張彤晨,華麗娜,戴榮貴,曹 超,江 俊,吳冬平
(1.利津縣現代畜牧業發展服務中心,山東 東營 257400;2.鎮江威特藥業有限責任公司,江蘇 鎮江 212132)
市場上消毒劑品種繁多,如次氯酸鈉、碘制劑、季銨鹽類、甲醛、戊二醛、復合酚以及二氧化氯,其消毒效力在耐低溫方面存在差異。冬季,尤其在我國北方,飼養環境溫度較低,傳統消毒劑在低溫下難以維持原有的消毒效力,導致冬季成為細菌性以及病毒性疾病暴發的高峰期。為比較低溫對不同種類消毒劑消毒效力的影響,本試驗選用過硫酸氫鉀復合物粉、二氯異氰脲酸鈉粉、聚維酮碘溶液分別在25 ℃與-20 ℃環境溫度下進行定量殺菌試驗,以指導寒冷季節消毒劑的正確使用。
過硫酸氫鉀復合物粉,有效氯含量不低于10%,鎮江威特藥業有限責任公司提供;
二氯異氰脲酸鈉粉,有效氯含量10%,自配;
聚維酮碘溶液,10%,自配。
大腸桿菌,ATCC25922。
1.3.1 0.03 mol/L 磷酸鹽緩沖液
精確稱取磷酸二氫鈉2.84 g、磷酸氫二鉀1.36 g、硫代硫酸鈉2.0 g 至2 000 mL燒杯中,加入蒸餾水1 000 mL,調節pH 在7.2~7.4;高壓滅菌后分裝保存,作為三種消毒劑的中和劑[1]。
1.3.2 30%乙醇水溶液
以純化水配制質量分數為30%的乙醇水溶液,作為抗凍劑使用。
2.1.1 25 ℃環境溫度試驗用消毒液配制
分別準確稱取過硫酸氫鉀復合物粉、二氯異氰脲酸鈉粉、聚維酮碘溶液1.0 g 至500 mL燒杯中,各燒杯加入400 mL 純化水,充分攪拌,備用。此消毒液作為25 ℃環境溫度試驗用消毒液。
2.1.2 -20 ℃環境溫度試驗用消毒液配制
分別準確稱取過硫酸氫鉀復合物粉、二氯異氰脲酸鈉粉、聚維酮碘溶液1.0 g 至500 mL 燒杯中,各燒杯加入400 mL 30%乙醇水溶液,充分攪拌,-20 ℃保存備用。此消毒液作為-20 ℃環境溫度試驗用消毒液。
取按25 ℃環境溫度試驗用消毒液4.5 mL,至10 mL 塑料指型管中,加入0.5 mL大腸桿菌懸液(107個/mL),轉入25 ℃水浴鍋中作用10 min,每種消毒劑作5 個平行樣;取按-20 ℃環境溫度試驗用消毒液4.5 mL,至10 mL 塑料指型管中,加入0.5 mL 大腸桿菌懸液(107個/mL),轉入-20 ℃冰箱中作用10 min,每種消毒劑作5 個平行樣。
移取4.5 mL 中和劑至10 mL 塑料指型管中,加入上述消毒劑與細菌的混合液0.5 mL,10 min 后進行活菌計數,作為消毒后細菌數;同時取大腸桿菌懸液進行活菌計數,作為消毒前細菌數,計算殺菌率[2]:

式中:n0為消毒前活菌數,n10為消毒后活菌數。
在-20 ℃和25 ℃環境溫度下,分別對過硫酸氫鉀復合物粉、二氯異氰脲酸鈉粉、聚維酮碘溶液進行定量殺菌試驗。3 種消毒劑對大腸桿菌的平均殺菌率見表1。

由表1 可知,相較于25 ℃環境溫度下的消毒效力,過硫酸氫鉀復合物粉、二氯異氰脲酸鈉粉、聚維酮碘溶液在-20 ℃環境溫度下的消毒效力分別下降了8%、15%、20%,表明過硫酸氫鉀復合物粉在低溫下消毒效力維持好。
在我國,尤其是北方,冬季的養殖環境溫度較低,普通消毒劑在溫度高于0 ℃時殺菌效果較好,但低于0 ℃時,消毒效力大打折扣。氯制劑、碘制劑在寒冷季節和溫度低的情況下,無法起到有效的殺菌效果,這是造成我國北方地區養殖場冬季暴發疾病的一個原因。過硫酸氫鉀復合物粉是一種復合型消毒劑,通過氧化作用、氯化作用以及酸化作用復合殺滅病原,消毒效力耐低溫。本研究對不同種類消毒劑在常溫和低溫下進行定量殺菌試驗,結果發現,過硫酸氫鉀復合物粉不僅在常溫下能有效殺滅大腸桿菌,而且在低于0 ℃的低溫下也能保持較高的殺菌率。