溶劑吸收-GC/MS 聯用測定蔬菜中二硫代氨基甲酸酯類殺菌劑

馬淑青，代飛飛

(濰坊市疾病預防控制中心，山東濰坊 261061)

二硫代氨基甲酸酯（Dithiocarbamates，簡稱DTCs）是一類有機硫殺菌劑，主要包括福美鋅、福美雙、代森聯、丙森鋅和代森錳鋅等，該類殺菌劑不易誘發病原物抗性，而且具有廣譜、高效、低毒的特點，被廣泛用于防治水果、蔬菜、谷物等的真菌性植物病害[1-2]。DTCs 無明顯的神經毒性，但其降解產物二硫化碳（CS2）是神經毒素，對環境和人體均有很大的潛在危害[3]。目前，DTCs 殘留的檢測主要采用氣相色譜法，該方法僅僅依靠保留時間定性，容易出現假陽性，且儀器的靈敏度不高，前處理復雜[4-5]。本文采用氣相色譜-質譜法檢測DTCs，特異性強，且大大降低了最低檢出限。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

蔬菜樣品從濰坊市各縣市區的超市、農貿市場、集市和路邊攤位購買獲得。

1.2 儀器與試劑

Trace 1300 氣相色譜儀、ISQ 單四極桿質譜儀配有EI+源、AS1300 自動進樣器（美國Thermo Fisher公司）；Xcalibur 操作軟件；海道夫多試管振蕩器（德國海道夫）；電熱恒溫水浴鍋；電子分析天平；離心機（賽默飛）；均質器。

正 己 烷（ 農 殘 級， 德 國Merk 公 司， 批 號43878091）；乙腈（農殘級，美國Fisher 公司，批號Lot 130790）；鹽酸（優級純，批號20140303）；氯化亞錫（優級純）；Milli-Q 超純水；二硫化碳標準品（100 μg/mL，壇墨質檢）。

1.3 試驗方法

1.3.1 分析條件

色譜條件：采用弱極性色譜柱TG-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm，美國Thermo 公司）；進樣口溫度200 ℃；分流比10 ∶1；程序升溫：初溫45 ℃保持1 min 后，以40 ℃/min 升至130 ℃，以12 ℃/min升至180 ℃，以7 ℃/min 升至240 ℃，以12 ℃/min升至320 ℃，保持5 min。在此色譜條件下，溶劑峰保留時間位于目標峰之后，為防止大量溶劑進入質譜，在目標峰出完后應立即關閉燈絲并結束質譜采集。

質譜條件：EI+方式離子化；標準電子能量為70 eV；質譜掃描范圍為35 ～350 amu；單離子檢測掃描（Single Ion Monitoring，SIM）模式和SCAN 模式檢測；離子源溫度為270 ℃；傳輸線溫度為280 ℃。

1.3.2 樣品的前處理

稱取10 g 試樣（精確至0.001 g）于50 mL 頂空瓶中，加入20 mL 3%氯化亞錫-鹽酸溶液，使用壓蓋器迅速將瓶口用聚四氟乙烯/硅橡膠密封墊和密封鋁蓋密封，放入80 ℃水浴中反應2 h，用冰水浴冷卻至4 ℃左右，用注射器準確加入5 mL 正己烷，振搖萃取3 min，3 000 r/min 離心3 min，取上層清液用GC/MS 檢測。

1.3.3 標準曲線的繪制

以CS2的濃度為橫坐標，CS2的峰面積為縱坐標繪制標準曲線，以低濃度0.02 ～0.50 mg/L 繪制一條標準曲線，高濃度0.5 ～10.0 mg/L 繪制另一條標準曲線。低濃度系列設置0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.10 mg/L 和0.50 mg/L 4 個點，高濃度系列設置0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.5 mg/L、5.0 mg/L和10.0 mg/L 5個點。

2 結果與分析

2.1 色譜柱的選擇

本研究比較了DB-5MS、HP-5MS、TG-5MS 3種弱極性色譜柱的分離效果，TG-5MS 色譜柱目標峰型及分離度均優于DB-5MS 和HP-5MS，故本研究最終采用TG-5MS 柱對目標物進行分離，目標化合物的分離效果，見圖1。

圖1 DTCs 的選擇離子掃描（SIM）色譜圖

2.2 質譜條件及標準曲線

對濃度為10 μg/mL 的二硫化碳標準溶液進行全掃描，掃描離子范圍為35 ～350m/z，將離子峰最高的子離子作為定量離子，次高的兩個子離子作為定性離子，以峰面積對其濃度作線性回歸分析。

優化后，保留時間為5.20 min，選擇子離子m/z76 為定量離子，子離子m/z44 和m/z78 為定性離子，檢出限為0.006 mg/kg，SC2高濃度和低濃度標準系列的具體工作曲線見圖2，相關系數均大于0.998。

圖2 SC2 低、高濃度回歸曲線圖

2.3 準確度和精密度試驗

稱取10.0 g 空白蔬菜樣品3 份，分別添加3 個水平濃度的標準溶液，按1.3.2 處理樣品后，上機測定，每個濃度水平平行測定6 次，計算加標回收率與RSD，結果見表1。由表1 可知，目標物在3 個水平上的平均加標回收率為84.0%～93.4%，RSD 為4.5%～10.8%，符合殘留分析的要求。

表1 回收率和精密度驗結果（n=6）

2.4 蔬菜DTCs 殘留情況

用建立的方法檢測各類蔬菜樣本106 份，檢出有DTCs 殘留的樣本22 份，檢出率為20.8%，檢出樣本的濃度在0.013 ～0.883 mg/kg。各類樣本的檢出率分別為白菜（12.5%）、辣椒（20.0%）、豇豆（21.1%）、芹菜（16.7%）、青蘿卜（30.0%）、西紅柿（23.1%）和韭菜（26.7%）。各類蔬菜樣本數及其檢出濃度范圍見表2。

表2 不同蔬菜樣本DTCs 檢測結果

3 結論

本文建立的通過氣相色譜-質譜法測定蔬菜中DTCs 的方法，簡便、快速，具有較高的準確度與精密度，凈化效果好，回收率高，用該法檢測蔬菜中的二硫代氨基甲酸酯類殺菌劑可取得理想的效果。