考察區域，20家企業的結果落在低風險和中風險考察區域，5家的結果落在高風險考察區域，只有1家企業的結果落在極高風險考察區域，說明落實藥品質量管理上市許可人主體責任后，企業在藥品全生命周期的安全性、有效性的保證義務已經得到強化。考察結果見表1和圖3。

圖3 不同區域藥企阿莫西林膠囊聚合物含量分布

表1 不同區域藥企聚合物含量結果

我們在考察區域之間聚合物含量的基礎上，進一步考慮到藥品流通過程的影響因素，將25家藥企按照抽樣來源分類對聚合物含量進行考察，抽樣來源分為批發企業10家、零售藥店10家、醫院5家三類，從表1和圖4可以看出，9家批發企業的結果落在低風險和中風險考察區域，對于結果落在高風險考察區域的1家企業，表1中顯示生產日期和檢驗日期相差24個月，而零售藥店結果落在極高風險考察區域的那家企業，表1中也顯示同樣情況。這也進一步提示我們可以從樣品的儲存時間長短來考察對聚合物含量形成的影響。

圖4 流通渠道中阿莫西林膠囊聚合物含量的分布

我們將25家的產品按照生產日期和檢驗日期間隔時間的長短作為橫坐標，聚合物含量結果作為縱坐標繪制趨勢曲線，見圖5，從圖中可以看出，生產日期和檢驗日期間隔時間的長短對聚合物含量結果呈現上升趨勢，考慮可能是樣品儲存過程中聚合物含量的升高，提示企業應該從這方面進一步提高產品質量。

圖5 阿莫西林膠囊樣品生產和收檢時間間隔含量趨勢圖

4.討論

阿莫西林膠囊為目前國內使用較多的青霉素類抗生素藥物，作為過敏原的高分子聚合物是其質量控制的重點[4]。從以上聚合物含量結果看，均符合規定，但不同區域藥企聚合物含量存在較大差異。阿莫西林膠囊聚合物含量的影響因素有很多，其中主要與制劑的生產工藝和儲存條件相關，生成工藝可影響聚合反應方式，而不同方式聚合形成的高分子聚合物的過敏反應特性存在差異，儲存條件可影響聚合的速度和聚合物的形成，從圖4可知，因批發企業的儲存條件最好，所以批發企業的聚合物含量較低。從圖5趨勢圖可知，生產與收檢周期越長，聚合物含量越大，因為阿莫西林結構中含有結晶水，有引濕性，對高溫不穩定，吸潮會使分子中的β-內酰胺環開環降解，導致雜質增多，聚合物含量增大[5]，藥品溫濕度管理體制要求藥品應儲存在常溫（10～ 30℃），相對濕度應保持在45%～75%環境中，因此，各廠家在生產、儲存、運輸過程中要嚴格控制環境，溫度低于30℃，濕度小于75%[6]。

我們總結了聚合物含量測定實驗中的一些注意事項，希望對大家今后的檢驗工作有所幫助和借鑒。

（1）開啟新的Sephadex G-10葡聚糖凝膠色譜柱時，先用70～80℃的超純水沖洗一段時間，使內部凝膠充分溶脹，再用超純水，低流速沖洗一周，使其充分活化，達到更好 柱效[7]。

（2）阿莫西林膠囊樣品在5%無水碳酸鈉中較易溶解，一般手動振搖即可，超聲或加熱溶解都容易導致聚合物含量增高。

（3）分子排阻色譜法是以淋出體積作為分子量的相對檢測，基線的穩定性直接影響計算結果，每次實驗前宜先用對應水相或鹽相低流速沖洗色譜柱一晚，讓基線更加穩定[8]。

（4）色譜柱使用完后先用超純水沖洗至基線穩定，再用0.03%疊氮鈉溶液沖洗保存色譜柱，用堵頭密封兩端，放 4～8℃冰箱保存。

（5）國產凝膠色譜柱因其特性，不宜高壓高溫沖洗使用，使用時和使用后均不宜用帶有機相的溶液沖洗，會導致柱效變差，峰形變形，且使用的流動相必須經過脫氣處理，氣泡進入色譜柱會難以排除，長期使用也會導致柱效降低。