微生物藥物生產企業在生產質量管理方面存在的主要問題及建議

劉小瓊，錢利武,薛正蓮

(1.安徽省藥品審評查驗中心，安徽 合肥230051；2.安徽工程大學，安徽 蕪湖 241000)

在后新冠疫情時代，如何阻遏病毒的傳播，成了全世界的難題。“人類最終戰勝新冠病毒，只能靠疫苗”[1]，說明疫苗對于遏制疫情至關重要。目前我國已上市批準使用的新冠疫苗，無論是滅活疫苗還是腺病毒載體疫苗都需要通過微生物獲取。微生物藥物是發酵來源的藥物，獲得藥物產品過程不同于一般的“化學反應”過程，微生物是具有生命的，所以微生物藥物的質量一般難以把控。本文結合微生物藥物的特殊性，分析總結安徽省微生物藥物生產企業在檢查中存在的共性問題，剖析缺陷產生的原因，便于生產企業改進管理提升藥品質量[2]。

1 微生物藥物概述

1.1 微生物藥物的定義、分類及生產工藝 微生物藥物是一種用微生物制作的藥物，是一類結構復雜多樣，生物活性顯著的小分子化合物[3]。微生物藥物的來源大體分為三類：微生物的整體或部分實體、微生物的初級代謝產物、微生物的次級代謝產物。微生物藥物的工藝過程大體相同，一般的工藝流程為：菌株→種子制備(搖瓶、發酵罐)→發酵→發酵液預處理、過濾→提取、精制→藥品。抗生素為微生物的次級代謝產物，是一種具有代表性的微生物藥物。

1.2 微生物藥物的歷史背景、發展現狀及趨勢 自17世紀荷蘭科學家虎克發現細菌后，人類就開啟了認識微生物世界的大門。1929年英國微生物學家費來明無意中發現的青霉素，拉開了人類探究微生物藥物的序幕。以抗生素為例，微生物藥物經歷了從被發現到發現的黃金時期、衰退期、瓶頸期以及現在的新時期[4]。21世紀以來，細菌的耐藥性不斷顯現，如何獲取新型抗生素成了人們的關注焦點。據信，人們已經著手通過研究新型發酵工藝提升微生物藥物產能、利用基因工程及組學技術系統性改造微生物、運用生物信息學對生物反應進行預測發掘新結構代謝產物、運用合成生物學助力復雜化合物微生物合成、采用基因編輯推動微生物代謝途徑的精準改造等方法獲取微生物藥物[5]。

2 安徽省微生物藥物生產企業存在的問題

2.1 生產企業情況 安徽省現有8家生產微生物藥物生產企業，分布地點分別為合肥4家，蕪湖、阜陽、宿州、亳州各1家，涉及的產品劑型有疫苗、注射劑、中藥制劑、原料藥和中藥飲片等。

2.2 缺陷項匯總 通過對8家企業近年來接受監管部門、客戶審計和企業內審報告進行收集、匯總審核，共發現227項缺陷。依照風險等級劃分：嚴重缺陷0項；主要缺陷14項，占比6.17%；一般缺陷213項，占比93.83%，具體情況見表1。

表1 缺陷等級分類

從表1可以看出，自新版《藥品生產質量管理規范(2010年修訂)》(簡稱GMP)實施以來，微生物藥物生產企業生產質量管理有所提高，在檢查中沒有發現嚴重偏離藥品GMP的行為，但是檢查中發現多項主要缺陷，也表明企業的生產質量管理體系尚不健全，亟須完善和改進。

依據GMP及其附錄，將企業在各類檢查中發現的缺陷歸屬到GMP相關章節，缺陷在每個章節的占比情況如表2。

表2 缺陷分布情況

從表2中可以看出，質量控制與質量保證、文件管理、設備和生產管理方面占比較大，分別為22.91%、22.47%、12.33%和8.81%，占缺陷項目總數的66.52%。

2.3 缺陷分析

2.3.1 主要缺陷存在的問題 主要缺陷存在的問題：①確認與驗證方面：凈化空調系統再驗證方案中未明確各監測房間面積，未明確沉降菌、塵埃粒子監測位置；產品工藝驗證方案中未將成品含量、微生物限度內容納入分析；滅菌柜驗證未進行滿載驗證；生產中配制的胰蛋白酶溶液規定有效期為一年，但無穩定性試驗數據支持等。②廠房設施方面：物料稱量、配料、混合同在一室，無專用稱量設施；制粒間產塵量較大，不能有效捕塵，致使直排管道有白色積塵；吹掃藥液的壓縮空氣未安裝過濾器；更衣室互鎖設置位置不對；洗瓶間對普通區缺一個壓差指示計等。③質量保證措施方面：持續穩定性考察檢測項目未包含生物活性檢測；灌裝過程中，人員身體依靠著RABS門上；灌裝操作人員裝配工作完成后未對隔離門內側和手套進行消毒等。

2.3.2 一般缺陷存在的問題 一般缺陷主要表現為：①質量控制與質量保證方面：批檢驗記錄不規范，不能有效追溯；易制毒試劑未按要求雙人雙鎖；用于檢驗工作的枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌等陽性菌種傳代后未進行活性、純度等的確認；水系統趨勢分析中未設置不良趨勢的標準；偏差處理記錄中，缺少偏差原因調查的過程記錄；丙酮殘留檢驗超標，企業進行了偏差調查，但沒有查出超標的真正原因且偏差處理未結束就對成品放行等。②文件管理方面：新版批生產記錄已生效，但已失效文件仍在使用；僅規定灌裝操作人員“雙手勤消毒”，未對消毒部位、步驟和方法等進行具體規定；清潔過程的描述不夠詳細，缺少注射用水水量、水壓等；工藝規程中凍干工序描述不具體等。③設備管理方面：生產過程中離心機溫度轉速數字顯示器出現故障；精制結晶間抽濾袋未清洗干凈；熔點儀溫度示值只用磺胺熔點標準品校準166 ℃，不能有效覆蓋所測樣品十八醇(熔點:57～60 ℃)和山梨酸(熔點:132～136 ℃)的溫度值，且相關樣品檢測結果均未對溫度值進行校正；細胞規模化培養室內部分物料管道無內容物和流向標識等。④生產管理方面：未制定動態沉降菌詳細監測計劃；液體灌裝軋蓋間、片劑壓片間有毛刷；擦拭設備用絲光毛巾易產生脫落物；容器具存放間部分已清潔容器無清潔標識等。

2.3.3 微生物藥物生產特性問題 微生物生產企業有別于其他藥品生產企業之處，在于其生產過程中會一直和活性物質打交道。檢查發現的缺陷中發現除了常規缺陷項外，還有其特有的缺陷。如企業未制定主細胞、工作細胞的質量標準；未制定細胞培養用的外購氧氣、二氧化碳質量標準；發酵緩沖液所用容器未經處理進入潔凈區；工作種子搖瓶培養批生產記錄中抗生素用量未標注；未對主代種子的變更對產品的影響進行評估；未規定發酵所得菌體的儲存時限；未對菌體從儲存到純化間的轉運方式的污染風險進行充分評估；補料罐只記錄需滅菌，未體現滅菌溫度和時間；低溫冷庫開門時間限制、斷電后應急措施等不明確；接種間生物安全柜內存在試劑無標識，放置在顯微鏡操作臺上個別容器無接種間專用標識；玻璃容器密封膠塞無專用標識等。

3 原因分析

3.1 質量管理意識有待加強 微生物藥物的源頭是微生物，企業需要用合適的培養基對菌種進行培養使其復壯才能引導其生成所需產物，其在培養過程也容易滋生其他微生物。企業應完善自己的質量管理體系，規范質量實驗室管理，尤其是菌種管理，如菌種的鑒定、保存及傳代等，保證菌種的安全性。同時提升相關操作人員質量管理意識、強化衛生安全知識及無菌操作規范培訓，防止生產過程中受雜菌污染。

3.2 文件管理體系不完善 文件是質量保證系統的基本要素，任何與生產質量管理規范有關的活動均應當有記錄[6]。未制定主細胞、工作細胞的質量標準，中間產品控制就缺少依據；工藝規程中關鍵工序不細化就不能有效指導生產；批生產記錄設計不合理就不能還原整個生產過程，可追溯性較差；低溫冷庫開門時間限制、斷電后應急措施等不明確，一旦出現斷電，人員不知如何處理，斷電時間過長可能會影響菌種的活性。企業應該加強文件管理，定期修訂審核文件，確保所有活動都有據可依，有跡可循。

3.3 設備維護保養不到位 部分微生物藥物生產企業重視硬件投入，弱化日常維護保養。設備未按照要求進行清潔或者清潔后未按照要求存放，不能確保直接接觸物料的設備不會帶來污染的風險。隨著人們對GMP認識程度不斷加深，過去能被認可的確認或驗證方法，現在可能就是問題。確認和驗證不是一次性行為，企業應該持續進行。

3.4 生產管理不規范 藥品質量源于設計，但實現于制造過程，企業能否達到期望，就要看生產管理是否規范。人員是否按照工藝參數組織生產，是否按照要求對中間產品進行控制、對環境進行監測，能否在生產過程中降低污染、交叉污染以及差錯、混淆的可能。企業應加強生產管理，規范人員操作行為、規范生產過程中物料狀態標識、規范記錄的填寫等。

4 建議和意見

4.1 樹立質量意識，提升管理水平 藥品不同于一般商品，是被用來診斷、治療、預防疾病的，藥品質量一旦出了問題，不僅不能保證其療效還有可能引發其他健康問題的產生。企業是上市藥品安全性、有效性和質量可控性的責任主體，應確保能夠持續穩定地生產出符合注冊要求的產品。人員是藥品生產質量管理的關鍵要素，企業應著力提升人員素質，建立完善的培訓和考核制度，結合人員的資歷和微生物藥物的特點有針對性地制定法律法規、專業知識、崗位要求、生物安全等培訓方案并組織實施[7]，樹立全員質量管理意識，提升生產質量管理水平，降低微生物藥物生產質量風險。

4.2 采取有效措施，確保持續改進 企業在開展缺陷項目的整改時，往往存在整改思路不明確、原因分析不深入、糾正與預防措施不到位、跟蹤驗證不及時等問題，導致相同或類似的問題重復出現。對于缺陷產生的原因，企業大多歸咎于人員意識不強、人員理解不夠、人員培訓不到位等，整改措施基本上是采取人員培訓，整改浮于表面，未能從根本上解決問題。企業應將監管部門開展的各類檢查、供應商的外部審核及內部的自檢和管理評審等，提出的問題、意見及建議，作為質量管理體系持續改進的重要因素。

4.3 開展上市后研究，實施全生命周期管理 眾所周知，野生菌株如果不在人為干預下很難在實驗室條件下生存，而且其合成水平低，造成活性物質分離和鑒定難。人們利用傳統的誘變育種的方式去改變菌株活性，雖然取得了一定的成就，但也到了瓶頸期。“唯有改革者進，唯有創新者強”，企業應主動開展藥品上市后研究，積極運用現代技術和手段對菌種選育、培養方式及生產過程進行改造創新，以提高目標產物的產量[8]，充分發揮國內外先進生產技術和技術成果，對微生物藥物產業的促進作用，保障人民群眾的用藥安全。

5 結語

盡管我國在微生物藥物的開發和利用上取得了可喜的成績，但隨著病原菌的耐藥性日益加重，同時新型疾病也在不斷涌現，人類的健康依然面臨著威脅。微生物藥物生產企業應充分認識生產過程中存在的各種風險，確保生產質量管理持續合規。我國地大物博，微生物資源豐富，深入挖掘微生物來源的藥物，對于保障人民群眾生命安全和身體健康將具有重大而深遠的意義。