微柱凝膠技術在臨床交叉配血中的應用

張璐璐

（沈陽市骨科醫院承基醫院，遼寧 沈陽 110000）

輸血已經成為一種重要的疾病治療方法，特別是對于危重病患者。輸血治療可以最大程度地挽救患者的生命。因此，目前在各大醫院中，輸血需求的患者量不斷增加，同時輸血的安全性也得到了相關工作人員的廣泛關注。由于輸血是臨床治療中最為常見的一種治療方式，而在進行輸血之前必須為患者進行交叉配血檢測，以此判斷受血者是否能夠使用供血者的血液，從而降低發生溶血的風險概率。臨床中多使用聚凝胺法與微柱凝膠技術，對于配血的快速檢測具有重要價值[1]。不同交叉配血方式的效果不同，聚凝胺法的陽性檢出率高，耗時短，檢測速度快。微柱凝膠技術的操作簡單，具有可重復性，結果可以長期保存，誤差率較小，但是耗時較長。為此，本文針對我院2018年11月至2019年11月入院治療的患者血液樣本240例，探討在臨床交叉配血中采用微柱凝膠技術的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文的240例患者數據均選自入院治療的患者血液樣本，所選區間為2018年11月至2019年11月，按照抽簽法的方式將患者分為對照組（n=120）與試驗組（n=120）。對照組患者年齡為9～80歲，平均（49.59±6.56）歲；男性和女性患者各為67例和53例。試驗組患者年齡10～28歲，平均（49.61±6.29）歲，男性和女性患者各為63例和57例。對比兩組血液樣本的基本資料，組間并無差異，P＞0.05。所有患者均自愿簽訂知情同意書，且本次試驗已經通過沈陽市骨科醫院承基醫院倫理委員會審批。

1.2 方法

試劑與器械：使用臺灣貝索公司生產的離心機（型號：BA-SO2005-1型），長春博研公司產生的免疫微柱孵育器（型號：TYQ型），長春博研公司產生的血型血清學離心機（型號：TD-3A型）等儀器進行操作，流程均根據要求進行逐步操作。

對照組行聚凝胺法檢測，主要檢測方式為：①將供血者的1滴2%濃度紅細胞加入需要進行受血者的2滴血清內，標注為主側。②將供血者的2滴血清加入至受血者的2滴2%濃度的紅細胞中，標注為次側[2]。③其次，分別向主側與次側的管中加入0.6 mL的1號溶液與2滴2號溶液，然后以3 000 r/min的離心轉速進行1 min的處理，結束后吸掉上層的清液，再滴入2滴2號溶液進行搖勻。④若凝聚現象持續的時間長達1 min左右，即判定為陽性；若凝聚后散開的時間長達1 min，即判定為陰性[3]。

試驗組行微柱凝膠技術檢測，主要檢測方式為：①將受血者的血液樣本以離心1 500 r/min的轉速進行5 min的處理，同時多次進行供血者與受血者的紅細胞清洗，并調配成1%濃度的紅細胞懸液[4]。②在微柱孔內分別加入50 μL的受血者血清與供血者25 μL的1%濃度的紅細胞懸液，標注為主側。③其次，在微柱內加入供血者50 μL的血清與受血者25 μL的1%濃度的紅細胞懸液，標注為次側。④在37 ℃的溫度內孵育15 min，并以轉速為900 r/min進行2 min離心操作與轉速為1 500 r/min的3 min離心操作。⑤若凝膠的上層部分出現沉淀現象，則為陽性；若凝膠的底部位置出現沉淀現象，則為陰性[5]。

1.3 觀察指標 統計并對比兩組檢測方式的敏感程度、交叉配血的相容性、是否呈陽性現象，以及試驗檢測所需時間與血清容量。統計并比較凝膠胺法和微柱凝膠法的配血不相合因素。

1.4 統計學方法 將本次研究中的240例患者數據應用于SPSS 20.0進行軟件處理，計量資料滿足正態分布形式，用（）形式表示兩組檢測方式的檢測時間與血清容量，計數資料采用χ2檢驗，用[n（%）]表示兩組檢測方式的敏感程度與交叉配血相容，以及交叉配血陽性現象對比，進行χ2檢驗，組間對比若P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者檢測方式的敏感程度與交叉配血相容對比 對照組的敏感程度低于試驗組，而交叉配血相容概率高于試驗組，組間差異性具有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者檢測方式的敏感程度與交叉配血相容對比[n（%）]

2.2 兩組患者檢測方式交叉配血陽性現象對比 通過對比可知，試驗組檢測出陽性的樣本明顯高于對照組，組間具有差異（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者檢測方式交叉配血陽性現象對比[n（%）]

2.3 兩組患者檢測方式的檢測時間與血清容量對比 通過統計可知，對照組所需檢測時間為（11.85±2.53）min，而試驗組所需檢測時間為（32.19±2.28）min，組間具有差異（t=65.4223，P=0.0001）；此外，對照組所需血清容量為（102.36±1.67）μL，而試驗組所需血清容量為（26.48±1.86）μL，組間具有差異（t=332.5294，P=0.0001）。見表3。

表3 兩組患者檢測方式的檢測時間與血清容量對比（）

表3 兩組患者檢測方式的檢測時間與血清容量對比（）

2.4 統計并比較兩組患者凝膠胺法和微柱凝膠法的配血不相合因素 通過分析可知，白細胞增高、不規則抗體、自身抗體、標本影響、藥物影響、球蛋白增高均是導致配血不相合的主要因素。

3 討 論

輸血治療是臨床常見的治療方法，在手術、貧血、低血容量休克等患者中較為常見，可為患者及時補充血容量，維持正常的血氧供應。然而，由于血型差異、血液制品問題、輸血技術等因素，輸血反應較為常見，威脅著患者的安全。因此，有必要通過適當的方法準確識別及交叉配對血型，以減低輸血反應，確保輸血的安全。以往臨床上常用凝聚胺交叉配血法進行血型鑒定。盡管凝聚胺法可以檢測不完全抗體，但其靈敏度相對較低，易受操作者經驗的限制，影響交叉匹配結果的準確性和輸血的安全性。血液的配對不僅是ABO相應血型的配對，還需進行RH等其他類型的配合。通過匹配的血液進行輸血治療，可以幫助患者進行缺失血容量的及時補充，提高身體功能的供氧功能，及時對手術、貧血、低血容量休克等患者進行搶救。在臨床輸血治療之前，為了規避患者出現溶血性現象，常常需要進行相同血型間的交叉配血檢測。交叉配血是判斷能否進行輸血的重要方式，主要是將供血者的血清、紅細胞與受血者的血清、紅細胞進行融合，從血清與紅細胞的凝聚情況來觀察判斷。若受血者的紅細胞與供血者的紅細胞發生凝聚現象，必要情況下可以以慢速、少量的方式進行血液輸送[6]。

目前，臨床中進行交叉配血的方式主要有膠體介質配血方法、聚凝胺法、微柱凝膠技術、鹽水法、抗球蛋白法等。其中，聚凝胺法與微柱凝膠技術是最為常用的交叉配血方式。聚凝胺法因快捷方便，能夠在短時間內篩選出無規則的抗體，因此常被用于急診中的緊急性配血檢測中。其主要是通過低離子介質對細胞的抗原抗體進行致敏作用，使得紅細胞之間生成靜電力，再利用自身所攜帶的正電荷分子聚合物，拉近細胞之間的間距，生成凝聚現象。通過假性凝聚清理液，將非特異型的凝聚進行消除處理，保障具有抗原抗體的特異型凝聚不產生任何影響。但該檢測方式，需通過顯微鏡進行詳細觀察，且容易受到藥物、肝素等影響，從而導致結果容易出現誤差[7]。

微柱凝膠技術作為一項新型的檢測方式，因具有優良的敏感度、方便快捷的操作、高精確度、可重復性利用等特點，被廣泛應用于交叉配血、抗體篩選、血型檢測中。其融合了離心技術、凝膠過濾技術、抗原抗體反應的眾多技術的優良特點，能夠在抗原抗體發生反應的時候，具有IgG類型的抗體致敏作用的紅細胞，能通過抗人球蛋白進行特異型的凝聚，而在離心處理后可以分離游離性的紅細胞與凝聚性的紅細胞[8]。對于需要大量進行輸血的患者，或者大批量進行樣本配血檢測來說，該檢測技術操作快捷方便，且影響因素也較少，結果精確度高且穩定。此外，該檢測方式具有較高的敏感度，檢測可實現標準化、自動化，能精準提高不規則抗體檢測的有效性與安全性，進一步為輸血提供了有效保障。但該檢測方式因離心處理時間長，無法短時間內進行判斷檢測，因此不宜用于急診中的交叉配血檢測[9]。微柱凝膠技術解決了紅細胞血型血清學臨床檢測中長期存在的問題。抗人球蛋白測試是在微柱凝膠培養基中進行的，不需要清洗，也不需要確認陰性結果，測試過程簡單。如鹽水試管血球凝集測試，可常規用于臨床樣本測試，混合血液樣本中是否存在其他人的紅細胞，如患者輸血或骨髓移植后的血液，或人類紅細胞嵌合血型等，都可以簡單準確地確定血型表型。

微柱凝膠技術是基于凝膠微柱分子層析原理，較小的紅細胞首先通過凝膠間隙與不規則抗體結合完成血型鑒定。微柱凝膠技術可以提高紅細胞結合不規則抗體的靈敏度，提高血型鑒定的陽性和陰性分型符合率，進而提高檢測結果的準確性。與凝聚胺法相比，微柱凝膠法能提高血液檢測的靈敏度，不規則抗體檢測陽性率高于微柱凝膠法，主要原因是它能消除冷凝集的干擾，為保證輸血的安全性。凝聚胺法雖然可以快速檢測出不完全抗體，但是冷凝血樣本存在假陽性，導致醫師判斷失誤，從而延長了交叉配血的時間，給交叉配血帶來一定的困難，延長了搶救時間。凝聚胺法是臨床交叉配血常用的方法，可以快速檢測出血液配血結果，但操作步驟繁多，具有復雜性。凝聚胺溶液會釋放大量陽性電荷，導致紅細胞出現非特異性凝集，臨床上通過滴加枸櫞酸鈉后，對凝集是否分散進行觀察，以判斷血型匹配結果。凝聚胺法的交叉配血結果會受到多種藥物、肝素的影響，使凝集的紅細胞分散，出現假陽性檢測結果，影響診斷。微柱凝膠免疫分析技術不受低濃度抗體和藥物的影響，操作簡便，可減少樣品污染，具有較高的安全性和準確性。

通過本次試驗對比可知，試驗組具有較高的敏感度，且交叉配血相容概率低于對照組，組間具有明顯的可比性（P＜0.05）；此外，試驗組的交叉配血呈陽性的概率也顯著高于對照組，也證明了其具有較高的精準性，組間具有差異（P＜0.05）；而在交叉配血檢測過程中，雖然檢測操作的時間較長，但所需的血清容量僅為對照組的1/4，組間具有顯著性（P＜0.05）。該結論與豐強[10]學者在《凝聚胺法與微柱凝膠法交叉配血陽性結果研究》一文中取得的結果一致，其將2 000例無償獻血者的供血樣本作為研究對象，按照《輸血技術學》及產品說明書中的操作流程進行試驗操作，急診進行凝聚胺法配血，其他配血類型則采用微柱凝膠法，記錄并比較凝聚胺法與微柱凝膠法進行交叉配血呈陽性的結果。通過對比可知，凝聚胺法檢測中，總陽性有50.00%，主側陽性25.00%，次側陽性43.00%，假陽性23.00%；微柱凝膠法檢測中，總陽性有90.00%，主側陽性38.00%，次側陽性78.00%，假陽性34.00%，兩組之間具有明顯的可比性（χ2=38.1000，P=0.0001）；而凝聚胺法操作耗時（12.09±2.11）min，微柱凝膠法操作耗時（32.22±2.31）min，組間具有明顯差異（P＜0.05）。該數據也再次證明了，微柱凝膠法雖檢測的耗時較長，不宜用于急診交叉配血中，但其具有較高的敏感度與精確性[11]，方便又快捷，對于交叉配血的檢測具有重要作用。

綜上所述，交叉配血檢測中應用微柱凝膠技術，可以快速、便捷地進行交叉配血，短時間內通過少量的血清容量即可有效提高配血的精準度，值得廣泛推廣與應用。