活動期慢性化膿性中耳炎病原菌分布及藥物敏感性分析

鄧華，祝曉宇，孫川惠，楊莎莎，曹慶新，趙成彥，周艷，任佳麗

貴州中醫藥大學第一附屬醫院耳鼻咽喉科，貴州貴陽 550001

慢性化膿性中耳炎是耳鼻咽喉科的常見疾病，病程長， 容易反復感染， 甚至引起嚴重的顱內并發癥。慢性化膿性中耳炎可以分為靜止期、活動期[1]，活動期慢性化膿性中耳炎需要積極采取抗感染治療，隨著臨床上抗菌藥物的廣泛運用， 復雜多樣的病原菌對藥物的敏感性表現出明顯差異，因此，分析活動期慢性化膿性中耳炎的病原菌分布及藥物敏感情況，對于臨床合理使用抗菌藥物具有重要意義。回顧性收集2019 年8 月—2021 年5 月在該院住院治療的64 例具有病原學檢查結果的活動期慢性化膿性中耳炎患者的臨床資料， 分析其病原菌分布及藥敏試驗結果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧分析在該院住院治療確診為活動期慢性化膿性中耳炎的患者64 例臨床資料。其中男24 例，女40 例；年齡 9～82 歲，平均（50.59±17.83）歲；其中左耳 36 例，右耳 24 例，雙耳 4 例；病程 2～60 年，平均（15.02±11.55）年。 所有入選患者在采集病原學標本前48 h 未使用任何抗菌藥物。 該研究經貴州中醫藥大學第一附屬醫院倫理委員會審查通過 （倫理審查批件號：K2021-012）。

1.2 方法

1.2.1 病原學標本采集 75%乙醇棉球消毒患耳耳郭及外耳道口，在耳內鏡直視下，用0.9%氯化鈉注射液浸潤的滅菌拭子經外耳道口伸入患耳外耳道深部，沾取外耳道深部的分泌物，隨后將已經取樣的拭子置入滅菌試管妥善封存，并立即送檢。

1.2.2 病原菌鑒定及藥敏試驗 嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》[2]進行外耳道分泌物標本的接種培養，菌株鑒定分型采用全自動微生物分析系統（法國生物梅里埃公司），紙片法進行病原菌藥物敏感性試驗， 藥敏試驗結果的判讀參照美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）藥敏試驗判斷標準[3]。質控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、表皮葡萄球菌ATCC12453、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.3 統計方法

采用R 統計學軟件進行數據分析，采用描述性統計處理。

2 結果

2.1 病原菌種類及構成比

64 例（68 耳）患者共68 份患耳外耳道分泌物標本進行病原菌培養，有64 份分泌物標本培養出病原菌，病原菌檢出率為94.12%。 64 例患者經病原學檢查發現復合感染病例有7 例， 其中5 例患者分泌物標本同時檢出2 種病原菌，2 例患者分泌物標本同時檢出3 種病原菌。 送檢的分泌物標本檢出病原菌共計73 株，其中革蘭陽性菌 39 株（占53.40%），革蘭陰性菌 27 株（占 37.00%），真菌 7 株（占 9.60%）。革蘭陽性菌主要為金黃色葡萄球菌， 其次為表皮葡萄球菌、 溶血葡萄球菌。 革蘭陰性菌主要為變形桿菌、大腸埃希菌。 真菌主要是釀酒酵母菌、光滑念珠菌。 見表 1。

表1 病原菌分布及構成比Table 1 Distribution and composition ratio of pathogens

2.2 革蘭陽性菌藥敏試驗分析

該組病例檢出的革蘭陽性菌菌株對紅霉素、青霉素、克林霉素均耐藥，對萬古霉素、利福平、呋喃妥因的藥物敏感性較高。 其中金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率達90.9%，對青霉素耐藥率為81.8%。 金黃色葡萄球菌對苯唑西林、萬古霉素、利福平均敏感，對復方磺胺、環丙沙星、呋喃妥因的敏感性較高。表皮葡萄球菌對青霉素耐藥率高達100.0%，對苯唑西林、紅霉素、克林霉素的耐藥率達75.0%。表皮葡萄球菌對萬古霉素、利福平、利奈唑烷、呋喃妥因的敏感性較高。 其他革蘭陽性菌對紅霉素的耐藥率達到90.0%，對克林霉素耐藥率為70.0%， 對青霉素的耐藥率為75.0%。其他革蘭陽性菌對萬古霉素、利福平、慶大霉素、利奈唑烷、呋喃妥因的藥物敏感性較高。 見表2。

表2 革蘭陽性菌藥物敏感性分析[n%]Table 2 Drug sensitivity analysis of gram-positive bacteria[n%]

2.3 革蘭陰性菌藥敏試驗分析

該組病例檢出的革蘭陰性菌菌株對四環素、氨芐西林耐藥率高，對阿米卡星、頭孢他啶、亞胺培南的藥物敏感性較高。 其中變形桿菌對四環素和多粘菌素的耐藥率高達100.0%，對氨芐西林耐藥率為87.5%。變形桿菌對阿米卡星、頭孢他啶、氨曲南、美羅培南、頭孢吡肟均敏感，對環丙沙星、左氧氟沙星、阿莫西林鈉克拉維酸鉀、派拉西林、頭孢噻肟、亞胺培南的敏感性較高。 大腸埃希菌對四環素耐藥率高達100.0%，對氨芐西林的耐藥率達80.0%。大腸埃希菌對阿米卡星、亞胺培南敏感，對頭孢他啶、氨曲南、頭孢吡肟的敏感性較高。 其他革蘭陰性菌對氨芐西林和美羅培南的耐藥率達85.7%，對多粘菌素、阿莫西林鈉克拉維酸鉀、氯霉素的耐藥率>60%。 其他革蘭陰性菌對慶大霉素、左氧氟沙星、阿米卡星、頭孢他啶、頭孢吡肟、頭孢噻肟、亞胺培南的藥物敏感性較高。 見表 3。

表3 革蘭陰性菌藥物敏感性分析[n(%)]Table 3 Drug sensitivity analysis of gram-negative bacteria[n(%)]

2.4 真菌

該組病例檢出的真菌對氟胞嘧啶、伏立康唑、兩性霉素B、酮康唑、制霉菌素、氟康唑、咪康唑的藥物敏感性較高。 釀酒酵母菌對米卡芬凈的耐藥率高達100.0%， 光滑念珠菌對特比萘芬的耐藥率高達100.0%。 見表 4。

表4 真菌藥物敏感性分析[n(%)]Table 4 Analysis of fungal drug sensitivity[n(%)]

3 討論

耳科醫生、 兒科醫生和全科醫生接診的患者之中，慢性化膿性中耳炎是最常見的疾病之一[4]。 慢性化膿性中耳炎具有病程長， 病情容易反復發作等特點，影響患者生活質量，并造成聽覺功能損害[5]，甚至會導致嚴重的顱內并發癥，威脅患者生命[6]。 靜止期慢性化膿性中耳炎一般病情穩定， 活動期慢性化膿性中耳炎有持續性流膿癥狀[1]。常見的致病微生物中，革蘭陽性細菌和革蘭陰性細菌都是導致中耳感染的病原菌[3，7]。近年來，在慢性化膿性中耳炎患者中耳分泌物培養中發現，真菌感染病例有逐漸增加的趨勢，可能與抗菌藥物的使用及患者所在地域有關[8]。文獻報道國內病原菌檢出率為（79.88±18.51）%，革蘭陽性菌為 （57.58±7.81）%， 革蘭陰性菌為 （37.39±4.38）%，致病菌以金葡菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌為主，占比71%~75%[8]。 國外有研究表明， 慢性化膿性中耳炎的主要病原菌是革蘭陰性菌，其中以銅綠假單胞菌、變形桿菌多見，其次是金黃色葡萄球菌[7，9]。 國內與國外的主要病原菌構成比有很大差異，考慮與地域、種族、抗菌藥物使用等多方面因素有關。

該組研究發現，活動期慢性化膿性中耳炎外耳道分泌物標本檢出的病原菌主要是革蘭陽性菌（53.4%）， 與本地區和國內其他地區的其他研究結果一致[8-11]。 革蘭陽性菌主要為金黃色葡萄球菌，其次為表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌。 該組研究革蘭陰性菌檢出率與國內其他報道有明顯差異，易虹[12]、郝春艷等[13]報道檢出的革蘭陰性菌主要檢出銅綠假單胞菌， 而該組研究中， 檢出的革蘭陰性菌（37.00%）主要為變形桿菌、大腸埃希菌，考慮與地域因素有關。真菌檢出率為9.60%，考慮與抗菌藥物使用及本地區潮濕溫暖有關。 此外，慢性化膿性中耳炎可以是多種病原菌的復合感染，一方面耳內微生態環境的變化導致病原菌發生改變，另一方面是病原菌自身耐藥性增強， 引起病原菌組成發生，在多因素的影響下，導致慢性化膿性中耳炎出現多種病原菌混合感染[14-15]，在該組研究也發現了部分病例存在復合感染的情況。

該組研究檢出的革蘭陽性菌對紅霉素、青霉素、克林霉素均不敏感， 與國內其他地區報道革蘭陽性菌耐藥情況的結果一致[16-17]。 革蘭陰性菌對四環素、氨芐西林耐藥。該組病例檢出的真菌對米卡芬凈、特比萘芬耐藥。 臨床不宜將這些不敏感的抗菌藥物作為治療慢性化膿性中耳炎的首選。

該組研究發現， 革蘭陽性菌對萬古霉素、 利福平、呋喃妥因的藥物敏感性較高。革蘭陰性菌對阿米卡星、亞胺培南、頭孢他啶藥物敏感，與國外的研究接近[9]。該組病例檢出的真菌對氟胞嘧啶、伏立康唑、兩性霉素B、酮康唑、制霉菌素、氟康唑、咪康唑的藥物均敏感。

綜上所述，在臨床治療慢性化膿性中耳炎時，可以選用上述敏感的抗菌藥物進行治療。 在進行治療之前， 務必采集病原學標本進行細菌培養及藥敏試驗，在治療過程中，密切觀察患者的病情變化，及時根據藥敏試驗結果合理選擇抗菌藥物。