MSI檢測(cè)在結(jié)直腸癌病人免疫治療中的應(yīng)用研究

黃科峰

【關(guān)鍵詞】MSI;結(jié)直腸癌;免疫治療

【中圖分類號(hào)】R574.63 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2026-5328（2022）03--01

結(jié)直腸癌（CRC）是癌細(xì)胞出現(xiàn)在結(jié)腸和直腸部位的腫瘤，對(duì)于人們的身體健康有著較大的危害，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，根據(jù)惡性腫瘤發(fā)病率統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)我國(guó)居民中CRC的發(fā)病率為第三名[1]。隨著時(shí)代的發(fā)展，CRC患病年齡呈低齡化趨勢(shì)，而患病人數(shù)逐年上漲。對(duì)于CRC的早發(fā)現(xiàn)，早診斷與及時(shí)治療非常重要。微衛(wèi)星不穩(wěn)定（Microsatellite instability，MSI）是CRC發(fā)生的一個(gè)重要的因素，DNA 錯(cuò)配修復(fù)（MMR）、基因突變及表觀遺傳沉默綜合作用的結(jié)果是MSI出現(xiàn)的原因，出現(xiàn)MSI導(dǎo)致細(xì)胞基因調(diào)控被擾亂進(jìn)而成為腫瘤細(xì)胞。MSI一般分為三種狀態(tài)：分別是高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI-H），低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI-L）和微衛(wèi)星穩(wěn)定性（MSS）[2]。本文通過檢測(cè)病人組織的MSI狀態(tài)來確定MSI在結(jié)直腸癌病人免疫治療中作用。

1 材料與方法

1.1樣本收集

收集2021年1月至12月手術(shù)切除的結(jié)腸腺癌標(biāo)本120例，其中男性75例（62.5%），女性45例（37.5%）;患者的年齡范圍是27～85歲，平均年齡為57.1±16.3歲。依據(jù)UICC分期委員會(huì)提出的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期30例;Ⅱ期45例;Ⅲ期28例;Ⅳ期17例。此次研究所有病例都是原發(fā)性腫瘤，手術(shù)前都沒有進(jìn)行治療，而且排除非腫瘤性死亡病例。本次研究獲得病人的知情同意。

1.2多重?zé)晒釶CR毛細(xì)管電泳檢測(cè)微衛(wèi)星穩(wěn)定狀況

取用5張白片放置在乙醇中浸泡5分鐘，用水沖洗后晾干，使用刀片刮下組織至EP管內(nèi)，提取DNA，檢測(cè)6個(gè)單核核苷酸重復(fù)標(biāo)記物（BAT-25、BAT-26、NR-21、NR-24、NR-27、 Mono-27），2個(gè)五核苷酸重復(fù)標(biāo)記物（Penta C與Peta D）和性別位點(diǎn)（Amel），PCR擴(kuò)增反應(yīng)后，在一代測(cè)序儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳檢測(cè)，分析數(shù)據(jù)。

1.3結(jié)果判定

大于等于2個(gè)單核苷酸位點(diǎn)的片段大小發(fā)生改變?yōu)槲⑿l(wèi)星高度不穩(wěn)定（ microsatellite instablehigh，MSI-H），1個(gè)單核苷酸位點(diǎn)的片段大小發(fā)生改變?yōu)槲⑿l(wèi)星低度不穩(wěn)定（ microsatellite instable-low，MSI-L），沒有單核苷酸位點(diǎn)的片段大小發(fā)生改變?yōu)镸SS。

1.4免疫治療

對(duì)選取的病人采用特瑞普利單抗免疫治療，治療方案240 mg，1次/3周，治療周期5次，觀察記錄病人的癥狀，每次治療后進(jìn)行檢查，，參照實(shí)體瘤近期療效評(píng)價(jià)（ RECIST） 對(duì)患者近期療效進(jìn)行評(píng)估，可以分為：完全緩解（CR），部分緩解（PR），穩(wěn)定（SD），進(jìn)展（PD），計(jì)算客觀緩解率（ORR）與疾病控制率（DCR），計(jì)算方式ORR=（CR+PR）/總例數(shù)×100%;DCR=（CR+PR+SD）/總例數(shù)×100%。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以n/百分?jǐn)?shù)（%）表示，使用χ2 檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1MSI檢測(cè)狀態(tài)分析

通過對(duì)120例樣本進(jìn)行檢測(cè)，MSI-H有28例（23.3%），MSI-L有20例（16.7%），MSS有72例（60%）。

2.2免疫治療效果分析

對(duì)病人進(jìn)行治療后，MSI不同狀態(tài)的ORR和DCR差異較大，MSI-H的病人使用免疫治療后ORR和DCR顯著高于MSI-L/MSS的病人，差異具有統(tǒng)計(jì)意義（P<0.05），MSI-H的病人經(jīng)過治療后沒有出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)，生活質(zhì)量良好，安全耐受性高。

3 討論

隨著科技的不斷發(fā)展，人們的飲食方式也在變化，外賣，奶茶的流行，造成結(jié)直腸癌的發(fā)病率越來越高，且呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)。近年來隨著基因檢測(cè)的廣泛應(yīng)用，越來越多的病理科使用分子診斷進(jìn)行腫瘤的篩查與診斷，為臨床的治療提供依據(jù)。1993年最早發(fā)現(xiàn)人體內(nèi)存在MSI現(xiàn)象。隨著研究的進(jìn)行，2017年FDA批準(zhǔn)帕博麗珠單抗用于治療CRC患者，開啟免疫治療時(shí)代。隨后國(guó)內(nèi)也相繼獲批很多款用于免疫治療的單抗藥物。有研究表明使用PD-1單抗治療MSI-H的CRC患者的ORR比MSI-L/MSS要好[3]，張杰等人研究使用免疫治療1例MSI-H的CRC患者，使用單抗藥物治療五周后觀察各項(xiàng)指標(biāo)滿足全完緩解的標(biāo)準(zhǔn)，說明對(duì)于MSI-H的CRC患者使用免疫治療很有效[4]，Manz等人研究發(fā)現(xiàn)對(duì)于MSI-H的CRC患者，使用免疫檢查點(diǎn)藥物能夠提高病人的治療效果[5]。本研究檢測(cè)120例CRC患者的樣本，MSI-H的CRC患者比例為23.3%，使用免疫治療后的ORR為78.6%，DCR為92.9%，結(jié)果表明對(duì)于MSI-H的CRC患者使用免疫治療效果很好，提示MSI檢測(cè)的狀態(tài)能夠作為免疫治療的一個(gè)生物標(biāo)志物。

綜上所述，對(duì)于CRC病人應(yīng)該進(jìn)行MSI狀態(tài)檢測(cè)，根據(jù)MSI狀態(tài)進(jìn)行后續(xù)治療方案的選擇，國(guó)內(nèi)外多個(gè)指南（NCCN，ESMO，CSCO）都有推薦MSI檢測(cè)作為CRC患者的必檢項(xiàng)目，基于之前的研究和本次研究的結(jié)果，MSI-H可以作為結(jié)直腸癌病人免疫治療的潛在生物標(biāo)志物。

參考文獻(xiàn)：

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