2016-2020年甘肅省奶牛結核病感染情況調查與分析

車小蛟，韓慶彥，羅莉寧，王 亮，于清磊，孟林明，高軍軍，薛喜娟

（甘肅省動物疫病預防控制中心，甘肅 蘭州 730046）

牛結核病（Bovine tuberculosis）是由牛分枝結核桿菌（Mycobacterium bovis）引起的一種人和多種家畜共患的慢性傳染病，組織器官多處出現結核結節性肉芽腫和壞死灶[1-2]。結核病牛由鼻汁、糞便、尿、乳汁、氣管分泌物等排出病菌，污染周圍環境而散布傳染動物和人[1]。牛感染后，可引起肺結核、乳房結核、淋巴結核、腸結核等臨床癥狀，牛結核病對養牛業，尤其是奶牛業的危害很大。本文通過對甘肅省 2016—2020年奶牛結核病感染情況進行初步調查與分析，旨在更好地掌握甘肅省奶牛結核病的流行現狀，為逐步凈化和有效控制該病提供數據支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 待檢奶牛 2016-2020年5年間甘肅省14個市（州）的存欄奶牛，共計 3 303個養殖場點，335 714頭奶牛。30日齡以下、臨產前 2個月內、正在生病的奶牛不檢測。

1.1.2 檢測試劑 提純牛型結核菌素，購自哈藥集團生物疫苗有限公司。

1.1.3 主要器材 游標卡尺、剪毛剪、一次性無菌注射器、酒精棉球、防護用品等。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 按照GB/T 18645-2002的PPD試驗操作[3]。

1.2.2 判定結果 注射部位前后出現明顯的炎性反應，皮皺厚差值大于或等于 4 mm，判為陽性；炎性反應不明顯，且皮皺厚差值為 2～4 mm，判為疑似；無炎性反應，皮皺厚值小于2 mm，判為陰性。判為疑似反應的牛只，于60 d后重新采樣進行復檢，結果仍為可疑或陽性的，判為陽性[3]。

1.2.3 數據分析 將檢測結果錄入 Excel，根據不同年份、不同養殖場點和不同地區，計算奶牛結核病的陽性數和陽性率，進行統計分析。

1.2.4 陽性牛處理 調查陽性奶牛均按照《牛結核病防治技術規范》進行撲殺和無害化處理；隔離陽性場/群，定期進行跟蹤檢測，發現可疑病例，及時隔離復檢[4]。

2 結果與分析

2.1 2016-2020年甘肅省奶牛結核病檢測情況

由表1可知，5年間共檢測 3 303個場點，335 714頭奶牛，檢出陽性奶牛 142頭，平均陽性率為 0.04 %，從2016年的 0.05 % 和 2017年的 0.1 % 降至 2020年的 0.03 %。結果表明，近5年甘肅省奶牛結核病檢測陽性率呈下降趨勢（圖1）。

表1 2016-2020年全省奶牛結核病檢測結果

圖1 2016-2020年全省奶牛結核病陽性率曲線

2.2 2016-2020年甘肅省不同養殖場點奶牛結核病檢測情況

由表2可知，5年間全省檢測種奶牛場的8 679頭，陽性數 0頭，陽性率為 0；規模場的295 186頭，陽性數57頭，陽性率為0.02 %；散養戶的 31 213頭，陽性數 85頭，陽性率為0.27 %；其他場點的636頭，陽性數0頭，陽性率為 0。結果表明，不同養殖場點檢出的陽性率存在明顯差異，檢出陽性率最高的是散養戶，規模場陽性率很低，采集的種奶牛場及其他場戶樣品全部為陰性。5年間規模場和散養戶總體陽性率都呈下降趨勢，散養戶下降明顯（圖2）。

表2 2016-2020年不同養殖場點全省奶牛結核病檢測結果

圖2 2016-2020年不同養殖場點奶牛結核病陽性率變化曲線

2.3 2016-2020年甘肅省不同地區奶牛結核病檢測情況

由表3可知，全省14個市（州）2016-2020年的總陽性率分布范圍為 0 %～1.9 %，平均陽性率為 0.04 %。高于平均陽性率的有 4個市（州），低于平均陽性率的有 10個市（州）。結果表明，甘肅省不同地區奶牛結核病檢測陽性率呈明顯差異，防控效果也存在差異。張掖、平涼、隴南、臨夏 4個市（州）陽性率均高于農業部凈化標準（0.05 %），防控工作形勢依然嚴峻。

表3 2016-2020年甘肅省不同地區奶牛結核病檢測結果

2.4 奶牛結核病與人肺結核相關性

甘肅省奶牛結核病疫情形勢與甘肅省衛生部門公布的肺結核疫情整體趨勢吻合，2016-2020年甘肅省奶牛結核病和人肺結核發病具有正相關性，總體上奶牛結核病陽性數與人肺結核發病數呈逐年下降趨勢（圖3、圖4）。

圖3 2016-2020年奶牛結核病陽性數

圖4 2016-2020年人肺結核病例數

3 討論與結論

本次調查按照GB/T 18645-2002的PPD試驗進行操作和判定，該標準已重新進行了修訂，現在執行的是 GB/T 18645-2020，于 2020年12月14日發布，新標準中增加了臨床診斷方法、PCR檢測、γ-干擾素體外檢測法等，診斷結果判定也會發生一定變化[5]。本次調查主要目的是通過PPD試驗進行大規模初篩，從而對省內結核病發病情況進行初步調查。值得注意的是，牛結核PPD皮內變態反應存在誤差，有一定的非特異性，受外界環境及人為因素的影響較為明顯，在大規模檢測中，易出現陽性漏檢情況[6]，有時造成不必要的經濟損失，實際工作中還要結合臨床癥狀或 PCR試驗、γ-干擾素 ELISA 檢測法，從而確保陽性病例的準確性。操作中必須做好個人安全防護工作，佩戴眼罩、口罩、橡膠鞋套、防護服等，并對做過的樣品和污染過的環境進行消毒處理。

1957年蘭州市奶牛結核病變態反應陽性率為19.44 %。1965-1980年蘭州等5市（州）奶牛結核病調查，平均陽性率 3.33 %[7]。1981-1989年全省奶牛結核病調查，平均陽性率為 0.53 %。1990-2014年全省共檢測奶牛 878 324頭，檢出了陽性奶牛 1177頭，平均陽性率為 0.13 %[8]。2011-2016年全省共檢測奶牛 326 651頭，檢出了陽性奶牛 183頭，平均陽性率 0.06 %[9]。本次調查平均陽性率為 0.04 %，與歷史數據相比，60年來全省奶牛結核病陽性率不斷下降，奶牛結核病感染情況趨向好轉。近年來，甘肅省獸醫主管部門高度重視，加大了項目支持和經費投入，采取行政手段，強制撲殺和無害化處理，通過實施監測、撲殺、凈化為主的綜合措施，使得甘肅省奶牛結核病防控工作取得階段性成效，奶牛結核病陽性率呈逐年下降態勢。

不同養殖場點奶牛結核病檢出陽性率存在明顯差異，不同場點檢出陽性率分別為：散養戶0.27 %、規模場 0.02 %、種奶牛場 0、其他場0，散養戶陽性率高于規模場，徐小艷等[10]、趙勝杰等[11]、陳利霞[12]的研究結果與本研究結論基本一致。造成這種情況的原因可能是散養戶對奶牛結核病防控意識較差，牛舍及周圍環境衛生差，飼養密度大，奶牛舍通風不暢、潮濕、陽光不足、缺乏運動等易造成奶牛結核病傳播。相比而言，規模化奶牛場飼養管理水平較高，養殖設施與設備齊全，飼料營養配比科學合理，落實有效的生物安全防護措施等，能防止疫病傳播，因而檢出陽性率較低。甘肅省奶牛養殖規模多以中小型為主，散養戶居多，這也是今后奶牛結核病防控工作存在的薄弱環節。

奶牛結核病為人畜共患病，可與人結核病交叉感染，要引起畜主的重視，增強防范意識，避免造成交叉感染[13]。根據國家疾病預防控制局發布的《2020年全國法定傳染病疫情概況》數據顯示，2020年全國共報告肺結核發病670 538例，死亡 1 919人，發病總數和病死總數都很高。甘肅省衛生健康委員會發布的《2020年甘肅省法定傳染病疫情公布》數據顯示，2020年全省共報告肺結核發病 8 119例，死亡 13人，僅次于艾滋病。肺結核仍然是長期嚴重危害人民健康的慢性傳染病，奶牛結核病和人肺結核發病具有高度的相關性，這也給奶牛結核病的防控增加了難度，本省奶牛結核病防控形勢依然嚴峻。

調查發現甘肅省奶牛中存在牛結核病感染情況，各地的防控效果存在差異，其中隴南市、平涼市奶牛結核病流行最為嚴重，散養戶感染牛結核病的風險明顯高于規模戶。針對不同的區域、不同的場點，有關部門需要制定相應的牛結核病防控和凈化措施，重點加強對監測陽性牛和陽性牛群的管理，強化調運奶牛的產地檢疫和流通監管，引導奶牛養殖模式由散養逐步向規模化過渡，加強對養殖場（戶）防疫和養殖技術交流培訓，提高養殖場（戶）的科學防疫和科學養殖水平，建立健全科學防疫制度，加強監督，落實生物安全防護措施，定期開展奶牛結核病的檢測和監測，及時淘汰陽性奶牛，積極培育和壯大奶牛結核病陰性群體，逐步實現場群凈化和區域凈化。