干擾腫瘤相關巨噬細胞的P2X4 受體表達可抑制膠質瘤細胞的遷移和侵襲

神經膠質瘤約占原發性腦腫瘤的50%，其中膠質母細胞瘤是最常見、最具侵略性的亞型，腫瘤組織廣泛浸潤到周圍的腦實質中，從而導致腫瘤復發。膠質瘤微環境中浸潤大量的腫瘤相關巨噬細胞（TAMs），占腫瘤的30%～50%，包括小膠質細胞和外周血來源的巨噬細胞，TAMs在腫瘤來源的細胞因子和趨化因子作用下聚集到膠質瘤腫瘤微環境中，抗腫瘤的功能被抑制，反而支持膠質瘤的生長和侵襲，TAMs的浸潤往往提示膠質瘤患者預后不良。

三磷酸腺苷（ATP）介導的嘌呤能信號已被證明可介導多種癌癥相關過程，包括細胞遷移、對細胞毒性治療的抵抗和免疫調節，近年來細胞外ATP及ATP門控P2X受體在腫瘤學領域受到越來越多的關注。有研究顯示，沉默P2X4受體可通過BDNF/TrkB/ATF4信號通路抑制膠質瘤細胞的生長，目前關于P2X4受體是否參與膠質瘤腫瘤微環境調控的研究較少，僅見報道P2X4受體在大鼠C6膠質瘤中的巨噬細胞和小膠質細胞高表達，但其所涉及的功能及機制尚未見報道。因此，本實驗研究旨在了解P2X4 受體在膠質瘤TAMs中的表達對膠質瘤細胞侵襲和遷移的影響，并探討其分子機制，以期為膠質瘤治療新藥物靶點的開發提供依據。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 16只6～8周齡C57BL/6小鼠（昆明醫科大學實驗動物中心），雄性，體質量18～22 g，動物及實驗符合國家科學技術委員會發布的《實驗動物管理條例》。

1.1.2 細胞系 鼠源巨噬細胞RAW264.7 細胞系（ATCC），小鼠膠質瘤GL261細胞系（上海子實生物科技有限公司）。

1.1.3 主要試劑 DMEM高糖培養……