基于HPLC指紋圖譜的不同產地金錢草及其地方習用品與混用品的鑒定研究

陳 云，徐璐娜，王翰華，李兆慧，周漫佳，程汝濱*

基于HPLC指紋圖譜的不同產地金錢草及其地方習用品與混用品的鑒定研究

陳 云1，徐璐娜1，王翰華1，李兆慧1，周漫佳2，程汝濱2*

1. 浙江藥科職業大學，浙江 寧波 315100 2. 浙江中醫藥大學，浙江 杭州 310053

對不同產地的金錢草及其常見的地方習用品與混用品的HPLC指紋圖譜進行研究，比較分析不同產地金錢草及其習用品與混用品的差異，為其鑒定技術的開發應用奠定基礎。利用80%甲醇制備金錢草及其習用品與混用品樣品的提取溶液，采用HPLC法建立不同產地的金錢草及其習用品與混用品提取液的指紋圖譜，明確金錢草及其地方習用品與混用品的特征鑒別峰，分析比較不同產地金錢草樣品間指紋圖譜的差異，利用SPSS軟件對不同樣品的指紋圖譜進行聚類分析和主成分分析，明確HPLC指紋圖譜在不同產地金錢草樣品的質量評價和習用品與混用品的正偽鑒別中的作用。HPLC指紋圖譜共獲得了區分度較好的8個特征峰數據，可用于后續的鑒別和質量評價，其中金錢草和其地方習用品浙金錢草與幾種混用品的指紋圖譜存在顯著差異，SPSS聚類分析結果表明HPLC指紋圖譜可將金錢草及其地方習用品與混用品進行準確高效區分；不同產地金錢草的指紋圖譜存在一定差異，其中四川產地和貴州、云南產地的可以進行有效區分。HPLC指紋圖譜能有效區分不同產地金錢草及其地方習用品與混用品，鑒定結果具有快速、準確和操作簡單的特點，為控制金錢草藥材商品的質量提供了技術保障。

金錢草；混用品；指紋圖譜；相似度；聚類分析

金錢草為報春花科植物過路黃Hance.的干燥全草[1]，又名大金錢草、四川大金錢草等，主要含有黃酮、揮發油、三萜等化學成分，具有利尿通淋、除濕退黃等功效，因其對治療肝膽結石效果顯著，被譽為治結石之要藥[2]。由于歷史原因和資源限制，金錢草地方習用品和混用品眾多，至少有7個科14種植物被作為金錢草在各地使用，點腺過路黃、天胡荽、活血丹、廣金錢草、馬蹄金、積雪草等均在特定地區被作為金錢草使用[3]。隨著藥材野生資源的不斷衰竭，市場存在著藥材品種混亂、摻偽、染色、重金屬超標、農藥殘留等問題，這些都嚴重影響著藥材的質量[4]。近年來發現，金錢草同屬植物聚花過路黃、巴東過路黃等也作為金錢草偽品流通于市場[5]。金錢草“同名異物”“以假亂真”現象嚴重，地方習用品和混用品與正品金錢草在化學成分、藥理作用和臨床功效等方面存在一定差異，為金錢草的臨床用藥帶來了一定的安全隱患。

隨著中醫藥大健康產業的發展，對中藥材的質量提出了更高的要求。道地藥材是經過中醫臨床長期應用優選出來，產在特定地域的藥材，與其他產區藥材相比，品質和療效更好，且質量更穩定。楊正久等[6]對貴州省不同來源地的21份金錢草樣品進行分析，發現其在槲皮素和山柰素含量上有顯著差異，具有豐富的多樣性與一定地域性。金錢草主產于云貴川地區，雖被收入《四川道地中藥材志》，成為49味川產道地藥材之一[7]，但不同產區的金錢草藥材質量仍缺乏可靠的評價方法，難以體現其優質性，易導致低質量金錢草藥材的市場沖擊，不利于健康有序的優質優價金錢草中藥市場環境的建立。因此，迫切需要建立開發一種金錢草質量分析方法，對不同產區的金錢草進行質量評價和區分，為金錢草道地產區的確認奠定夯實的基礎。

HPLC指紋圖譜是從中藥多組分角度為研究基礎的現代分析技術，是中藥品種鑒定及質量評控的一種常用方法[8]。杜歡等[9]證實HPLC特征圖譜可以有效區分金錢草及其混用品銹毛過路黃、顯苞過路黃等，提示該技術在金錢草的質量評價和品種鑒別方面具有廣闊的應用前景。本研究以蘆丁、槲皮素為主要參比成分，采用HPLC法對不同地區金錢草及其習用品與混用品藥材進行指紋特征圖譜測定及其特征峰的歸屬確認分析，并結合相似度分析、聚類分析和主成分分析比較其差異，來考察HPLC指紋圖譜對不同產地金錢草原藥材及其常見的幾種市場銷售的地方習用品與混用品的鑒定能力，用以提高金錢草用藥的準確性，為臨床安全合理用藥提供技術保障。

1 儀器與材料

1.1 儀器

LC-20A型高效液相色譜儀（日本島津公司）；SB-5200DT型超聲波清洗機（寧波新芝生物科技有限公司）；ME204型十萬分之一電了天平（瑞士梅特勒公司）；QE-200型高速粉碎機（浙江屹立工貿有限公司）。

1.2 材料

蘆丁（批號C20J6Y1722，質量分數≥98%），槲皮素（批號C20J6Y1722，質量分數≥98%），對照品均購自上海源葉生物科技有限公司；甲醇，乙腈均為色譜純，水為娃哈哈純凈水，購自寧波奧博科技有限公司。

30批金錢草及其習用品與混用品藥材樣品來源信息見表1，浙江臺州、寧波產地的連錢草和馬蹄金為筆者自行采集，其他產地金錢草及其混用品藥材分別購于全國各地的藥材市場。經浙江醫藥高等專科學校中藥學院李兆慧副教授鑒定分別為過路黃Hance（金錢草）、點腺過路黃Maxim．（浙金錢草）、連錢草(Nakai) Kupr.、廣金錢草(Osbeck) Merr.、馬蹄金Urban.和積雪草(L.) Urb.，將樣品做好標記后保存于該單位奉化校區中藥實驗室。

2 方法

2.1 樣品溶液的制備

取樣品3 g，加50 mL 80%甲醇至150 mL具塞錐形瓶中，密塞，稱定質量，60 ℃超聲40 min，放冷，80%甲醇補足質量，濾過，精密量取續濾液25 mL，微孔濾膜（0.45 μm）濾過，取續濾即得。

表1 樣品來源

Table 1 Sample source

樣品品種來源地 S1金錢草（對照藥材）四川秦巴 S2金錢草四川秦巴 S3金錢草四川維康大藥房 S4金錢草四川維康大藥房 S5金錢草四川遂寧 S6金錢草四川遂寧 S7金錢草四川沐川 S8金錢草四川沐川 S9金錢草貴州遵義 S10金錢草貴州遵義 S11金錢草云南 S12金錢草云南 S13浙金錢草浙江臺州 S14浙金錢草浙江臺州 S15廣金錢草廣東肇慶 S16廣金錢草廣東梅州 S17廣金錢草廣東汕頭 S18廣金錢草廣西南寧 S19連錢草浙江臺州 S20連錢草浙江寧波 S21連錢草江蘇揚州 S22連錢草湖北 S23馬蹄金廣東梅州 S24馬蹄金浙江臺州 S25馬蹄金浙江寧波 S26馬蹄金貴州黔東南 S27積雪草廣西桂林 S28積雪草廣西玉林 S29積雪草湖北 S30積雪草貴州

2.2 對照品溶液的制備

取蘆丁、槲皮素對照品，加甲醇制成含蘆丁11 μg/mL、槲皮素2 μg/mL的混合溶液，即得。

2.3 色譜條件

Inertsil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相0.3%醋酸溶液（A）-乙睛（B），梯度洗脫（0～15 min，92%～85% A；15～45 min，85%～79% A；45～50 min，79%～75% A；50～60 min，75%～55% A；60～75min，55%～45% A；75～80 min，45%～92% A），柱溫30 ℃，體積流量0.9 mL/min，檢測波長360nm，進樣量10 μL。色譜圖見圖1。

蘆丁和槲皮素等黃酮類化合物為金錢草的主要有效成分之一，且在HPLC指紋圖譜中的出峰時間適中，因此本實驗選蘆丁、槲皮素的色譜峰作為金錢草的參照色譜峰，對不同產地金錢草及其地方習用品與混用品的HPLC指紋圖譜進行比較分析。

5-蘆丁 7-槲皮素，下同

2.4 方法學考察

2.4.1 重復性試驗 取金錢草S1樣品藥材同一批次6份，精密稱定，按“2.1”項下的制備方法制備，按2.3項下的色譜條件測定，以5號峰（蘆丁）作為參照峰，計算出各共有峰的相對保留時間的RSD在0.03%～0.47%、相對峰面積的RSD在0.23%～1.50%。

2.4.2 精密度試驗 取金錢草S1樣品藥材1份，精密稱定，按“2.1”項下的制備方法制備，按“2.3”項下的色譜條件重復進樣5次，測定各特征色譜圖，以5號峰（蘆丁）作為參照峰，計算出各共有峰的相對保留時間的RSD在0.02%～0.34%、相對峰面積的RSD在0.16%～0.47%。

2.4.3 穩定性試驗 取金錢草S1樣品藥材末1份，精密稱定，按“2.1”項下的制備方法制備，按“2.3”項下的色譜條件，分別于0、2、4、8、12 h檢測，測定各特征色譜圖，以5號峰（蘆丁）作為參照峰，計算出各共有峰的相對保留時間的RSD在0.04%～0.43%，相對峰面積的RSD在0.26%～1.04%。

2.5 數據處理

將30批金錢草及其地方習用品與混用品藥材樣品，按“2.1”項下的方法制備，按“2.3”項下的色譜條件檢測，得到的圖譜導入“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統”（2012A）軟件進行分析處理，以S1號金錢草樣品（四川秦巴地區）的指紋圖譜為參照圖譜，多點校正，采用平均數法，時間窗寬度為0.1，計算各樣品與參照圖譜相似度，識別共有峰。通過SPSS 24軟件對這30批樣品HPLC指紋圖譜的8個共有特征峰峰面積進行數據處理，采用組間聯接法，以平方Euclidean距離為度量標準，進行聚類分析，并采用降維、因子分析，以回歸方法，計算主成分特征值和方差貢獻率，將得到的成分矩陣進行正交旋轉，得到一個旋轉矩陣，進行主成分分析。

3 結果與分析

3.1 HPLC指紋圖譜的分析

對來自全國8個地區的30批金錢草及其地方習用品與混用品藥材樣品進行HPLC指紋圖譜的測定，結果如圖2所示，金錢草含有分離度較好且峰面積占比較大的8個特征峰，可作為區分鑒別金錢草及其習用品與混偽品的主要依據。與對照品比對分析后，明確5號峰為蘆丁，7號峰為槲皮素，金錢草及其習用品與混偽品之間的指紋圖譜存在著顯著差異，HPLC指紋圖譜可作為一種鑒別金錢草正偽品種的有效手段。1～4號峰和6號峰在部分混偽品樣品中均有缺失，其中1號峰在浙金錢草（S13）中的占比最高；5號峰在廣金錢草（S15）中的占比最低，在馬蹄金中最高（S23）；6號峰在廣金錢草（S15）、連錢草（S19）中缺失，在馬蹄金（S23）與積雪草（S27）中的占比都較高；而8號峰占比最低的是馬蹄金（S23），最高的是積雪草（S27）。該結果提示金錢草指紋圖譜中的1～8號峰，可作為金錢草HPLC指紋圖譜特征鑒定的指標，是金錢草及其習用品與混用品區分的重要依據。

如圖3所示，不同產地金錢草之間的指紋圖譜也存在著一定的差異，金錢草含有分離度較好且峰面積占比較大的8個特征峰，可作為區分鑒別不同產地金錢草之間的主要依據。與對照品比對后，明確5號峰為蘆丁，7號峰為槲皮素，其中1、6和8號峰在貴州遵義（S9）、云南（S11）產地樣品中的占比均低于其他產地；3、7號峰在貴州遵義（S9）產地中的占比最低；4、5號峰占比較高的是四川秦巴（S1）、維康（S3）、沐川（S7）產地。該結果顯示金錢草指紋圖譜中這1～8號峰，可作為金錢草HPLC指紋圖譜特征鑒定的指標，是區分不同產地金錢草之間的重要依據。

圖2 金錢草及其習用品與混用品代表藥材HPLC特征圖譜

圖3 不同產地金錢草代表藥材HPLC特征圖譜

為進一步深入分析HPLC指紋圖譜中特征峰的鑒定效果，對不同樣品中的特征峰含量和比例進行量化分析，以5號峰作為參照峰，分別計算各樣品各共有峰的相對峰面積，習用品和混用品均已取其平均值，結果如表2所示。金錢草及其習用品與混用品共有峰的相對峰面積的RSD值在25.07%～83.03%，其中2號峰的RSD值最大，7號峰的RSD值最小；2號峰在馬蹄金和積雪草中缺失，其相對峰面積在廣金錢草中占比最高；8號峰的相對峰面積在金錢草中占比最高，在馬蹄金中最低；3號峰在積雪草中缺失，在金錢草中占比最高；6號峰在廣金錢草、連錢草中均缺失，其相對峰面積占比最高的是積雪草；浙金錢草在4、5號峰占比較大的同時，1號峰在其他習用品及混偽品中占比最高，說明浙金錢草可能在這些習用品及混偽品中與正品金錢草的差異性最小；廣金錢缺失2個特征峰，且5號峰在其他習用品及混偽品中占比最低，積雪草缺失3個特征峰，1號峰在其他樣品中占比最低，說明廣金錢草和積雪草可能與正品金錢草差異性更大。該結果也提示金錢草指紋圖譜中的1～8號峰，可作為金錢草HPLC指紋圖譜特征鑒定的指標，是金錢草及其習用品與混用品區分的重要依據。

不同產地金錢草的共有峰的相對保留時間的RSD＜1.79%，說明在成分組成上大致一樣，相對峰面積的RSD值在5.88%～23.93%，說明在含量上有所差異，其中8號峰的RSD值最大，7號峰的RSD值最小；4號峰、5號峰在四川維康中的相對峰面積占比最高；3號峰、7號峰在貴州遵義產地中最低；2號峰在貴州遵義、云南產地中的相對峰面積占比最高，在四川遂寧中最低；1號峰、6號峰和8號峰的相對峰面積在貴州遵義、云南產地中最低，說明貴州遵義、云南產地的金錢草在特征峰含量上可能與四川產地相比具有更大的差異，其原因可能與生長環境有關，有待深入研究。

表2 金錢草及其習用品與混用品HPLC指紋圖譜特征峰相對峰面積

Table 2 Fingerprint characteristic peak relative peak area of L. christinae and its articles and mixes

樣品特征峰相對峰面積 12345678 S11.090.760.771.211.000.580.170.68 S21.090.760.771.211.000.580.170.68 S31.050.760.831.231.030.570.180.68 S41.040.760.821.221.030.570.180.68 S51.030.710.920.870.820.500.180.67 S61.040.710.920.880.830.500.180.67 S71.080.780.901.161.000.560.170.69 S81.080.780.901.160.990.560.170.69 S90.760.880.540.850.970.440.150.38 S100.760.890.540.850.960.440.150.38 S110.780.810.880.890.890.420.170.39 S120.780.810.860.890.890.420.170.39 S131.170.200.360.450.420.380.080.15 S141.160.200.370.460.420.370.080.16 S150.001.160.430.640.090.000.140.12 S160.001.150.430.630.090.000.130.11 S170.001.160.430.640.090.000.140.12 S180.001.160.430.640.090.000.140.12 S190.520.190.190.230.380.000.260.11 S200.530.190.190.220.380.000.250.10 S210.520.180.190.230.380.000.260.11 S220.520.190.190.230.380.000.260.11 S230.640.000.170.390.790.960.150.09 S240.630.000.160.380.770.950.150.09 S250.640.000.170.390.790.960.150.09 S260.640.000.170.390.790.960.150.09 S270.480.000.000.000.200.980.180.30 S280.480.000.000.000.200.980.170.28 S290.470.000.000.000.210.960.180.30 S300.480.000.000.000.200.980.180.30

3.2 相似度分析

以S1號金錢草樣品（四川秦巴地區）為參照圖譜，通過“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統”（2012A）軟件對這30批金錢草及其習用品與混用品圖譜進行分析處理，生成對照指紋圖譜，見圖1，并進行相似度計算。30批樣品的相似度差異較大，習用品和混用品相似度在0.023～0.486，其中浙金錢草（S13～S14）與金錢草（S1～S12）的相似度相對較高，廣金錢（S15～S18）、積雪草（S27～S30）的相似度略低，在0.023～0.045。不同產地的金錢草（S1～S12）相似度較高，在0.916～1.000，其中貴州遵義（S9～S10）、云南（S11～S12）產地的相似度稍低于四川產地（S1～S8），其原因可能與生長環境有關，有待深入研究。

3.3 聚類分析

通過SPSS 24軟件對這30批樣品HPLC指紋圖譜的8個共有特征峰峰面積進行聚類分析，結果如圖4所示。當Euclidean距離大于5時，金錢草及其習用品與混用品樣品可聚為6類，積雪草（S27～S30）聚為第1類，馬蹄金（S23～S26）聚為第2類，連錢草（S19～S22）聚為第3類，浙金錢草（S13～S14）聚為第4類，金錢草（S1～S12）聚為第5類，廣金錢草（S15～S18）聚為第6類。不同產地的金錢草可聚為2類，其中貴州遵義（S9～S10)、云南（S11～S12）產地的金錢草可聚為一類，四川（S1～S8）產地的金錢草聚為第2類，說明不同產地金錢草及其地方習用品與混用品的HPLC指紋圖譜有很大差異，其聚類趨勢與相似度計算結果基本一致。這也體現了不同產地的金錢草具有一定的區域性，貴州產地和云南產地的金錢草之間有一定的親緣關系，而四川作為金錢草的主產區有一定的獨特優勢，這為金錢草道地藥材的質量評價和鑒定區分提供了一定的技術保障。

圖4 金錢草及其習用品與混用品的聚類分析樹狀圖

3.4 主成分分析

通過SPSS 24軟件對這30批樣品HPLC指紋圖譜的8個共有特征峰峰面積進行主成分分析，結果見表3。主成分特征值和方差貢獻率是選擇主成分的依據，載荷矩陣反映了各變量對主成分的重要程度。經因子分析所得的前3個主成分，其特征值均＞1，即4.122、1.972、1.114，方差的總累積達90.095%，說明各個成分之間具有較強的相關性，適合主成分分析。將得到的成分矩陣進行正交旋轉，得到8個指標在3個主成分中的旋轉矩陣，據表4所示：第1主成分的信息主要來自于1、3、4、5（蘆丁）、8號色譜峰，第2主成分信息主要來自6號色譜峰，第3主成分信息主要自7（槲皮素）號色譜峰。以1、2、3主成分為自變量繪制得分圖如圖5所示，從圖中可以看出不同產地金錢草及其地方習用品與混用品樣品已經進行了很好地分類，共分為6大類，金錢草（S1～S12）聚為第一類，浙金錢草（S13～S14）聚為第2類，馬蹄金（S23～S26）聚為第3類，積雪草（S27～S30）聚為第4類，連錢草（S19～S22）聚為第5類，廣金錢草（S15～S17）聚為第6類，其結果與聚類分析基本一致。

表3 金錢草及其習用品與混用品的主成分分析特征值和方差貢獻率

Table 3 Principal component analysis of eigenvalue and variance contribution rate of L. christinae and its articles and mixes

成分特征值方差貢獻率/%累積方差貢獻率/% 14.12251.52551.525 21.97224.64976.174 31.11413.92190.095

表4 金錢草及其習用品與混用品的主成分因子荷載矩陣

Table 4 Principal component factor load matrix of L. christinae and its articles and mixes

峰號成分1成分2成分3 1 0.707 0.560 0.082 2 0.578?0.772?0.174 3 0.949?0.244 0.028 4 0.955?0.224?0.061 5 0.826 0.393 0.116 6 0.019 0.876?0.286 7?0.158?0.010 0.976 8 0.877 0.174 0.157

圖5 金錢草及其習用品與混用品的指紋圖譜得分

4 討論

本研究首先對樣品制備方法及色譜條件進行了優化，最終以出峰數量和分離效果確定以80%甲醇的溶劑超聲提取，以Inertsil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）、流動相0.3%醋酸-乙腈、梯度洗脫、柱溫30 ℃、體積流量0.9 mL/min、檢測波長360 nm為最佳色譜參數。其次通過相似度分析、聚類分析和主成分分析對不同產地金錢草及其地方習用品與混用品的HPLC指紋圖譜進行了研究。結果顯示HPLC指紋圖譜共獲得了區分度較好的8個特征峰，指認了5號峰為蘆丁，7號峰為槲皮素，其中金錢草及其地方習用品與混用品的指紋圖譜存在顯著差異，浙金錢草與正品金錢草的相似度最高，廣金錢草、積雪草的相似度略低，SPSS聚類分析結果表明HPLC指紋圖譜可將金錢草及其地方習用品與混用品進行準確高效區分；不同產區金錢草的指紋圖譜存在一定差異，其中四川產區和貴州、云南產地的可以進行有效區分。以上結果表明，本研究建立的HPLC指紋圖譜法可用于鑒別不同產地金錢草及其地方習用品與混用品，且浙金錢草長期作為浙江地區金錢草藥材的代替習用品，具有一定的科學依據。本研究的開展為浙金錢草資源的開發與利用提供了一定的技術保障，為后續浙金錢草的應用研究奠定了基礎，有助于對其進一步深入研究和有關健康產品的開發。

道地性中藥材是近年的研究熱點之一，隨著中藥現代化基地建設的推進，中藥材跨區域引種現象日益增加，加之市場流通的便利性，道地藥材與非道地藥材在藥材市場共存，嚴重影響了道地性藥材價值和療效。我國作為道地藥材的產區，原材料豐富，全國均有分布，且政府越來越重視中醫藥文化及技術的發展與傳承，這也為道地藥材擴大市場占有率提供了有利條件[10]。藥材性狀、藥效和化學成分通常是評價道地藥材的直接指標，其中化學成分分析被公認為道地藥材的內在質量標準[11]，這幾年來，很多學者用化學指紋圖譜對道地藥材進行鑒定識別，效果顯著，指紋圖譜也已成為國際公認的控制中藥質量的最有效手段[12]。本研究表明，不同產地的金錢草在HPLC指紋圖譜上有一定差異，其中四川秦巴、維康、遂寧、沐川產地的樣品和貴州遵義、云南昆明產地的有著顯著差異，主要體現在成分含量上有一定的差別，且不同產地的金錢草表現出了一定的區域性，四川產區的金錢草樣品與貴州、云南產地樣品能夠明顯區分，四川作為金錢草的主產區有一定的獨特優勢[7]，這為金錢草道地藥材的質量評價和鑒定區分提供了一定的技術保障。

在廣東、廣西地區，常把廣金錢草當作金錢草使用，稱為“廣東金錢草”，含黃酮和生物堿成分，主治泌尿系結石等病癥[13]；積雪草在湖北、廣西地區也被當作金錢草使用，稱為“地錢草”[14]，主要含有三萜類和揮發油類成分，有著抗抑郁、抗炎等作用[15]；在江浙滬地區，用于治療各種熱淋、尿路結石等病癥的“金錢草”其實大部分是連錢草[16]，主要含揮發油和三萜酸類成分[17]；在四川和貴州等地區，還把馬蹄金當作金錢草，稱為“小金錢草”[18]，含黃酮和揮發油類成分，主要用于治療濕熱黃疽、尿路感染等病癥，具有鎮痛、抗炎作用[19]；點腺過路黃在浙江地區的資源蘊藏量非常豐富，并收錄在《浙江省中藥炮制規范》中，因其與正品金錢草的主治功效相似，因此在浙江地區常用其作為金錢草的代替習用品長期使用，名為“浙金錢草”[20]，主要成分為糖類和氯化鉀，具有清利濕熱、消腫的功效，主要用于治療炎癥，包括肝炎、膀胱炎等[21]。正品金錢草主要含有黃酮和揮發油類成分，以除濕退黃、利膽排石為主要功效，偏重于治結石，如此混用，必將給金錢草的臨床應用帶來一定的安全隱患。

本研究發現，HPLC指紋圖譜可以作為一種評判不同產地金錢草及其地方習用品與混用品質量差異的方法，但因藥材取樣的局限性，本研究不能完全代表各產地金錢草及其地方習用品與混用品的質量差異，應進一步在其他成分或其他方面進行深入分析，以提高用藥的科學性。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 中國藥典[S]. 一部. 2020: 23.

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Study on identification technology ofand its local common articles and mixed articles based on HPLC fingerprint

CHEN Yun1, XU Lu-na1, WANG Han-hua1, LI Zhao-hui1, ZHOU Man-jia2, CHENG Ru-bin2

1. Zhejiang Pharmaceutical University, Ningbo 315100, China 2. Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China

To researchand its local common articles and mixed articles based on HPLC fingerprint, and compare and analyze the differences of the medicinal materials and mixed articles in different areas, so as to lay a foundation for the development and application of the identification technology.Using 80% methanol to preparationand its local common articles and mixed articles extracts, HPLC method was used to establish the fingerprints of theand its local common articles and mixed articles, clarify the characteristic identification peak of theand its local common articles, analyze and compare the differences of the fingerprints of different thesamples. SPSS software was used for cluster analysis of fingerprints of different samples, to clarify the role of HPLC fingerprint in the quality evaluation of thesamples in different areas and the positive and false identification of common articles and mixed articles.The data of eight characteristic peaks were obtained by fingerprint. The composition and proportion of each characteristic peak in the fingerprint of differentspecies were significantly different, the results of SPSS cluster analysis showed that HPLC fingerprint could be used to accurately and efficiently distinguish theand its local common articles. There were also some differences in the fingerprint patterns of the samples from different regions, among which the samples from Sichuan, Guizhou and Yunnan could be effectively distinguished.HPLC fingerprint can effectively distinguish the sources of differentand its local common articles, and the identification results have the characteristics of rapid, accurate and simple operation, which provides a technical guarantee for the quality control of the.

Hance; adulterants; fingerprint; similarity; cluster analysis

R286.2

A

0253 - 2670(2022)14 - 4504 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.14.029

2021-12-19

浙江醫藥高等專科學校校級科研基金項目（XY2020005，ZPCSR2020006，ZPCSR2020007）

陳 云（1988—），女，實驗師，碩士，研究方向為中藥資源的化學成分和質量控制研究。Tel: 13429355212 E-mail: 365553752@qq.com

程汝濱，副研究員，研究方向為中藥資源開發與利用。Tel: 15988839155 E-mail: biothcheng@hotmail.com

[責任編輯 時圣明]