胎母輸血綜合征早期體外預測方法研究進展

何佳靜

摘要：胎母輸血綜合征（fetomaternal hemorrhage，FMH），發病隱匿，沒有特異的臨床癥狀，早期不易察覺，直到病程晚期才有明顯的臨床表現，造成了較高的圍生兒死亡率。本文就現有的檢測方法進行分析總結，以求為臨床早期診斷FMH提供可靠的參考依據，降低圍產兒并發癥的發生率及死亡率，現綜述如下。

關鍵詞：胎母輸血綜合征;Hb F;K-B實驗;血紅蛋白電泳;流式細胞術

【中圖分類號】 R457.1 【文獻標識碼】 A? ? ? 【文章編號】2107-2306（2022）10--01

FMH是指胎兒血液通過破損的胎盤絨毛間隙進入到母體血循環，導致胎兒不同程度失血的一組臨床癥候群，發生在50%～70%的妊娠中。大量胎母輸血可致胎兒貧血、水腫和發育受限，嚴重時可導致胎兒或新生兒的死亡，圍生兒的病死率高達33%-50%[1]。該病發生率低，臨床表現隱匿，早期診斷困難，往往診斷時胎兒已發生了嚴重的貧血。因此，有效、便捷、早期的體外診斷方法在臨床有著迫切的需求。

1 紅細胞酸洗脫試驗（Kleihauer-Betke acid elution assay，KB）

目前為止，K-B實驗是檢測和定量FMH的主要診斷性試驗[2]。將母體的外周血制作涂片，在酸性緩沖液中進行酸浴，然后經沖洗晾干后用伊紅染色，含Hb F的紅細胞形態完整，被染成紅色，含Hb A的紅細胞被破壞洗脫掉后變成空影，故未能被染色，呈蒼白色，顯微鏡下觀察并計算染成紅色的細胞百分率，正常值為≤3%。雖然K-B法，是目前國內最主流的FMH檢測方法，但是作為勞動密集型的純手工實驗，達到標準化是一個難題。

2 血紅蛋白電泳

血紅蛋白由四條鏈組成，其中成人紅細胞中的主要血紅蛋白Hb A是由α2β2組成，胎兒紅細胞中的主要血紅蛋白Hb F是由α2γ2組成。各血紅蛋白的等電點不同，從而在一定pH緩沖液中所帶的正、負電荷亦不相同，經電泳后各血紅蛋白的移動方向不同，從而區分出不同的血紅蛋白，進而計算其比例。Hb F的含量與含Hb F的胎兒細胞或F細胞有良好的相關性[3] ，因此，可以通過檢測血紅蛋白F的含量來對胎兒細胞進行確認以及定量測定。

3 流式細胞術

流式細胞術是應用特異性標記物對母體外周血中的胎兒紅細胞進行標記、定量分析。目前，應用到的特異性標記物有抗-胎兒HbF抗體、抗-紅細胞表面抗原以及抗碳酸酐酶抗體等[4]，通過抗體的熒光強度來量化胎兒紅細胞的數量。這種方法靈敏度較高、可重復性強，能夠快速診斷妊娠過程中因各種原因所致的胎兒血進入母體的情況。

4 小結

綜上所述，目前存在的檢測方案均是基于HbF的檢測。但HbF不是胎兒紅細胞所特有的，也可以是母體自身含較高比例HbF的F細胞，若妊娠婦女自身存在血液系統疾病，如β地中海貧血，再生障礙性貧血等，F細胞的水平就可能明顯上升，即使沒有血液系統的疾病，妊娠這一特殊的生理狀態自身就可能導致部分母體外周循環中的F細胞增多[5]，從而干擾以HbF為檢測目標的試驗。K-B酸洗脫法是復雜的人工實驗，費時、重復性低，受實驗條件和人員差異的限制，且不能排除孕婦本身以及血液系統疾病造成的HbF的干擾。同樣的，基于HbF的血紅蛋白電泳技術也不能排出干擾。而流式細胞術高成本，且實驗相對復雜，對人員技術要求較高，不適用于基層。碳酸酐酶僅在成人紅細胞內分布，結合HbF的特異性抗體，運用流式細胞術對孕婦外周血進行雙抗體標記，僅HbF單陽時才能說明HbF來源于胎兒紅細胞，提高了流式細胞術的特異性，并排除了干擾。那么，將毛細管血紅蛋白電泳與流式細胞術聯合運用，通過使用毛細管電泳進行篩查，能夠經濟高效的實現FMH的篩查工作;對篩查結果進一步分析，在識別β地中海貧血患者的前提下，針對血紅蛋白F增高的患者進一步使用流式細胞術鑒別，能夠最終保證FMH確診的準確性，實現早發現，早診斷，早治療，改善預后，從而使廣大妊娠人群受益。

參考文獻：

[1] Singh P， Swanson T. Acute and chronic fetal anemia as a result of fetomaternal hemorrhage. Case Rep Obstet Gynecol. 2014;2014：296463. doi：10.1155/2014/296463

[2] Kim YA， Makar RS. Detection of fetomaternal hemorrhage. Am J Hematol. 2012;87（4）：417-423. doi：10.1002/ajh.22255

[3] MUNDEE Y， BIGELOW N C， DAVIS B H， et al. Flow cytometric method for simultaneous assay of foetal haemoglobin containing red cells， reticulocytes and foetal haemoglobin containing reticulocytes [J]. Clinical and laboratory haematology， 2001， 23（3）： 149-54.

[4] 楊玉芳，葉紅，羅飛，惠燕，朱文靜.胎母輸血綜合征臨床研究進展[J].海南醫學，2018，29（21）：3100-3102.DOI：10.3969/j.issn.1003-6350.2018.21.040.

[5] Cormack OM， Guilfoyle F， Flynn CM. The prevalence of an elevated F cell population in a maternal and gynaecology cohort. Transfus Med. 2019;29（5）：369-373. doi：10.1111/tme.12625