鞣花酸對腸道上皮細胞凋亡及相關蛋白Bcl-2、Bax、cle-Caspase-3表達的影響

歐正陽，鄭進萍，李若南，徐 睿，謝懷能，俞道進

(福建農林大學 動物科學學院(蜂學學院)，福建 福州 350002)

鞣花酸(Ellagic acid，EA)是一種廣泛存在于植物中的天然多酚。已有大量文獻報道EA在清除自由基、抗突變、抗腫瘤、抗衰老以及抗氧化等方面有突出作用。EA對腸道上皮細胞的保護具有顯著作用，可以維持腸道的生理狀態，保護消化功能，促進腸道內容物中營養物質的吸收，防止腸道中的致病菌在腸道上皮細胞中定殖。EA是親營養素的一種，其最大優點是它們不影響腸道菌群，并且沒有停藥期。雖然關于EA的功能和作用上的研究眾多，但是關于EA對于IPEC-J2凋亡方面的研究還未見報道。

Bcl-2和Bax都是Bcl-2家族的成員，Bcl-2具有抑制凋亡的作用，而Bax具有促進凋亡的作用。Caspase-3是細胞凋亡的啟動關鍵酶，Bcl-2通過抑制pro-Caspase-3激活成為cle-Caspase-3，起到抑制凋亡的作用，同時cle-Caspase-3的激活量受到Bcl-2/Bax比率的影響。本試驗檢測EA對正常細胞生長的影響，采用四甲基偶氮鹽(MTT)法，流式細胞儀測定IPEC-J2細胞凋亡率，ELISA法檢測Bcl-2、Bax和cle-Caspase-3的表達情況。本研究通過探討EA對細胞Bcl-2，Bax，cle-Caspase-3的表達量與細胞的抗凋亡能力之間的關系，進一步了解關于EA抑制細胞凋亡的機制，為今后更好開發和利用EA提供基礎。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

ELISA試劑盒、EA(用0.01 μg/mL NaOH溶液現配現用)，購自北京索萊寶科技有限公司；細胞凋亡檢測試劑盒、RIPA(中)細胞裂解液(含抑制劑)，均購于江蘇凱基生物技術股份有限公司；胰蛋白酶、胎牛血清(FCS)、DMEM/F12培養基，均購自HyClone公司；IPEC-J2，購自廣州吉妮歐生物科技有限公司；二甲基亞礬，購自Amersco公司。……