達州市家禽高致病性禽流感免疫抗體檢測及分析
——以2021年為例

張蕾 徐倚天 劉俐君 趙小波 楊青 李清竹 李成 高嵩 黎丁箕

(達州市動物疫病預防控制中心，四川 達州 635000)

禽流感(Avian influenza，AI)是由A型流感病毒引起的多種禽類易感的傳染病。禽流感病毒(Avian Influenza Virus，AIV)根據血凝素(HA)抗原性的不同可分為H1～H18亞型，其中由H5和H7亞型毒株引起的稱之為高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza，HPAI)，病死率可達100%，被世界動物衛生組織(OIE)列為須報告動物疫病[1]，被我國列為優先防控和重點防范的一類動物疫病[2]，并采取強制免疫的預防措施。1997年香港首次出現禽流感感染人并致人死亡的事件[3]，此后AIV感染人的事件時有發生，表明AIV除了可以感染禽類，還可以跨越種間屏障對人類的生命安全造成威脅[2]。近年來，HPAI病毒毒株變異加快，疫情形勢嚴峻復雜[4]，四川省境內也有報道發生高致病性禽流感疫情[5]，嚴重威脅著達州市養禽業。為及時掌握達州市家禽高致病性禽流感免疫效果，達州市動物疫病預防控制中心隨機采集了全市124個場點的1316份雞血清和480份水禽(鴨、鵝)血清進行高致病性禽流感免疫抗體監測，為科學防控達州市高致病性禽流感提供可靠依據。

1 材料與方法

1.1 樣本

收集2021年來自達州市124個場點(包括規模場、散養戶、市場)的1796份家禽血清，其中雞血清1316份，水禽血清480份。

1.2 主要試劑

禽流感病毒H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)以及H7(Re3株)亞型血凝抑制試驗抗原，均來自哈爾濱國生生物科技有限公司。

1%雞紅細胞懸液，無菌采集3只無禽流感抗體的健康公雞心臟血，與等體積阿氏液混勻后按常規方法制備。

1.3 檢測方法

參照《高致病性禽流感診斷技術》(GB/T 18936-2020)中的血凝試驗和血凝抑制試驗(HA-HI試驗)進行操作。

1.4 結果判定

根據《國家動物疫病監測與流行病學調查計劃(2021—2025年)》要求，免疫合格個體的判定標準為抗體滴度≥24，免疫合格群體的判定標準為免疫合格個體數量占群體總數的70%(含)以上。

2 結果

2.1 不同毒株HPAI免疫抗體檢測結果

2021年，全市共檢測場點124個，3種毒株免疫抗體均合格的場點105個，合格比例為84.68%，其中H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)、H7亞型(Re3株)免疫合格場點的比例分別為86.29%、93.55%、97.58%。共檢測血清1796份，H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)、H7亞型(Re3株)免疫抗體合格率分別為91.09%、94.82%、97.55%。3種毒株的免疫合格場點比例和免疫合格率均為H7亞型(Re3株)最高，H5亞型(Re-12株)次之，H5亞型(Re-11株)最低。

2.2 不同場點類型HPAI免疫抗體檢測結果

由表1可知，規模場、散養戶、市場分別檢測場點54個、47個、23個，免疫合格場點的比例分別為88.89%、76.60%、91.30%，其中H5亞型(Re-11株)免疫合格場點的比例分別為88.89%、80.85%、91.30%，H5亞型(Re-12株)免疫合格場點的比例分別為94.44%、89.36%、100%，H7亞型(Re3株)免疫合格場點的比例分別為98.15%、95.74%、100%。由表2可知，規模場、散養戶、市場分別檢測血清樣品1100份、531份、165份，其中H5亞型(Re-11株)免疫抗體合格率分別為91.55%、89.27%、93.94%，H5亞型(Re-12株)免疫抗體合格率分別為95.09%、93.79%、96.36%，H7亞型(Re3株)免疫抗體合格率分別為98.00%、96.42%、98.18%。

表1 不同場點類型HPAI免疫抗體合格場點比例

表2 不同場點類型HPAI免疫抗體合格率

3種毒株的免疫合格場點比例和免疫合格率從高到低均為市場、規模場、散養戶。而相同場點類型的免疫合格場點比例最低的均為H5亞型(Re-11株)，免疫抗體合格率從高到低均為H7亞型(Re3株)、H5亞型(Re-12株)、H5亞型(Re-11株)。

2.3 不同動物種類HPAI免疫抗體檢測結果

由表3可知，雞、水禽分別檢測場點86個、38個，免疫合格場點的比例分別為87.21%、78.95%，其中H5亞型(Re-11株)免疫合格場點的比例分別為88.37%、81.58%，H5亞型(Re-12株)免疫合格場點的比例分別為95.35%、89.47%，H7亞型(Re3株)免疫合格場點的比例分別為97.67%、97.37%。由表4可知，雞、水禽分別檢測血清樣品1316份、480份，其中H5亞型(Re-11株)免疫抗體合格率分別為92.10%、88.83%；H5亞型(Re-12株)免疫抗體合格率分別為95.52%、92.92%；H7亞型(Re3株)免疫抗體合格率分別為97.95%、96.46%。

表3 不同動物種類HPAI免疫抗體合格場點比例

表4 不同動物種類HPAI免疫抗體合格率

3種毒株的免疫合格場點比例和免疫合格率均為雞高于水禽，相同動物種類的免疫合格場點比例和個體合格率從高到低均為H7亞型(Re3株)、H5亞型(Re-12株)、H5亞型(Re-11株)。

3 討論

目前，我國尚未有治療禽流感的特效藥物[6]，因此，禽流感的預防環節顯得尤為重要。做好家禽免疫是防控禽流感最有效的措施，而反映免疫情況的重要依據是抗體檢測[5]。因禽流感主要流行毒株發生變化，2021年達州市開始使用重組禽流感病毒(H5加H7)三價滅活疫苗(H5N1 Re-11株加Re-12株，H7N9-Re3株)疫苗進行免疫。本次研究從檢測總體結果上看，達州市高致病性禽流感H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)和H7亞型(Re3株)免疫合格場點比例均超過85%，免疫抗體合格率均在90%以上，表明2021年達州市高致病性禽流感總體上已建立較好的免疫保護屏障。

從毒株上來看，高致病性禽流感免疫合格場點比例和免疫抗體合格率均為H7亞型(Re3株)最高，H5亞型(Re-12株)次之，H5亞型(Re-11株)最低。這可能與不同疫苗毒株有不同的免疫原性有關[7]。

從場點類型上看，無論是免疫合格場點比例還是免疫抗體合格率，都是市場最高，規模場次之，散養戶最低。造成此現象的原因可能是規模場生物安全意識較高，飼養管理規范，專業技術水平較高，大多數堅持程序化免疫[4]，而農村散養戶的防疫意識還相對較為淡薄，飼養管理水平欠缺，不能按規定的日計劃免疫等[8]。

從動物種類上看，雞的免疫抗體水平高于水禽，這可能是由于養殖戶對水禽的重視免疫程度不夠強[5]、水禽本身對禽流感疫苗的免疫應答反應性稍低等原因造成[9]，也有可能是水禽體內含有一些非特異性凝集因子，對雞紅細胞有非特異性凝集的作用，導致檢測結果偏低[10]。

4 建議

達州市家禽高致病性禽流感整體免疫效果良好，但有個別場點免疫抗體不達標，存在零星散發禽流感疫情的風險。在今后的高致病性禽流感防控工作中，重點關注水禽、散養戶的免疫和抗體水平監測，對群體免疫不達標場點要及時加免和補免，強化免疫屏障；加大高致病性禽流感防控的宣傳培訓和技術指導，增強防疫意識，提升生物安全管理水平；增加水網密集地、活禽販運戶、活禽宰殺點等重點區域HPAI的監測頻次和數量，進一步擴大風險監測點。同時，達州市處在候鳥遷徙線路的輻射范圍內，野生鳥類資源豐富，作為禽流感病毒的天然儲存庫，野生鳥類在禽流感防控中的地位不容小覷[11]，要重視養殖場內防鳥設施的配備，加強野鳥棲息地等鳥類的監測力度[12]，有效降低疫情發生風險。