上海市寶山區18 501例健康兒童末梢血白細胞計數及其分類參考區間的建立

張宇亮，徐靈，李仁杰，董成林，崔邦銓，吳成志

上海中冶醫院檢驗科，上海 200941

白細胞是一種抵抗感染的免疫細胞，它主要由人體骨髓中的造血干細胞分化形成。在醫學上根據其形態與功能將其分為淋巴細胞、單核細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性細胞、中性粒細胞五大類。各類細胞的檢測在血液檢測中均有重要的作用，在臨床上各類細胞的檢測值對于患者的診斷與治療均有重要意義[1-3]。參考區間是一種供醫學臨床上對患者疾病與身體狀況做出準確評估的一個依據，在國內已出臺了關于成人的白細胞各參數的參考區間，而對于兒童的白細胞參考區間一直在引用成人的區間范圍。因兒童處于生長發育階段，使兒童的白細胞各參數值處于一種不穩定狀態，且目前在國內對于兒童白細胞各參數參考區間的指導沒有統一的標準[4-5]。本研究通過對上海市寶山區2～6歲的健康兒童白細胞參數的參考區間進行統計、分析與研究，為本地區兒童白細胞參數的參考區間提供一定的臨床指導，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取上海市寶山區2019年4～8月進行幼托體檢的18 501例2～6歲健康兒童作為研究對象。納入標準：①經臨床體檢所有兒童均發育正常；②經測量兒童的體溫均≤37.5℃。排除標準：①在近2周內有發熱、服藥史的兒童；②依從性較差的兒童。將18 501例健康兒童按不同年齡段分為5組，其中男童9 199 例，女童9 302 例；年齡2～6 歲，平均(5.0±1.0)歲；2 歲474 例，3 歲4 575 例，4 歲5 234 例，5 歲4 718 例，6歲3 500例。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，兒童家屬均知情并簽署同意書。

1.2 檢測方法 對所需的儀器進行校準檢驗，確定其結果均在范圍內后再進行使用，采用Sysmex XS 500i全自動血細胞分析儀及原裝配套試劑，原廠校準品和質控品(日本Sysmex 公司)，嚴格按照《上海市醫療機構臨床實驗室質量管理規范》[6]進行手指末梢血采集，所有兒童均在無名指末梢利用微量吸管采集兒童末梢血80 μL，然后加入含有EDTA-K2 抗凝劑的離心管中，將其充分混和至均勻。血細胞分析檢測由兩名熟練的醫護人員嚴格按要求進行操作，所有標本均在4 h 內完成。檢測指標包括白細胞計數、中性粒細胞百分率、淋巴細胞百分率、單核細胞百分率、嗜酸性粒細胞百分率、嗜堿性粒細胞百分率。

1.3 觀察指標 (1)比較不同性別兒童白細胞計數、中性粒細胞百分率、淋巴細胞百分率、單核細胞百分率、嗜酸性粒細胞百分率、嗜堿性粒細胞百分率。(2)比較2～6 歲健康兒童各年齡組間末梢血白細胞計數及其分類的參考區間。(3)比較本次調查地區2～6歲正常兒童末梢血白細胞計數及其分類分析結果與第八版諸福棠實用兒科學參數。(4)驗證本次調查的末梢白細胞計數及其分類的參考區間。

1.4 統計學方法 應用SPSS25.0 統計軟件進行數據分析。采用Mann-Whitney 非參數檢驗進行兩個獨立樣本間的結果分析，采用Kruskal-Wallis H非參數檢驗對5 個年齡段進行多個獨立樣本間的結果分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同性別兒童間的各種參數比較 采用Mann-Whitney 非參數檢驗進行兩個獨立樣本間的結果分析，男女兩組間白細胞計數、中性粒細胞百分率和嗜堿性細胞百分率比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，而淋巴細胞百分率、單核細胞百分率、嗜酸性粒細胞百分率男女兩組間比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。其中淋巴細胞百分率女性明顯高于男性，單核細胞百分率和嗜酸性粒細胞百分率男性明顯高于女性，見表1。

表1 不同性別兒童間的各參數比較

2.2 2 ～6歲健康兒童各年齡組間末梢血白細胞計數及其分類的參考區間比較 采用Kruskal-Wallis H非參數檢驗對5個年齡段進行多個獨立樣本間的結果分析，所有參數的年齡組間比較，除了白細胞計數和嗜堿性粒細胞百分率外，其他各參數比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。再進一步對各年齡組分別進行Mann-Whitney 的分析，從2～3 歲開始，如果兩組間相比差異無統計學意義(P＞0.05)，則將兩組數據進行合并，并與4歲組進行比較，直至將各年齡組六項參數全部完成比較。最后將各年齡組根據比對結果進行分組劃分，同時考慮到性別對白細胞計數、中性粒細胞百分率和嗜堿性細胞百分率無顯著性影響，故在這三項參數的年齡分組中不考慮性別的分組，而性別間淋巴細胞百分率、單核細胞百分率、嗜酸性粒細胞百分率比較差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 2～6歲健康兒童各年齡組間末梢血白細胞計數及其分類的參考區間

2.3 本調查地區2～6歲正常兒童末梢血白細胞計數及其分類分析結果與第八版諸福棠實用兒科學的參數比較 本次調查地區2～6歲兒童末梢血白細胞計數及其分類結果與第八版《諸福棠實用兒科學》提供的參考區間相比，白細胞計數等6 項參數差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 本調查地區2～6 歲正常兒童末梢血白細胞計數及其分類分析結果與第八版諸福棠實用兒科學的參數比較

2.4 本調查的末梢白細胞計數及其分類參考區間進行小樣本驗證情況 應用本次調查的末梢白細胞計數及其分類參考區間進行小樣本驗證，按照篩選標準，從參加幼托體檢補檢的2～6 歲兒童中選出任意20 例，將這20例標本的測定值與需驗證的參考區間比較，落在參考區間外的測定值＜1個。本次調查的末梢血血細胞分析參考區間的技術要求及操作過程符合我國衛生部行業標準(WS/T 402-2012)文件要求。

3 討論

血常規檢測是兒童醫院在臨床上常用的檢測指標，白細胞計數作為血常規檢測的指標之一，其在臨床上常被用于對疾病的診斷、治療與評估，尤其是在兒科發熱門診中具有重要的作用，它能對病毒性或細菌性的感染做出判斷[7]。白細胞計數因受采集部位的不同、檢測方法的差異以及地區、民族、環境等因素的影響，使其參考區間存在一定的差異。因此，國際檢驗學與臨床化學共同提出了在條件允許的情況下，各地區可建立適合本地區人群的參考區間[8-9]。

近幾年，手指末梢血的采集因具有創傷小、方便快捷、疼痛小等優勢，在臨床上被廣泛應用。對于兒童手指末梢血白細胞計數的參考區間主要依據試劑盒說明書或相關的參考文獻，但在參考前需進行驗證[10]。兒童屬于特殊群體，處于生長發育的快速階段，其血液中的各項指標均會受到年齡、性別、地區等因素的影響。另有，兒童免疫系統也處于一種逐步完善的階段，從而使其白細胞分類指標也會隨著年齡的變化而變化，因此，在不同地區有必要建立符合本地區兒童白細胞計數的參考區間[11]。本研究結果顯示，在白細胞各參數中淋巴細胞百分率、單核細胞百分率、嗜酸性粒細胞百分率在不同性別中相比，差異有統計學意義，且在淋巴細胞百分率中，女童明顯高于男童，在單核細胞百分率和嗜酸性粒細胞百分率中，男童明顯高于女童；在白細胞各參數中除了白細胞計數和嗜堿性粒細胞百分率不受年齡的影響外，其他參數值均與年齡有一定的關聯。本次調查上海市寶山區2～6歲兒童末梢血白細胞計數及其分類結果與第八版《諸福棠實用兒科學》[12]提供的白細胞計數等6項參數的參考區間相比，差異均有統計學意義。這與之前陳興等[13]、劉佳麗等[14]的研究結果基本一致，均說明了兒童白細胞的部分參數值會受到性別、年齡等因素的影響，但年齡與性別對白細胞的各參數值均有一定的差異性。這可能是由于地域、研究對象的數量、檢測系統、采血方式的不同所造成的差異性。再有，本研究只局限于上海市寶山區，具有一定的局限性，對其他地區不一定適用，且所研究的對象為2～6歲兒童，而對其他年齡段兒童的研究還需進一步探討。通過調查研究發現，影響兒童白細胞計數及其分類參考區間的因素是多方面的，在醫學上有必要在各地區建立一套適合自身的參考區間。隨著檢測系統與技術的不斷更新與完善，建立符合本地區白細胞分類的參考區間，對于本地區兒童血常規檢測對相關疾病的診斷與治療具有重大意義[15]。

綜上所述，在對兒童性別、年齡與臨床需求的基礎上給予充分考慮，實驗室根據自身的檢測系統，建立一套適應自己醫院在臨床診斷中所需求的白細胞計數及其分類的參考區間，具有重大的臨床意義。