馬齒莧用于中藥藥理學(xué)實踐教學(xué)探討

李蓉　朱疆　付匿

關(guān)鍵詞：馬齒莧;離體心臟;心肌收縮力;實踐教學(xué)

馬齒莧（Portulaca oleracea L.）別名爪子菜、長命菜、豆瓣菜等，分布于云南全省，多生于潮濕雜草地、荒地、田邊、路邊[1]，含有多種化學(xué)成分，主要有生物堿類、萜類、香豆素類、黃酮類、有機(jī)酸類等成分，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抑菌、降血糖、降血脂、抗腫瘤、抗氧化等作用[2]。李蓉等[3]研究發(fā)現(xiàn)，馬齒莧對正常離體心臟和離體衰竭心臟的心肌收縮力均有明確的增強(qiáng)作用。本課題主要在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究馬齒莧對離體心臟的作用，以獲得最適宜的給藥濃度與劑量，用于楚雄醫(yī)藥高等專科學(xué)校中藥專業(yè)中藥藥理學(xué)的實踐教學(xué)，以不斷完善、推廣運用于更多的醫(yī)學(xué)院校，解決長期以來教材中的實踐教學(xué)內(nèi)容相對較少的問題，從而實現(xiàn)更好地培養(yǎng)學(xué)生實踐能力、創(chuàng)新能力和動手能力的教學(xué)目的。

1實驗材料

1.1實驗動物

健康牛蛙60只，雌雄不限，體重（250±50）g，購于當(dāng)?shù)厮a(chǎn)品市場，并由楚雄醫(yī)藥高等專科學(xué)校生物學(xué)教師鑒定為健康合格牛蛙，課題組成員均已參加云南省實驗動物從業(yè)人員專業(yè)培訓(xùn)，并獲得實驗動物研究資格，整個實驗過程符合實驗動物倫理學(xué)規(guī)范。

1.2藥物與試劑

馬齒莧全草，采于云南省楚雄醫(yī)專校園周邊，經(jīng)該校中藥鑒定室鑒定為中藥材馬齒莧;任氏液;純化水。

1.3主要儀器

數(shù)顯式鼓風(fēng)干燥箱（101A-3，上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司）;計算機(jī)（啟天B4550-B031，聯(lián)想有限公司）;電子天平（ScoutSE型，奧豪斯儀器有限公司）;多功能紅外爐（MC-HI8SO11，中山市家福來電器有限公司）;肌張力傳感器、生物機(jī)能實驗系統(tǒng)（BL-420S，成都泰盟公司）;中藥保健壺（JK-23，廣東時珍電器有限公司）;恒溫水浴鍋（HWS-28，上海一恒）;蛙心夾、蛙心套管（成都泰盟公司）。

2實驗方法

2.1藥物制備

2.1.1 5種馬齒莧水煎液的配制（按實驗小組自行制備）

由老師帶隊組織學(xué)生參與新鮮馬齒莧的采摘，每小組1～2名學(xué)生，采摘后取全草，洗凈烘干后，剪成小段，稱取5g，加適量純化水浸泡約30min，大火煎煮至沸騰后，改為小火繼續(xù)煎煮30min，過濾，藥渣再加適量純化水煎煮15min，過濾。合并兩次過濾液，于水浴上濃縮配制成50.0mL，冷卻后置于冰箱冷藏保存，用純化水稀釋成0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6%5種馬齒莧溶液。

2.1.2任氏液的配制

按參考文獻(xiàn)[4]的配方配制任氏液。配方：NaCl 6.50g/L，KCl 0.14g/L，NaHCO 0.20g/L，NaHPO0.01g/L，葡萄糖2.00g/L，CaCl0.12g/L。

2.2不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)馬齒莧對離體蛙心心肌收縮力的影響

取60只牛蛙，隨機(jī)分為對照組、0.1%馬齒莧組、0.2%馬齒莧組、0.4%馬齒莧組、0.8%馬齒莧組、1.6%馬齒莧組，每組10只。所有牛蛙均用脊髓破壞針從枕骨大孔處插入破壞蛙的腦和脊髓，用斯氏（Straub）離體蛙心法[4]制備離體蛙心標(biāo)本后，向蛙心套管內(nèi)灌注0.5mL任氏液，再用蛙心夾夾住心尖，連接在生物機(jī)能實驗系統(tǒng)的張力傳感器上并調(diào)整好拉力，即可打開計算機(jī)和機(jī)能實驗系統(tǒng)，記錄蛙心的正常收縮張力曲線，待心臟收縮活動穩(wěn)定后，向?qū)φ战M蛙心套管內(nèi)再灌注0.2mL任氏液，觀察并記錄蛙心收縮變化曲線。其他各組用同樣的方法制備離體蛙心標(biāo)本，待心臟收縮活動穩(wěn)定后，分別加入0.2mL對應(yīng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)馬齒莧溶液后，同樣觀察并記錄蛙心收縮變化曲線。用TM-WAVE軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)采集、導(dǎo)出與分析。

3實驗結(jié)果

圖1的結(jié)果表明，馬齒莧對牛蛙離體心臟的灌流具有明顯的正性肌力作用，且呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系。在一定范圍內(nèi)，離體蛙心收縮張力隨馬齒莧質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加而增強(qiáng)。當(dāng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%時，正性肌力作用最顯著;當(dāng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于0.8%時，心肌收縮力隨質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加而有所減弱，但仍高于正常值;當(dāng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加至1.6%時，心肌收縮張力反而減弱，提示大劑量馬齒莧可能產(chǎn)生心臟毒性，進(jìn)而出現(xiàn)抑制作用。因此，學(xué)生在實踐課上主要觀察了正常離體心臟收縮，借鑒了李蓉等[3]用缺鈣任氏液導(dǎo)致心衰的研究，再用0.2%馬齒莧進(jìn)行解救，獲得了良好的教學(xué)效果。

4結(jié)論與討論

馬齒莧對離體牛蛙心臟收縮力有明顯的增強(qiáng)作用，尤其是在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%時，作用最顯著。21世紀(jì)，高等教育的戰(zhàn)略目標(biāo)是培養(yǎng)具有一定科研創(chuàng)新能力的人才，因此，培養(yǎng)學(xué)生的科研能力和創(chuàng)新能力具有重要意義[5]。本實驗更好地體現(xiàn)了研究性教學(xué)，強(qiáng)調(diào)了教師研究性地教與學(xué)生研究性地學(xué)的有機(jī)融合，充分體現(xiàn)了創(chuàng)新教育理念。開展研究型教學(xué)有利于學(xué)生綜合能力的提升、有利于學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)、有利于學(xué)生學(xué)習(xí)能力的提高[6-7]。

近三年，楚雄醫(yī)藥高等專科學(xué)校教師利用身邊的藥材讓學(xué)生全程參與中藥藥理學(xué)課程教學(xué)，課時設(shè)置為4學(xué)時，關(guān)于新鮮藥材的采摘、凈制、煎煮的方法和藥液的配制等，都由各實驗小組自行解決，由教師進(jìn)行指導(dǎo)。從離體蛙心標(biāo)本的制備到實驗結(jié)果的處理與分析，教師通過視頻投影的方式邊示教邊講解，在一定程度上提高了學(xué)生的參與度，也培養(yǎng)了學(xué)生溝通與分工合作和思考問題、解決問題的綜合能力，同時也激發(fā)了學(xué)生的專業(yè)熱情。結(jié)果分析出來后，小組之間還會互相比對實驗結(jié)果，出現(xiàn)差異的小組還會互相找原因，直到理解實驗過程中每一步的重要性。學(xué)生認(rèn)為，通過這樣的實踐課既學(xué)到了理論知識，也鍛煉了動手能力，會讓人非常有成就感，不僅激發(fā)了學(xué)生對實驗的創(chuàng)新意識，還充分調(diào)動了學(xué)生參與的積極性。本課題主要研究中藥藥理學(xué)的實驗教學(xué)，讓學(xué)生了解新藥的研究開發(fā)過程，為推動高校實驗教學(xué)和實驗室發(fā)展提供參考，以期為中藥研究開發(fā)培養(yǎng)更多的人才，為藥學(xué)服務(wù)、為臨床服務(wù)。