氣相色譜-質譜法檢測中藥液袋中16 種鄰苯二甲酸酯

王小艷，張 濤

（河南省安陽市食品藥品檢驗檢測中心，河南 安陽 455000）

鄰苯二甲酸酯（PAEs）又稱增塑劑，能增強塑料的韌性及塑性，降低加工溫度，性能優異，與乙烯基及其他聚合物相容性良好，已廣泛應用于聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）、聚乙酸乙烯酯（PVA）等塑料包裝。塑料藥品包裝材料（簡稱藥包材）如聚丙烯（PP）、聚對苯二甲酸乙二醇酯（PET）、PVC 等也常使用增塑劑，以提高包裝的靈活性、柔韌性和彈性［1-3］，而塑料藥包材中殘留的增塑劑會釋放到藥物中造成污染。由于PAEs 在人體和動物體內發揮著類似雌激素的作用，可能會干擾內分泌，使男子精液量和精子數量減少，嚴重的還會導致睪丸癌，也可能增加女性肥胖和患乳腺癌的風險，還可能造成兒童性早熟［4-8］。歐盟、美國、世界衛生組織、日本、中國都先后將PAEs 列入“優先控制污染物名單”，并禁用或限用相關PAEs。本研究中參照2015年版《中國藥典（四部）》附錄9101 藥品質量標準分析方法驗證指導原則和文獻［9-16］，采用氣相色譜-質譜（GC-MS）法測定中藥液袋中16種PAEs。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 7890B - 7010B 型串聯四極桿氣質聯用儀（美國Agilent公司）；Mettler XP205型電子天平（梅特勒-托利多集團有限公司，精度為0.01 mg）；1820V 型純水機（重慶摩爾水處理設備有限公司）；Sigma 3 - 30K 型高速臺式冷凍離心機（德國Sigma公司）。

1.2 試藥

16 PAEs對照品溶液（美國First Standard公司，批號為S017205，質量濃度為100 μg/ mL）；磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸、三乙胺（分析純，天津科密歐化學試劑有限公司）；乙酸乙酯、正己烷、丙酮、二氯甲烷（色譜純，天津市科密歐化學試劑有限公司）；甲醇（色譜純，美國J. T. Baker 公司）；中藥液袋（市售，編號分別為樣品1至樣品8）。

2 方法

2.1 試驗條件

2.1.1 色譜條件

色譜柱：Agilent HP - 5MS 型彈性石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；進樣口溫度：280 ℃，不分流進樣；進樣量：1 μL；程序升溫：初始溫度為60 ℃、保持1 min，以20 ℃/ min 的速率升至220 ℃、保持1 min，再以5 ℃/min 的速率升至280 ℃、保持4 min；載氣：高純氦氣；載氣流速：1.0 mL/min。

2.1.2 質譜條件

電子轟擊離子源（EI），溫度為280 ℃；GC-MS輔助加熱溫度：280 ℃；四極桿溫度：150 ℃；溶劑延遲：6 min；掃描模式：選擇離子監測（SIM），1個定量離子，2個定性離子，分時段檢測。16 種PAEs 的信息及GC - MS 測定參數見表1。

表1 16種PAEs的信息及GC-MS測定參數Tab.1 Information of 16 kinds of PAEs and GC-MS determination parameters

2.2 溶液制備

混合對照品溶液：精密量取16 PAEs 對照品1 mL，置10 mL容量瓶中，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液（質量濃度為10 μg/mL），分別精密量取對照品貯備液適量，加正己烷稀釋，搖勻，用0.22 μm微孔濾膜濾過，即得。

供試品溶液：將中藥液袋洗凈，干燥，粉碎至大小約為0.2 cm×0.2 cm 樣品，取1.0 g，精密稱定，置三角瓶中，加入25 mL 正己烷，超聲提取（功率為250 W，頻率為33 kHz）30 min，于陰涼處放置24 h。將提取液過濾至50 mL 容量瓶中，濾渣用適量正己烷洗滌3 次，合并提取液，用正己烷稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 mL，氮氣吹干，殘渣加2 mL 正己烷溶解，用0.22 μm 微孔濾膜濾過，即得。

2.3 方法學考察

專屬性試驗：取2.2 項下混合對照品溶液，按2.1項下試驗條件進樣測定，提取每個峰的質譜圖，再在NIST 譜庫中檢索、確認。16 種PAEs 的總離子流色譜圖見圖1。

線性關系考察：分別取2.2項下系列混合對照品溶液，在2.1 項下試驗條件進樣測定7 次，以質量濃度（C，ng/mL）為橫坐標、PAEs 的峰面積（A）為縱坐標進行線性回歸。結果見表2。

檢測限與定量限確定：取2.2項下混合對照品溶液適量，用正己烷逐級稀釋，按2.1 項下試驗條件進樣測定，記錄16 種PAEs 的信噪比（S/N），以S/N為3∶1 時的質量濃度為檢測限，以S/N為10∶1 時的質量濃度為定量限。結果見表2。

精密度試驗：取質量濃度為10 ng/mL的混合對照品溶液，按2.1項下試驗條件進樣測定6次，記錄峰面積，計算相對標準偏差，結果見表2。表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取質量濃度為4 ng/ mL 的混合對照品溶液，分別于0，3，6，9，12，20，24 h時按2.1項下試驗條件進樣測定，記錄峰面積，計算日內相對標準偏差。結果見表2。表明混合對照品溶液在常溫下24 h 內穩定性良好。

表2 16種PAEs的方法學考察結果Tab.2 Results of methodology investigation of 16 kinds of PAEs

加樣回收試驗：取樣品50.5 g，精密稱定，按2.2 項下供試品溶液制備方法制備溶液，每個質量濃度平行3 份。按2.1 項下試驗條件進樣測定，并計算回收率。結果見表2。

2.4 樣品含量測定

取樣品1 至樣品8 各適量，按2.2 項下方法制備供試品溶液，按2.1 項下試驗條件進樣測定，并計算樣品含量。結果見表3。

表3 樣品含量測定結果（μg/g）Tab.3 Results of content determination of PAEs in samples（μg/g）

3 討論

3.1 提取溶劑選擇

樣品前處理時，分別以乙酸乙酯、正己烷、丙酮、二氯甲烷、甲醇為提取溶劑，結果甲醇因干擾過大而被排除，其余4 種提取溶劑均檢測出DIBP 和DBP。最終選取干擾相對較小的正己烷作為提取溶劑，并在批處理中排除了空白干擾。

3.2 提取方法選擇

分別以16 種PAEs 的含量為指標，考察了回流（20，30，40，60 min）提取和超聲（20，30，40 min）提取的提取效果。結果超聲提取30 min 后于陰涼處放置24 h 時，16種PAEs的含量均最高，并能提取完全。

3.3 方法評價

本試驗中所建立的中藥液袋中16種PAEs的GC-MS檢測方法簡單、靈敏，定性、定量測定結果準確，可滿足藥包材中多種PAEs 的定性、定量測定要求，為完善藥包材的質量控制提供了可靠依據，我國尚無標準規定PAEs 在藥包材中允許檢出量，本次收集的8 批中藥液袋中均檢測出了增塑劑DIBP（0.03～1.81 μg/g）、DBP（0.28～2.54 μg/g）和DEHP（0.14～7.12 μg/ g）。建議在生產加工及包裝時，使用合格的藥包材，以降低PAEs 帶來的風險，保障人民群眾的用藥安全。