免疫性血小板減少癥患者Th1、Th2、Treg、Th17細胞的表達及其臨床意義

侯十前，王麗花，劉 靜，路 萍，王永志，錢 維，王 希，劉 賢 (玉溪市人民醫院血液內科，云南 玉溪 653100)

免疫性血小板減少癥(ITP)是臨床上常見的一種自身免疫性出血性疾病，主要是由于免疫功能的紊亂導致血液系統巨核細胞和血小板生成和(或)破壞增加造成的血小板減少性疾病[1]。ITP在出血性疾病中約占33%，發病率約為(1～2)/2萬[2]。ITP的發生發展與細胞免疫失調密切相關，包括輔助性T細胞(Th細胞)、調節性T細胞 (Treg細胞)等[3]。這些細胞屬于效應性T細胞亞群，是輔助、調節B細胞產生抗體的主要細胞。ITP免疫機制目前尚不明確，本研究主要探討ITP患者Th1、Th2、Treg、Th17細胞比例的變化及其在臨床治療工作中的指導意義。

1 資料與方法

1.1一般資料：收集2019年1月～2020年12月期間在本院確診及治療的ITP患者98例作為研究組，其中男56例，女42例，平均年齡(40.02±4.67)歲。納入標準：①初診患者，臨床資料完整，依從性高；②符合《成人原發免疫性血小板減少癥診斷與治療中國專家共識(2016年版)》[4]的診斷標準。排除標準：①有糖皮質激素或免疫抑制劑治療史；②有細胞毒性藥物治療史；③有自身免疫系統疾病；④藥物過敏史。同期收集體檢中心健康體檢者100例為對照組，其中男57例，女43例，平均年齡(39.85±4.69)歲。兩組資料對比，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究符合倫理學標準，經醫院倫理委員會批準備案，研究對象均知情同意。

1.2檢測方法：所有研究對象于早晨8∶00左右空腹分別取靜脈血5 ml、2 ml，其中5 ml注入肝素抗凝管中，采用美國BD公司FACS Calibur流式細胞儀檢測Th1、Th2、Treg、Th17細胞比例；另一管2 ml,注入EDTA-K2抗凝管中，采用邁瑞BC-6900全自動血液分析儀檢測血小板計數(PLT)。

1.3統計學處理：采用SPSS 22.0統計軟件進行t及χ2檢驗。

2 結果

2.1兩組研究對象Th1、Th2、Treg、Th17細胞表達水平比較：研究組Th1、Treg細胞比例顯著低于對照組，Th2、Th17細胞比例顯著高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組研究對象Th1、Th2、Treg、Th17細胞表達水平比較

2.2研究組治療前后Th1、Th2、Treg、Th17細胞表達水平比較：治療后研究組PLT、Th1及Treg細胞比例較治療前顯著升高，Th2及Th17細胞比例較治療前顯著降低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 研究組治療前后Th1、Th2、Treg、Th17細胞表達水平比較

2.3研究組Th1、Th2、Treg、Th17細胞表達水平與PLT的相關性：根據Pearson相關性分析顯示，Th1、Treg與治療前后PLT的變化呈正相關(r=0.393，r=0.459，均P<0.01)，而Th2、Th17與PLT變化呈負相關(r=-0.307，r=-0.381，P<0.01)，見表3。

表3 Th1、Th2、Treg、Th17細胞表達水平與PLT變化的相關性

3 討論

ITP是以皮膚黏膜出血或內臟出血、骨髓巨核細胞成熟障礙、血小板破壞過多或生成時間縮短造成的出血性疾病[5]。以往臨床上ITP的確診主要依靠骨髓細胞學，這種方法存在一定局限性，可造成誤診、漏診，耽誤治療的最佳時期。

T輔助性淋巴細胞主要包括Th1、Th2、Treg、Th17四種。Th1、Th2是人體免疫調節細胞，屬于CD4+T細胞亞群。正常狀態下，Th1和Th2在體內分化均衡，以維持正常的免疫應答，一旦平衡被打破，就容易使機體處于病理狀態[6]。Th1特征性分泌干擾素(IFN)-γ，在巨噬細胞活化中起重要作用，促進免疫球蛋白(Ig)G生成。Th2特征性分泌細胞因子白細胞介素(IL)-4，促進Ig向IgG和IgE轉化。Th1/Th2失衡與很多自身免疫疾病相關，例如過敏性紫癜、變異性哮喘等[7-8]。Treg、Th17同屬于CD4+T細胞亞群，在免疫炎性反應中起到調節的作用，它們相互拮抗，比例失衡可導致炎性疾病和自身免疫性疾病[9]。Treg 主要分泌細胞因子IL-10、轉化生長因子(TGF)-β，在抑制自身免疫性疾病以及炎性反應中起重要作用[10]。Th17主要分泌IL-6、IL-17等細胞因子，與機體免疫功能相關，參與機體損傷過程[11]。本研究說明ITP患者處于T細胞比例失衡的狀態，這些細胞因子均參與了自身免疫性疾病的病理過程。另外，通過ITP患者治療前后Th1、Th2、Treg、Th17細胞水平以及PLT的變化，可以推論出T淋巴細胞亞群比例失衡在ITP的發生、進展中起重要作用，且Th1、Treg對ITP患者的發病起到促進作用，而 Th2、Th17對ITP患者的發病起到抑制作用。這與梁興林等[12]的報道相一致。

綜上所述，ITP患者Th1、Th2、Treg、Th17細胞表達水平失衡，提示其在ITP發病中起重要作用，且與治療前后PLT的變化密切相關。通過測定T細胞亞群各細胞比例可以判斷疾病狀態，為ITP患者治療提供參考依據。