頂空氣相色譜法快速測(cè)定全血中17種揮發(fā)性有機(jī)污染物

鄒小娟 潘強(qiáng)生

摘 要：目的：建立頂空氣相色譜DB-WAX毛細(xì)管柱同時(shí)測(cè)定全血中17種揮發(fā)性有機(jī)污染物的快速檢測(cè)方法。方法：全血用純水稀釋后，頂空平衡，經(jīng)毛細(xì)管柱分離，火焰離子化檢測(cè)器（Flame Ionization Detector，F(xiàn)ID）測(cè)定。結(jié)果：上述17種揮發(fā)性有機(jī)污染物分離效果好，工作曲線線性相關(guān)系數(shù)均在0.999以上，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%～6.0%，加標(biāo)回收率在85.6%～99.5%。結(jié)論：該方法能有效分離和準(zhǔn)確測(cè)定職業(yè)暴露人群的血中17種揮發(fā)性有機(jī)化合物，操作簡(jiǎn)便、快捷。

關(guān)鍵詞：全血;有機(jī)污染物;氣相色譜

Rapid Determination of 17 Volatile Organic Pollutants in Whole Blood by Headspace Gas Chromatography

ZOU Xiaojuan， PAN Qiangsheng

（Anqiu Center for Disease Control and Prevention， Anqiu 262100， China）

Abstract： Objective： To establish a rapid detection method for the simultaneous determination of 17 volatile organic pollutants in whole blood by headspace gas chromatography DB-WAX capillary column. Method： The whole blood was diluted with pure water， balanced by headspace， separated by capillary column and determined by FID detector. Result： The above 17 kinds of volatile organic pollutants have good separation effect， the correlation coefficient of the standard curve was above 0.999， the relative standard deviation is 1.1%～6.0%， the desorption efficiency in 85.6%～99.5%， the detection limit was lower than the field dose level occupation chemical poisoning. Conclusion： This method can effectively separate and accurately determine 17 volatile organic compounds in the blood of occupational exposure population.

Keywords： whole blood; organic pollutants; gas chromatography

安丘市的工業(yè)產(chǎn)業(yè)主要集中在印染產(chǎn)業(yè)、化工產(chǎn)業(yè)、紡織產(chǎn)業(yè)以及蓄電池產(chǎn)業(yè)等行業(yè)，上述各類工業(yè)產(chǎn)業(yè)在產(chǎn)品生產(chǎn)過程中會(huì)不同程度地產(chǎn)生對(duì)人體有害的揮發(fā)性有機(jī)污染物，部分揮發(fā)性有機(jī)污染物具有致癌性、神經(jīng)毒性、生殖毒性和致畸性[1]。《工作場(chǎng)所有害因素職業(yè)接觸限值 第1部分：化學(xué)有害因素》（GBZ 2.1—2019）[2]所推薦的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)多數(shù)為有機(jī)污染物在尿液和呼出氣中的相關(guān)限值，有機(jī)污染物在全血中的限值規(guī)定很少。目前，測(cè)定生物樣品中揮發(fā)性有機(jī)物的方法主要包括吹掃捕集-氣質(zhì)聯(lián)用法[3]、固相微萃取（Solid-Phase Microextraction，SPME）-氣質(zhì)聯(lián)用法[4]。為了更直接地反應(yīng)職業(yè)暴露人群血中有機(jī)成分，有效保護(hù)從業(yè)人員的身體健康，也為應(yīng)急突發(fā)事件提供針對(duì)性救援，對(duì)全血17種揮發(fā)性有機(jī)污染物通過頂空氣相色譜毛細(xì)管柱同時(shí)分離測(cè)定，探究檢測(cè)效果。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

正戊烷（色譜純）、正己烷（色譜純）、辛烷（色譜純）、丙酮（色譜純）、乙酸乙酯（色譜純）、苯（色譜純）、三氯乙烯（色譜純）、四氯乙烯（色譜純）、甲苯（色譜純）、乙酸丁酯（優(yōu)級(jí)純）、乙酸異戊酯（色譜純）、對(duì)二甲苯（色譜純）、間二甲苯（色譜純）、乙酸戊酯（色譜純）、鄰二甲苯（色譜純）、苯乙烯（色譜純）、環(huán)己酮（色譜純）、二硫化碳（色譜純）、硫酸銨（優(yōu)質(zhì)純）。

1.2 儀器與設(shè)備

美國(guó)安捷倫公司Ajilent 7890A氣相色譜儀，帶FID檢測(cè)器;Ajilent 7697A頂空自動(dòng)進(jìn)樣器。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 色譜條件

色譜柱為DB-WAX（30 m×0.32 mm，0.25 μm）;進(jìn)樣口溫度200 ℃;檢測(cè)器溫度300 ℃。按照如下條件進(jìn)行升溫處理：起始溫度設(shè)定為40 ℃，維持起始溫度3 min。以5 ℃/min的速度逐步升溫至70 ℃。升溫至70 ℃后，以10 ℃/min的速度繼續(xù)逐步升溫至120 ℃。色譜柱流量設(shè)定為1 mL/min。按照氫氣30 mL/min、空氣300 mL/min，1∶1分流比進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1 mL。

1.3.2 頂空進(jìn)樣條件

平衡溫度：80 ℃;平衡時(shí)間：20 min;進(jìn)樣針溫度：85 ℃;傳輸線溫度：90 ℃;進(jìn)樣時(shí)間：0.03 min。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

將少許甲醇置入50 mL容量瓶中，加入定量色譜純標(biāo)準(zhǔn)液，稀釋至刻度，混勻，并進(jìn)行逐級(jí)稀釋，配成標(biāo)準(zhǔn)系列。5B1FCB47-A5E0-43F9-87F6-51EA7A24DA45

1.3.4 樣品采集和測(cè)定

抽取靜脈血3 mL，注入加有抗凝劑的采血管，立即用硅橡膠塞緊管口，搖勻后立即送實(shí)驗(yàn)室[5]。取一個(gè)10 mL頂空瓶加入1 mL抗凝血和約0.5 g硫酸銨，加入4 mL純水，立即封口，搖勻。待測(cè)物濃度按以下公式計(jì)算：

X=c×F （1）

式中：X為血中待測(cè)物濃度，μg/mL;c為測(cè)得樣品溶液中待測(cè)物濃度，μg/mL;F為稀釋倍數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)色譜

17種揮發(fā)性有機(jī)污染物標(biāo)準(zhǔn)色譜如圖1所示。

1—正戊烷（2.939 min）;2—正己烷（3.063 min）;3—辛烷（3.935 min）;4—丙酮（4.107 min）;5—乙酸乙酯（4.980 min）;6—苯（5.896 min）;7—三氯乙烯（6.982 min）;8—四氯乙烯（7.629 min）;9—甲苯（8.078 min）;10—乙酸丁酯（8.935 min）;11—乙酸異戊酯（10.193 min）;12—對(duì)二甲苯（10.449 min）;13—間二甲苯（10.603 min）;14—乙酸戊酯（11.362 min）;15—鄰二甲苯（11.582 min）;16—苯乙烯（13.050 min）;17—環(huán)己酮（13.717 min）。

2.2 工作曲線及檢出限

各類揮發(fā)性有機(jī)污染物線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均>0.999。儀器檢出限設(shè)置為標(biāo)準(zhǔn)3倍噪音，以1.0 mL全血計(jì)算最低檢出濃度。結(jié)果見表1。

2.3 精密度和準(zhǔn)確度

取0.5 μg/mL、2.5 μg/mL、5.0 μg/mL 低、中、高17種揮發(fā)性有機(jī)污染物混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液，混標(biāo)溶液進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果為1.1%～6.0%。取低、中、高3個(gè)濃度的17種揮發(fā)性有機(jī)污染物加入到全血中，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，各物質(zhì)平均加標(biāo)回收率為85.6%～99.5%。結(jié)果見表2。

2.4 方法應(yīng)用

用本方法對(duì)某公司噴漆車間暴露職工采樣檢測(cè)，在血中檢出了正戊烷、正己烷、辛烷、丙酮、甲苯、乙酸戊酯及環(huán)己酮，其濃度均小于方法最低檢出濃度。

3 結(jié)論

研究使用純水稀釋，選擇頂空DB-WAX毛細(xì)管柱分析測(cè)定全血中17種揮發(fā)性有機(jī)污染物。該方法具有操作簡(jiǎn)單、測(cè)定靈敏度高、一級(jí)精密度好的特性。測(cè)定結(jié)果線性范圍相對(duì)較寬，適用于職業(yè)暴露中揮發(fā)性有機(jī)危害物的快速檢測(cè)。

參考文獻(xiàn)

[1]郝守進(jìn)，康君行，周珊，等.固相微萃取氣相色譜法測(cè)定血中揮發(fā)性有機(jī)化合物[J].衛(wèi)生研究，2000，29（1）：37-39.

[2]國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì).工作場(chǎng)所有害因素職業(yè)接觸限值 第1部分：化學(xué)有害因素：GBZ 2.1—2019[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2019.

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[5]王余萍.頂空固相微萃取氣相色譜法測(cè)定血中苯[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2009，19（4）：794-795.5B1FCB47-A5E0-43F9-87F6-51EA7A24DA45