雛鵝痛風(fēng)的診斷和防控

苗艷 朱慶賀 陳亮 蘭世捷 張蕾 李丹 馮萬宇 沈思思 黃寶銀 金振華 張紅 田秋豐

雛鵝痛風(fēng)是近年在我國多地區(qū)爆發(fā)的一種由鵝星狀病毒（Goose astrovirus，GAstV）引起的鵝的傳染性疾病，以內(nèi)臟尿酸鹽沉積為主要臨床特征。該病發(fā)病率和致死率都較高，給養(yǎng)鵝業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失，目前尚無針對該病的疫苗和特效藥。本文現(xiàn)對該病的流行病學(xué)、臨床癥狀、診斷和防控措施進(jìn)行概述，旨在為該病今后的研究提供參考。

1 流行病學(xué)

雛鵝痛風(fēng)的主要傳染源是患病鵝和帶毒鵝，此外還有其排泄物和病鵝污染的飼料、鵝舍、用具等。一般認(rèn)為該病主要是通過糞-口途徑進(jìn)行水平傳播，即主要通過消化道和呼吸道進(jìn)行傳播。食物和水可以作為星狀病毒傳播的載體。各日齡的鵝均可感染該病毒，但4～21日齡雛鵝更易感和發(fā)病。該病常年可見，發(fā)病高峰期以6～14日齡雛鵝為主。發(fā)病率在80%左右，致死率在30%～50%之間。

2 臨床癥狀

該病主要以雛鵝內(nèi)臟和關(guān)節(jié)尿酸鹽沉積、出血為特征，最早可在1日齡發(fā)病?；疾‰r鵝通常表現(xiàn)為精神沉郁、采食量減少、活動減少、排白便、腿關(guān)節(jié)腫大，并有尿酸鹽沉積、癱瘓。剖檢可在腎臟、膽囊、膝蓋、輸尿管以及心臟、肝臟、肺泡、輸尿管和前胃表面發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的尿酸鹽沉積。疾病持續(xù)7～10 d，并伴有高發(fā)病率和高死亡率。存活下來的鵝生長緩慢且很容易再感染其他病菌。組織病理學(xué)發(fā)現(xiàn)，病鵝血清中尿素含量升高，腎小管管腔和肝細(xì)胞有尿酸鹽沉積。

3 診斷

3.1 臨床診斷

雛鵝痛風(fēng)的臨床特征比較明顯，可根據(jù)該病的特征性癥狀和剖檢變化作出初步診斷。但引起雛鵝痛風(fēng)的因素較為復(fù)雜，例如缺乏維生素 A 、鈣磷比例失調(diào)、飼料蛋白含量高、寄生蟲感染和磺胺類藥物中毒等都可導(dǎo)致雛鵝發(fā)生痛風(fēng)。因此，還需要進(jìn)一步進(jìn)行實驗室診斷才能最終確診病因。

3.2 病毒的分離培養(yǎng)

采集新鮮患病雛鵝的肝臟、腎臟、脾臟等組織樣品，經(jīng)處理后接種鵝胚進(jìn)行病毒的分離培養(yǎng)。

3.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）

RT-PCR是一種最為常用的病原檢測方法，可以直接對所分離到的病毒或臨床采集的樣品進(jìn)行快速診斷。通過對鵝星狀病毒的ORF1b、ORF2或RdRp基因進(jìn)行擴增并通過測序后進(jìn)行序列分析，可對鵝星狀病毒進(jìn)行分型。熒光定量PCR也是一種比較常用的分子檢測技術(shù)，特異性和敏感性都較高，已被廣泛用于各種動物疾病的臨床診斷。Yuan等[1]建立了一種鵝星狀病毒RT-qPCR檢測方法，對新型鵝星狀病毒的最小檢出量為52.5拷貝/μL，比普通RT-PCR的病毒檢出率高出7.5%，為新型鵝星狀病毒早期快速檢測及定量分析提供了新的方法。白彩霞等[2]建立了一種鵝星狀病毒的SYBR Green I熒光定量RT-PCR檢測方法，最小檢出量為3.75×101拷貝/μL。

3.4 環(huán)介導(dǎo)等溫擴增（LAMP）

LAMP是一種新型的核酸擴增方法，能夠在恒溫條件下進(jìn)行擴增反應(yīng)，易于操作、簡單、快速高效，僅需水浴鍋等簡單儀器設(shè)備即可完成，已廣泛用于多種病原微生物的檢測。張玉霞等[3]建立了鵝星狀病毒的LAMP檢測方法，其最低檢測濃度為1 ng/μL，具有較好的特異性和敏感性。

3.5 ELISA

ELISA是一種較為成熟的診斷方法，已在各種動物疾病診斷中被廣泛應(yīng)用;具有操作簡單、設(shè)備要求簡單、快速、高效、特異性和敏感性強等優(yōu)點，是目前應(yīng)用最廣、發(fā)展最快的酶免疫學(xué)技術(shù)方法。張鑫宇等[4]發(fā)明了一種鵝星狀病毒的ELISA檢測試劑盒，其特異性強、敏感性高，能用于鵝星狀病毒抗體的批量檢測，田間樣品的陽性檢出準(zhǔn)確率為100%，陰性檢出準(zhǔn)確率為97.78%。

4 防控措施

目前，該病尚無良好的特效藥，也無商品化疫苗可以預(yù)防。本病的特異性防治以卵黃抗體接種為主，并配合使用抗生素對病情進(jìn)行控制，但總體效果并不理想。因此，在實際飼養(yǎng)過程當(dāng)中應(yīng)實行嚴(yán)格的生物安全防控措施來進(jìn)行預(yù)防。首先，應(yīng)改變傳統(tǒng)的飼養(yǎng)模式，采用網(wǎng)架飼養(yǎng)或多層籠養(yǎng)等育雛模式，可減少糞污與雛鵝的接觸幾率，避免病原感染;實行全進(jìn)全出、片區(qū)分點的方式，大力推進(jìn)糞污資源化利用，減少污染物的排放;加快養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展方式的轉(zhuǎn)變，不斷探索規(guī)模化、現(xiàn)代化、標(biāo)準(zhǔn)化的生態(tài)養(yǎng)殖模式;其次，要防止病原傳播，實行封閉式管理，做好飼養(yǎng)環(huán)境、發(fā)病廠區(qū)、設(shè)施、種蛋和工作人員等的隔離、清潔和消毒工作;最后，還要進(jìn)行合理飼喂，均衡日糧營養(yǎng)水平，降低飼料中的蛋白含量，從而減少尿酸鹽的產(chǎn)生。

參考文獻(xiàn)：

[1] Xiaoyuan Yuan，Kai Meng，Yuxia Zhang，et al. Establishment and Application of Rapid Diagnosis for Reverse Transcription-Quantitative PCR of Newly Emerging GooseOrigin Nephrotic Astrovirus in China[J].mSphere，2018 Nov 7，3（6）：e00380-18.

[2] 白彩霞，張達(dá)，趙靚，等. 鵝星狀病毒SYBR Green I熒光定量RT-PCR方法的建立[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報，2020，36（03）：634-638.

[3] 張玉霞，楊金興，孟凱，等. 鵝星狀病毒LAMP快速檢測方法的建立與應(yīng)用[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報， 2019，41（11）：1137-1140.

[4] 張鑫宇，劉瀟羽，周花艷，等.一種檢測鵝星狀病毒抗體的ELISA試劑盒及制備方法：201810641006.5[P].2018-11-13.