頂空氣相色譜法快速測定全血中17種揮發(fā)性有機污染物

鄒小娟，潘強生

（山東省安丘市疾病預(yù)防控制中心，山東安丘 262100）

安丘市的工業(yè)產(chǎn)業(yè)主要集中在印染產(chǎn)業(yè)、化工產(chǎn)業(yè)、紡織產(chǎn)業(yè)以及蓄電池產(chǎn)業(yè)等行業(yè)，上述各類工業(yè)產(chǎn)業(yè)在產(chǎn)品生產(chǎn)過程中會不同程度地產(chǎn)生對人體有害的揮發(fā)性有機污染物，部分揮發(fā)性有機污染物具有致癌性、神經(jīng)毒性、生殖毒性和致畸性[1]。《工作場所有害因素職業(yè)接觸限值 第1部分：化學(xué)有害因素》（GBZ 2.1—2019）[2]所推薦的生物監(jiān)測指標(biāo)多數(shù)為有機污染物在尿液和呼出氣中的相關(guān)限值，有機污染物在全血中的限值規(guī)定很少。目前，測定生物樣品中揮發(fā)性有機物的方法主要包括吹掃捕集-氣質(zhì)聯(lián)用法[3]、固相微萃取（Solid-Phase Microextraction，SPME）-氣 質(zhì) 聯(lián) 用 法[4]。為了更直接地反應(yīng)職業(yè)暴露人群血中有機成分，有效保護(hù)從業(yè)人員的身體健康，也為應(yīng)急突發(fā)事件提供針對性救援，對全血17種揮發(fā)性有機污染物通過頂空氣相色譜毛細(xì)管柱同時分離測定，探究檢測效果。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

正戊烷（色譜純）、正己烷（色譜純）、辛烷（色譜純）、丙酮（色譜純）、乙酸乙酯（色譜純）、苯（色譜純）、三氯乙烯（色譜純）、四氯乙烯（色譜純）、甲苯（色譜純）、乙酸丁酯（優(yōu)級純）、乙酸異戊酯（色譜純）、對二甲苯（色譜純）、間二甲苯（色譜純）、乙酸戊酯（色譜純）、鄰二甲苯（色譜純）、苯乙烯（色譜純）、環(huán)己酮（色譜純）、二硫化碳（色譜純）、硫酸銨（優(yōu)質(zhì)純）。

1.2 儀器與設(shè)備

美國安捷倫公司Ajilent 7890A氣相色譜儀，帶FID檢測器；Ajilent 7697A頂空自動進(jìn)樣器。

1.3 試驗方法

1.3.1 色譜條件

色譜柱為DB-WAX（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度200 ℃；檢測器溫度300 ℃。按照如下條件進(jìn)行升溫處理：起始溫度設(shè)定為40 ℃，維持起始溫度3 min。以5 ℃/min的速度逐步升溫至70 ℃。升溫至70 ℃后，以10 ℃/min的速度繼續(xù)逐步升溫至120 ℃。色譜柱流量設(shè)定為1 mL/min。按照氫氣30 mL/min、空氣300 mL/min，1∶1分流比進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1 mL。

1.3.2 頂空進(jìn)樣條件

平衡溫度：80 ℃；平衡時間：20 min；進(jìn)樣針溫度：85 ℃；傳輸線溫度：90 ℃；進(jìn)樣時間：0.03 min。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

將少許甲醇置入50 mL容量瓶中，加入定量色譜純標(biāo)準(zhǔn)液，稀釋至刻度，混勻，并進(jìn)行逐級稀釋，配成標(biāo)準(zhǔn)系列。

1.3.4 樣品采集和測定

抽取靜脈血3 mL，注入加有抗凝劑的采血管，立即用硅橡膠塞緊管口，搖勻后立即送實驗室[5]。取一個10 mL頂空瓶加入1 mL抗凝血和約0.5 g硫酸銨，加入4 mL純水，立即封口，搖勻。待測物濃度按以下公式計算：

式中：X為血中待測物濃度，μg/mL；c為測得樣品溶液中待測物濃度，μg/mL；F為稀釋倍數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)色譜

17種揮發(fā)性有機污染物標(biāo)準(zhǔn)色譜如圖1所示。

圖1 17種揮發(fā)性有機污染物標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

2.2 工作曲線及檢出限

各類揮發(fā)性有機污染物線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均＞0.999。儀器檢出限設(shè)置為標(biāo)準(zhǔn)3倍噪音，以1.0 mL全血計算最低檢出濃度。結(jié)果見表1。

表1 線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限

（續(xù)表1）

2.3 精密度和準(zhǔn)確度

取 0.5 μg/mL、2.5 μg/mL、5.0 μg/mL 低、中、高17種揮發(fā)性有機污染物混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液，混標(biāo)溶液進(jìn)行6次重復(fù)測定，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果為1.1%～6.0%。取低、中、高3個濃度的17種揮發(fā)性有機污染物加入到全血中，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗，各物質(zhì)平均加標(biāo)回收率為85.6%～99.5%。結(jié)果見表2。

表2 精密度及準(zhǔn)確度

2.4 方法應(yīng)用

用本方法對某公司噴漆車間暴露職工采樣檢測，在血中檢出了正戊烷、正己烷、辛烷、丙酮、甲苯、乙酸戊酯及環(huán)己酮，其濃度均小于方法最低檢出濃度。

3 結(jié)論

研究使用純水稀釋，選擇頂空DB-WAX毛細(xì)管柱分析測定全血中17種揮發(fā)性有機污染物。該方法具有操作簡單、測定靈敏度高、一級精密度好的特性。測定結(jié)果線性范圍相對較寬，適用于職業(yè)暴露中揮發(fā)性有機危害物的快速檢測。