不同水平小球藻對南美白對蝦免疫功能的影響

單曉鸞

（乳山市海洋經濟發展中心,山東威海 264500）

小球藻具有分布范圍廣、適應性極強、生物產量巨大等優點，由于其蛋白質含量高于50%，在魚類養殖生產中可以作為蛋白原料使用[1]。小球藻不僅蛋白質含量豐富，還含有脂類、碳水化合物、葉綠素等營養物質，營養比較全面。 小球藻中富含多糖類、促生長因子等生物活性物質，具有免疫調節功能、提高動物生產性能的功能[2-3]。目前，小球藻在水產養殖生產中具有一些營養研究結果，如小球藻在三疣梭子蟹、鯽魚、凡納濱對蝦等養殖生產中。 研究表明，在三疣梭子蟹和鯽魚生產中使用小球藻可以有效促進其生長[4-5]；在凡納濱對蝦生產中使用小球藻可以替代其基礎飼料中的豆粕，替代比例高達9%，對凡納濱對蝦的生長性能未產生負面影響，且降低了氮、磷的排放，改善水體養殖環境[6]。 南美白對蝦是養殖產量較高的一種廣溫、廣鹽性熱帶蝦種之一。 我國引進后，在全國范圍內的養殖效果較好，產量較大，養殖范圍分布較廣。 但隨著近年規模化、集約化養殖，導致疾病頻發，養殖產量縮減，給養殖者造成巨大的經濟損失。 在疾病處理方面經常使用抗生素類藥物治療，產生的藥物殘留、環境污染、危害人類健康等負面影響收到高度重視， 因此在南美白對蝦養殖生產尋找抗生素的替代物至關重要[7-9]。 本研究選擇具有免疫功能的小球藻在南美白對蝦養殖生產中使用， 提高提高機體免疫力來提高其成活率， 進而提高養殖者的經濟效益， 并確定小球藻在南美白對蝦養殖中的最適添加量， 為小球藻在南美白對蝦養殖生產中的高效、合理使用提供理論數據參考。

1 試驗材料和試驗方法

1.1 試驗材料

小球藻購買于上海某生物科技有限公司， 有效含量大于70%。 南美白對蝦購買于當地水產養殖公司，體長約為6.5 cm，體重約為4.50 g。

1.2 試驗設計及試驗飼料

試驗試驗選取600尾南美白對蝦， 按照單因子試驗設計，將其均分為4個處理組，每組150尾南美白對蝦。對照組南美白對蝦飼喂基礎飼料，試驗1組基礎飼料+1%小球藻，試驗2組基礎飼料+1.5%小球藻，試驗3組基礎飼料+2%小球藻。試驗周期為28 d，試驗結束后采集南美白對蝦血液，檢測免疫相關指標。 試驗設計見表1。 試驗南美白對蝦基礎飼料配方表表見表2。

表1 試驗設計

表2 試驗南美白對蝦基礎飼料配方表

1.3 南美白對蝦日常養殖管理

試驗開始前，先將水族箱（0.8 m×0.5 m×0.5 m）使用生石灰進行消毒。試驗過程中使用15個水族箱，在正式試驗開始前南美白對蝦馴養1周，適應養殖環境。 試驗期間每日南美白對蝦飼喂3次， 飼喂時間10∶00、15∶00、20∶00，每日的飼喂量為南美白對蝦體重3%～4%。 養殖期間仔細觀察南美白對蝦的采食情況和健康。 養殖期間連續充氣， 水溫控制在26.5～28.5℃，鹽度控制在約18.5，pH值約為7.7，溶解氧濃度大于5.8 mg/L。

1.4 免疫功能的測定方法

試驗第28 d， 每組選擇15尾南美白對蝦， 使用1 mL的無菌注射器在其腹竇部位取血， 血液4 ℃條件下，4000 r/min離心5 min，取上層血清用于檢測南美白對蝦的血清免疫相關指標。 主要檢測總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、溶菌酶、堿性磷酸酶、酸性磷酸酶。試劑盒由南京建成生物工程研究所生產，檢測方法參考試劑盒說明書。

1.5 數據分析

試驗檢測的數據先使用Excel進行簡單的統計與處理，采用SPSS 25.0進行單因素方差分析，經過方差齊性檢驗后，具有統計學意義后，再使用LSD法對組間數據進行多重比較，P<0.05作為顯著性判斷標準，數據結果以平均數和總標準誤呈現。

2 試驗結果

不同水平的小球藻對南美白對蝦血清免疫指標的影響見表3，由表3可知，試驗2組和試驗3組南美白對蝦血清中的總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、溶菌酶活性、 堿性磷酸酶活性及酸性磷酸酶活性均顯著高于對組（P<0.05），且除了試驗1組南美白對蝦的溶菌酶活性， 其余免疫功能指標均有比對照組改善的趨勢，但未達到顯著性水平（P>0.05）。 研究表明，在南美白對蝦養殖生產中使用1.5%和2%的小球藻可以有效改善機體的免疫功能， 且小球藻的最適添加量為1.5%。

表3 不同水平的小球藻對南美白對蝦血清免疫指標的影響

3 討論

生產試驗中使用1.5%的小球藻可以顯著改善機體的非特異性免疫功能， 表明小球藻增強了南美白對蝦對疾病的抵抗能力。 崔青曼等[10]研究發現，在南美白對蝦養殖生產中使用不同水平的小球藻可以提高機體的免疫力及成活率，改善了生產性能，且小球藻的最適添加量為1%。 本研究中小球藻的最適添加量略高于崔青曼的試驗結果， 可能是因為本試驗使用的小球藻有效含量略低導致的。 小球藻改善水產生物機體非特異性免疫功能與其富含的多糖類活性物質有關， 多糖可促進水產生物體生成大量的干擾素，而干擾素會刺激水產生物機體的免疫系統，進而提高機體的免疫力，增強機體的抗病力[3]。

4 結論

本研究表明， 在南美白對蝦養殖生產中使用1.5%和2%的小球藻可以有效提高了總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、溶菌酶活性、堿性磷酸酶活性及酸性磷酸酶活性，改善了機體的免疫功能，且小球藻的最適添加量為1.5%。