無托槽隱形矯治患者與固定矯治患者齦溝液中白細胞介素變化的對比研究

駱厚卓 方世殊 劉倩 黨薇 王艷麗

1.空軍軍醫大學口腔醫院正畸科，西安 710032；2.西安交通大學口腔醫院修復科，西安 710004；3.西安市中心醫院口腔科，西安 710004

1 材料和方法

1.1 臨床資料

選取2019年1月—2020年1月在空軍軍醫大學第三附屬醫院（口腔醫院）正畸科接受無托槽隱形矯治的67 例患者作為觀察組（observation group），接受固定矯治的40 例患者作為對照組（control group），收集患者臨床資料及齦溝液樣本進行研究。選取的患者符合以下標準：1）患者無牙齦腫脹或出血、無牙周袋形成、無牙槽骨吸收、無牙齒松動及移位、無探診出血等情況；2）患者不存在牙列擁擠或牙列擁擠程度＜4 mm；3）2 個月內未服用抗生素或可能引起牙齦增生的藥物；4）接受正畸治療前未接受過細胞因子治療；5）接受正畸治療前血常規檢驗及凝血功能檢驗正常；6）未感染過乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）、艾滋病病毒（human immunodeficiency virus，HIV）、巨細胞病毒（cytomegalovirus，CMV）等，2 個月內未有發熱或細菌感染；7）不合并任何形式的腫瘤；8）不合并有嚴重的心、腦、肺、肝、腎等臟器疾病；9）依從性良好，能按時進行復診。齦溝液樣本由同一醫師在患者的第一恒磨牙遠中齦溝內采集并凍存以備后續實驗。齦溝液的采集不會影響患者正常就診活動，且該樣本僅用于科研用途，患者及家屬均知情同意。

1.2 正畸治療及復診要求

患者正畸治療前3 d 進行口腔衛生宣教，指導患者正確使用正畸牙刷、牙線保持口腔衛生，并收集齦溝液樣本檢測相關IL 水平作為基線資料。記錄接受正畸治療當日的就診結束時間，并作為起始時間，要求患者分別于治療后24 h 和12 個月來院復診檢查正畸治療效果，并于治療后24 h 和12個月收集齦溝液樣本用于相關IL水平檢測。

1.3 Luminex液相芯片檢測IL

定制檢測IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18的Luminex Assay Human Premixed Multi-Analyte Kit（R&D systems）試劑盒。在實驗滴定板中加入Assay Buffer 預濕，封閉振蕩10 min 后充分移除Assay Buffer 并干燥滴定板。在適當孔位滴加樣本、標準品及質量控制樣本各20 μL，加入20 μL Assay Buffer 等比稀釋。加入預混的抗體標記微球并封閉孵育過夜，用Wash Buffer 清洗2 次后加入鞘液充分懸浮微球，在Luminex 200 儀器上進行檢測。

1.4 統計學處理

所得數據通過SPSS 23.0 統計軟件和Graph Pad Prism 8 軟件進行統計學處理、分析及繪圖。一般資料采用描述性分析，計量資料用均數±標準差表示。計量資料比較采用獨立樣本t檢驗，計數資料采用卡方檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 2組患者正畸治療前基線資料的比較

2 組患者正畸治療前基線資料的比較見表1。結果表明，2組患者的年齡、性別、探診深度及齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16、IL-18的表達水平差異均無統計學意義（P＞0.05）。

表1 2組患者正畸治療前基線資料的比較Tab 1 Comparison of basic characteristic of patients before orthodontics treatment between two groups

2.2 2 組患者正畸治療24 h 后齦溝液中IL 水平的比較

2 組患者正畸治療24 h 后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表達水平的比較見表2。統計分析結果表明，2 組患者正畸治療24 h后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 表達水平均升高（P＜0.05），IL-16 則均無明顯變化（P＞0.05），但所有IL 因子表達水平在2 組間差異均無統計學意義（P＞0.05）。

表2 2 組患者正畸治療24 h 后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表達水平的比較Tab 2 Comparison of expression levels of IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10，IL-16 and IL-18 after 24 hours treatment between two groups pg·mL-1

2.3 2 組患者正畸治療12 個月后齦溝液中IL 水平的比較

2 組患者正畸治療12 個月后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表達水平的比較見表3。統計分析結果表明，正畸治療12 個月后，觀察組齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和IL-18的表達水平低于對照組（P＜0.05），但IL-16 表達水平2組間差異均無統計學意義（P＞0.05）。

表3 2組患者正畸治療12個月后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表達水平的比較Tab 3 Comparison of expression levels of IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10，IL-16 and IL-18 after 12 months treatment between two groups pg·mL-1

3 討論

在正畸治療的過程中，往往會伴隨有炎癥反應的發生，其中IL 作為一類炎癥相關因子發揮了重要影響。探究這類細胞因子在正畸治療后的變化趨勢對于了解患者機體狀態及免疫功能水平有重要意義。IL 發揮的作用廣泛，根據其主要性質分為IL-1、IL-2、趨化因子、IL-10、IL-12以及IL-17 等亞族，其中與免疫激活、炎癥相關性較大的有IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18。IL-1β 是一種重要的炎癥細胞因子，主要由外周血單核細胞和巨噬細胞分泌產生，以往研究[9]表明其與細胞凋亡具有密切聯系。在炎癥、感染等刺激下往往會誘導IL-1β 水平升高，如在牙周炎患者齦溝液中，IL-1β 的表達水平較健康人會明顯升高[10]。IL-6 是一種促炎細胞因子，參與調節多種生理過程，特別是在急性炎癥反應和從急性炎癥向慢性炎癥的轉變中起關鍵作用[11]，也有研究[12]表明，在牙周炎癥患者齦溝液中IL-6 水平會有所增加，進而促進生成急性反應期蛋白，加重對牙槽骨的損傷作用。IL-8 是一種淋巴細胞趨化因子，同時可促進中性粒細胞的聚集。作為CD4 的天然可溶性配體，具有促炎癥和免疫調節特性，對CD4+T 細胞、單核細胞和嗜酸性粒細胞也具有趨化作用[13]。有研究[14]表明，IL-8可提高氧化物的釋放，從而加重口腔局部炎癥反應。IL-10 被認為是可以由多種類型的免疫細胞產生的Th2型細胞因子，具有間接抑制Th1 反應的能力。IL-10 可以直接作用于抗原提呈細胞，減少刺激分子的表達，阻止初始T細胞的成熟，或直接作用于T細胞以限制其增殖、功能分化，通過調節T細胞免疫功能進而影響局部或全身炎癥水平[5]。IL-18 是一種促炎癥、促凋亡和致動脈粥樣硬化的細胞因子，屬于IL-1 細胞因子家族。有研究[7]認為，IL-18 通過誘導嗜堿性粒細胞和肥大細胞產生IL-4、IL-5等Th2型細胞因子，間接誘導口腔局部炎癥的發生，但其具體作用機制仍有待研究。

本研究對67 例無托槽隱形矯治患者和40 例固定矯治患者治療前及治療后不同時間節點齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表達水平進行檢測，比較患者接受不同形式正畸治療前后齦溝液中IL表達水平的差異。研究結果表明，不論哪種矯治方式，IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 在治療24 h 后表達水平均顯著升高，且組間無統計學差異。這可能是由于在正畸治療過程中正畸力對牙周組織的影響，進而誘發局限性急性炎癥反應。本研究對不同矯治方式患者治療12 個月后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表達水平進行比較，發現無托槽隱形矯治患者齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 的表達水平更低。結果表明，相比于傳統固定矯治，無托槽隱形矯治對患者造成的口腔炎癥水平更低，更有利于患者口腔微環境的恢復。

利益沖突聲明：作者聲明本文無利益沖突。