2型糖尿病腎病患者血清肌肽酶?1、β2?微球蛋白水平及其與腎功能的關系

周紅軍 許珊珊 楊銘

2 型糖尿病的微血管并發癥之一是2 型糖尿病腎病，是一種以尿白蛋白排泄過量、糖尿病腎小球病變和腎小球濾過率下降為特征的綜合征。根據當前相關指南，2 型糖尿病腎病的早期篩查和分期基于白蛋白尿和腎小球濾過率（Glomerular filtration rate，eGFR）兩項指標［1］。傳統上，白蛋白尿被認為是糖尿病引起的腎小球損傷的結果，主要由尿蛋白排泄率尿蛋白排泄率（urinary albumin excretion rate，UAER）進行評估。β2?微球蛋白（β2?Microglobulin，β2?MG）是低分子量蛋白質，已被作為各種疾病中腎小管功能障礙的標志物［2?3］，但較少用于評估2 型糖尿病腎病的腎功能。肌肽是一種具有多種生化特性的二肽，通過清除氧自由基的產生來保護糖尿病患者的腎臟免受腎病的侵害［4］。血清肌肽酶?1（dipeptide carnosinase 1，CN?1）是肌肽的降解酶，其與2 型糖尿病腎病患者腎功能的損害是否相關仍不清楚。本研究選取安徽省廬江縣人民醫院2 型糖尿病腎病患者82 例、單純2 型糖尿病患者48 例、健康體檢者30 例分組研究，分析2 型糖尿病腎病患者血清CN?1、β2?MG水平及其與腎功能的關系。現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2018年5月至2021年7月安徽省廬江縣人民醫院2 型糖尿病腎病患者82 例為糖尿病腎病組，再選取單純2 型糖尿病患者48 例為糖尿病組，另選取同期健康體檢者30 名作為健康組。納入標準：①符合《中國2 型糖尿病防治指南（2017年版）》［5］的標準確診為2 型糖尿病，表現為口服葡萄糖耐量試驗期間至少8 h 或餐后2 h 無熱量攝入，空腹血糖≥126 mg/dL（7.0 mmol/L）；②3 mg/g≤2次尿白蛋白肌酐比平均值＜30 mg/g［6］；③糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin，HbA1c）≥7%［7］；④年齡≥18 歲；⑤所有入試者均知情并簽署同意書。排除標準：①合并其他自身免疫性疾病或血液系統疾病；②合并嚴重心腦血管疾病；③精神疾病或意識障礙；④貧血或低蛋白血癥；⑤近三個月內改變過降糖方案或使用過影響糖代謝的藥物；⑥合并肺感染、心力衰竭、腎衰竭等可能影響糖代謝的疾病。三組研究對象年齡、性別及BMI 比較，差異無統計學意義（P＞0.05），糖尿病腎病組與糖尿病組病程、空腹血糖（FPG）比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。本研究經安徽省廬江縣人民醫院醫學倫理會審批并通過。

表1 各組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data of each group（±s）

表1 各組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data of each group（±s）

注：與健康組比較，aP＜0.05。

組別糖尿病腎病組糖尿病組健康組F 值P 值n 82 48 30年齡（歲）61.04±8.02 62.57±8.27 59.25±9.54 1.462 0.235性別男52 21 18 4.921 0.085女30 27 12病程（年）5.84±1.87 6.19±2.16 0.972 0.333 BMI（kg/m2）24.65±6.17 23.21±7.33 24.82±6.85 0.842 0.433 FPG(mmol/L)7.64±1.07a 7.89±1.76a 5.29±1.38 39.386 0.000

1.2 檢測方法

采集所有研究對象空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min 離心3 min（離心半徑5 cm）后取上層血清，與研究對象10 mL 尿液一起保存于-80℃冰箱中待測。采用固相夾心法酶聯免疫吸附實驗使用ELISA 試劑盒（上海酶聯生物科技有限公司）測定血清CN?1 水平，采用全自動生化分析儀AU5800（BECKMAN COULTER 公司）測定血清肌酐（serum creatinine，Scr）、β2?MG、UAER 水平。采用離子交換高效液相色譜分析法進行HbA1c 測定。eGFR 由CKD?EPI 公式計 算得出，CKD?EPI 公式［8］：男性：eGFR=144×（Scr/80）?0.411×（0.993）Age。女性：eGFR=144×（Scr/62）?0.329×（0.993）Age。根據研究對象身高、體重、計算體重指數（BMI）并給予動態血糖監測（CGMS）72 h 評估平均血糖波動幅度（Average blood sugar fluctuations，MAGE）。

1.3 統計學方法

采用SPSS Statistics 21 統計學軟件進行分析。計量資料以（）表示，采用t檢驗；計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，指標之間的相關性采用Pearson 相關分析，以相關系數r表示兩資料間的相關性。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組CN?1、β2?MG 與血糖指標水平比較

三組CN?1、β2?MG、HbA1c、MAGE 水平：糖尿病腎病組＞糖尿病組＞健康組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組CN?1、β2?MG 與血糖指標水平比較（±s）Table 2 Comparison of CN?1、β2?MG and blood glucose index levels among the three groups（±s）

表2 三組CN?1、β2?MG 與血糖指標水平比較（±s）Table 2 Comparison of CN?1、β2?MG and blood glucose index levels among the three groups（±s）

注：與健康組比較，aP＜0.05；與糖尿病組比較，bP＜0.05。

組別糖尿病腎病組糖尿病組健康組F 值P 值n 82 48 30 CN?1（μg/L）9.39±3.07ab 6.97±2.47a 4.33±1.24 70.841 0.000 β2?MG（μg/mL）0.59±0.22ab 0.35±0.07a 0.26±0.04 59.181 0.000 HbA1c（%）9.29±2.52ab 8.58±2.14a 4.56±1.03 51.807 0.000 MAGE（mmol/L）4.04 ±1.02ab 3.57±1.69a 1.74±0.47 40.803 0.000

2.2 三組腎功能指標水平比較

三組eGFR 水平：健康組＞糖尿病組＞糖尿病腎病組，差異均有統計學意義（P＜0.05）；UAER、Scr水平：糖尿病腎病組＞糖尿病組＞健康組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 三組腎功能指標水平比較（±s）Table 3 Comparison of renal function index levels among three groups（±s）

表3 三組腎功能指標水平比較（±s）Table 3 Comparison of renal function index levels among three groups（±s）

注：與健康組比較，aP＜0.05；與糖尿病組比較；bP＜0.05。

組別糖尿病腎病組糖尿病組健康組F 值P 值n 82 48 30 Scr（μmol/L）83.52±9.86ab 72.18±8.17a 69.79±9.42 35.324 0.000 UAER（mg/24 h）36.33±8.14ab 11.52±2.17a 9.43±1.39 365.869 0.000 eGFR［mL/（min·1.73 m2）］70.21 ±7.82ab 78.85±9.85a 82.04±10.05 25.739 0.000

2.3 2 型糖尿病腎病患者血清CN?1、β2?MG 與腎功能的相關性分析

Pearson 相關性分析結果顯示，2型糖尿病腎病患者血清CN?1、β2?MG 水平與患者Scr、UAER 水平呈正相關，與eGFR 水平呈負相關（P＜0.05）。見表4。

表4 2 型糖尿病腎病患者血清CN?1、β2?MG 與腎功能的相關性Table 4 Correlation of serum CN?1,β2?MG and renal function in patients with type 2 diabetic nephropathy

3 討論

2 型糖尿病主要是由遺傳和環境因素引起外周組織胰島素抵抗和胰島素分泌缺陷引起的以慢性高血糖為特征的一組代謝性疾病。據報道，2 型糖尿病的發病率和死亡率每年都在增加［9］。長期代謝紊亂可導致多種組織和器官出現多種慢性和進行性疾病，并進一步導致功能障礙甚至衰竭。2 型糖尿病腎病作為2 型糖尿病的主要慢性并發癥之一，已成為導致終末期腎病的主要原因。2 型糖尿病腎病復雜的發病機制導致治療相對困難。相關研究表明，2 型糖尿病腎病的發生和進展與多種因素有關，包括血流動力學障礙、糖脂代謝障礙、遺傳等［10］。2 型糖尿病腎病以進行性腎損害為特征，早期對其進行診斷和治療對2 型糖尿病腎病患者的預后至關重要。

肌肽是一種廣泛存在于組織中的內源性二肽，不僅具有抗氧自由基、減少晚期糖基化終末產物、抑制生長因子的產生和抑制腎素?血管緊張素系統等作用，還能降低腎小球毛細血管基底膜增厚和腎小球硬化，被認為是糖尿病腎病的保護因子［11］。此外，肌肽通過清除氧來保護糖尿病患者的腎臟免受腎病的侵害。糖尿病血管病變的主要原因之一是線粒體過度產生活性氧（reactive oxy?gen species，ROS），而肌肽有助于降低ROS 水平，從而抑制在晚期糖基化終末產物（advanced glyca?tion end products，AGEs）的形成并減少轉化生長因子?β（Ttransforming growth factor?β，GF?β）的產生，從而降低2 型糖尿病患者患腎病的風險。Zhou Z 等［12］的研究表明，隨著糖尿病腎病的發生和發展，血清肌肽含量逐漸降低，血清CN?1 含量逐漸升高。這與本研究中糖尿病腎病組血清CN?1濃度高于單純糖尿病組和健康組的結果相符。此外，本研究還發現，在2 型糖尿病腎病發展過程中，血清CN?1 濃度隨著Scr、UAER 水平的升高以及eGFR 水平的降低而增加，即血清CN?水平與患者腎功能存在相關性，這與Rodriguez?Ni?o A 等［13］的研究結果一致。然而，Zhang S 等［14］對高加索2 型糖尿病腎病患者的研究得出了不同的結論，該研究表明血清CN?1 在糖尿病腎病中呈下降趨勢。這種差異可能是由種族差異造成的，因為決定CN?1 分泌功效的肌肽酶二肽酶1（CNDP1）基因多態性在不同人群中存在差異［15］。β2?MG 是一種低分子量蛋白質，由所有表達MHC 1 類抗原的細胞產生。它被腎小球過濾，但隨后幾乎完全被近端小管的細胞重新吸收和分解代謝。因此，β2?MG 是腎小管間質損傷的經典生物標志物［16］。然而，目前較少針對β2?MG 這一腎小管間質標志物與腎損傷的密切程度展開研究。通常認為在2 型糖尿病腎病病程早期β2?MG 排泄增加，而糖尿病患者尿樣中的白蛋白排泄保持在正常范圍內，這表明β2?MG可能早于尿白蛋白出現，提示腎小管病變早于腎小球病變。本研究顯示MAGE 波動范圍越大，β2?MG水平更高，患者腎功能損害越嚴重，這說明糖尿病患者血糖波動幅度較大、高水平HbA1c 可引起機體氧化應激和炎癥反應，導致糖尿病腎臟損傷越嚴重［17］。Jiang X 等［18］通過穩定MAGE 幅度、降低HbA1c 水平，改善了糖尿病腎病的腎損傷。由此可見，血糖波動通過氧化應激參與早期糖尿病腎病的發生、發展，在出現微量蛋白尿之前，可能已經損傷腎小管，導致腎小管重吸收功能障礙。因此，β2?MG可能是早期糖尿病腎損傷的潛在敏感標志物。

綜上，2 型糖尿病腎病患者血清CN?1、β2?MG水平存在異常，且其腎功能與患者血清CN?1、β2?MG水平存在相關性。