FoxP3+調節性T細胞與膽道癌患者預后相關性的Meta分析

張良慧，馬玲，杜海娜，黃陳軍，朱陵君

(1.南京醫科大學逸夫醫院 腫瘤科，江蘇 南京 211166； 2.南京醫科大學第一附屬醫院 腫瘤科，江蘇 南京 210029；3.南京市中醫院 腫瘤科，江蘇 南京 210000； 4.南京醫科大學第一附屬醫院 胸外科，江蘇 南京 210029)

膽道癌包括膽囊癌、肝外膽管癌和肝內膽管癌，是一種罕見的、預后極差的消化道惡性腫瘤。早期診斷率低、術后復發率高、化療后進展快都是其預后極差的重要原因[1]。臨床上，亟須探索新的預后標志物對膽道癌患者進行風險分類，以便對高危患者進行密切隨訪以及積極的化學或靶向治療。

1 資料和方法

1.1 檢索策略

1.2 納入及排除標準

納入標準：(1) 納入患者經組織病理學檢查明確診斷為膽道癌；(2) 研究中檢測的是腫瘤組織FoxP3+Tregs；(3) 報道了FoxP3+Tregs與總生存期(overall survival, OS)之間的關系；(4) 提供了足夠的數據計算HR和95%CI。排除標準：(1) 綜述、病例報告、信件、動物實驗類文獻；(2) 沒有報道FoxP3+Tregs與疾病的預后相關性；(3) 探究的是血液FoxP3+Tregs；(4) 研究的病例數少于20例。

本Meta分析已在PROSPERO注冊，編號為CRD42020213537。

1.3 數據提取與質量評估

1.4 統計學處理

2 結 果

2.1 文獻篩選流程

圖1 文獻篩選流程圖Fig 1 Flowchart of the study selection

2.2 納入研究的基本特征及質量評估

表1 納入研究的基本特征 Tab 1 Basic characteristics of all included studies in this Met analysis

表2 NOS質量評分 分Tab 2 Newcastle Ottawa quality assessment scale scores

2.3 Meta分析結果

10篇文獻均探討了腫瘤浸潤性FoxP3+Tregs與膽道癌患者OS的關系，I2檢驗結果提示各研究間存在一定的異質性(I2=64.9%，P=0.001)，故選擇隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，在膽道腫瘤中高FoxP3+Tregs浸潤的患者OS明顯縮短(HR=1.47，95%CI1.10～1.96)。見圖2。

圖2 FoxP3+ Tregs與膽道癌患者OS相關性的森林圖Fig 2 Forest plot of the HR for the association between FoxP3+ Tregs and OS in patients with BTC

2.4 亞組分析

表3 FoxP3+ Tregs與膽道癌患者OS的亞組分析結果Tab 3 Subgroup analysis of FoxP3+ Tregs and OS in patients with biliary tract cancer

CC.膽道癌；GBC.膽囊癌；ICC.肝內膽管癌；ECC.肝外膽管癌圖3 基于腫瘤亞型的亞組分析Fig 3 Subgroup analysis based on tumor subtypes

2.5 敏感性分析

逐一剔除每個研究后發現，Meta分析的結果并沒有改變，說明本研究的分析結果是穩定的(圖4)。

圖4 FoxP3+ Tregs與預后相關性的敏感性分析Fig 4 Sensitivity analysis of the association between FoxP3+ Tregs and patients’ prognosis

2.6 發表偏倚

對膽囊癌和膽管癌研究分別進行了發表偏倚檢驗，Begg’s檢驗(P值分別為0.494、0.079)和Egger’s檢驗(P值分別為0.806、0.260)結果表明，無論是膽囊癌還是膽管癌的研究均未發現有統計學意義的發表偏倚，但鑒于兩者的漏斗圖并不完全對稱(圖5a、b)，可能存在一定的發表偏倚。采用“剪補法”對兩個發表偏倚的森林圖進行修補，修補后合并的HR分別為1.485(95%CI1.177～1.873)和0.892(95%CI0.729～1.093)(圖5c、d)，HR合并的結果沒有質的變化。

a.FoxP3+ Tregs與膽囊癌患者預后關系的發表偏倚漏斗圖；b.FoxP3+ Tregs與膽管癌患者預后關系的發表偏倚漏斗圖；c.FoxP3+ Tregs與膽囊癌患者預后關系的剪補圖；d.FoxP3+ Tregs與膽管癌患者預后關系的剪補圖圖5 FoxP3+ Tregs與膽囊癌和膽管癌患者預后關系的發表偏倚漏斗圖和剪補圖a. funnel plot of FoxP3+ Tregs on survival in GBC; b. funnel plot of FoxP3+ Tregs on survival in CC; c. filled funnel plot of FoxP3+ Tregs on survival in GBC; d. filled funnel plot of FoxP3+ Tregs on survival in CCFig 5 Funnel plots and filled funnel plots for the publication bias of FoxP3+ Tregs on survival in patients with GBC and CC

3 討 論

膽道癌作為一種進展極快的腫瘤，目前臨床上的治療效果不理想，急需高度特異和敏感的生物標志物來評估預后并幫助臨床醫生選擇個體化的治療策略。但目前膽道癌仍依賴TNM分期判斷預后，缺乏可靠的分子標志物。腫瘤浸潤淋巴細胞的預后價值在越來越多的腫瘤中引起關注，除FoxP3+Tregs以外的其他細胞也值得進一步探究。將多種免疫細胞結合或與腫瘤浸潤炎癥細胞結合，共同建立預后模型是未來的研究趨勢，可能是對TNM分期預后體系的重要補充[3,14]。不過，在此之前須弄清每種腫瘤浸潤淋巴細胞的分布特征和臨床相關性，以及它們之間復雜的相互作用。

水平的FoxP3+Tregs往往伴有高水平的CD8+T細胞，提示FoxP3+Tregs對預后的積極影響可能與免疫抑制的負反饋機制有關[24]。FoxP3+Tregs對膽道癌患者的預后價值尚無定論，本研究結果表明其與膽道癌患者較差的OS相關，這與其免疫抑制作用一致。我們推斷，FoxP3+Tregs可促進膽道系統腫瘤免疫抑制性微環境的形成，增強腫瘤細胞的增殖和侵襲轉移能力，從而導致不良預后。

綜上，腫瘤浸潤性FoxP3+Tregs的高低與膽道癌患者的預后有關，可以作為膽道系統腫瘤的預后標志物。值得注意的是，高FoxP3+Tregs浸潤與膽囊癌患者的OS降低有關，與膽管癌患者的OS無關。未來需要更多的大樣本、多中心的臨床研究來明確FoxP3+Tregs對膽道癌患者預后的意義。