氣相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜法測定果蔬中四聚乙醛殘留量

駱 燦，龔麗婷，鄭 剛，姚菲菲，陶志成

（1.杭正檢測集團有限公司，浙江 杭州 310000；2.浙江金正檢測有限公司，浙江 金華 322000）

四聚乙醛，又名蝸牛敵，常被用于防治諸如蛞蝓、蝸牛等軟體動物[1-2]。由于四聚乙醛導(dǎo)致的人畜中毒的事情時有發(fā)生，為了保障食品安全我國制訂了《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）。該標準規(guī)定了四聚乙醛在不同種類果蔬中的最大殘留限量，其中番茄的最大殘留量為0.5 mg·kg-1，莖用萵苣葉和茼蒿的最大殘留限量為10 mg·kg-1，獼猴桃和火龍果的最大殘留限量為0.1 mg·kg-1[3]。

文獻報道中關(guān)于檢測食品中四聚乙醛殘留量的方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等[4-5]。鑒于目前QuEChERS前處理方法在食品檢測中的廣泛應(yīng)用，本文采用基于QuEChERS 凈化結(jié)合氣相色譜質(zhì)譜法（Gas Chromatography Mass Spectrometry，GC-MS/MS）以檢測果蔬中的四聚乙醛殘留量，對樣品提取、凈化和檢測條件進行優(yōu)化，建立一種簡單快速的適用于檢測果蔬中四聚乙醛殘留量的GC-MS/MS 法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

8890-7000D 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國Agilent 公 司）；19091S-433UI HP-5MS 色譜柱 （30 m×0.25 mm，0.25 μm，美國Agilent 公司）。SFTDL-6A 離心機（上海菲恰爾分析儀器有限公司）；MS 3 basic 振蕩器（IKA 公司）；四聚乙醛標準品（99.4%，BePure）；乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈（色譜純）；氯化鈉（分析純）；QuEChERS 試劑盒（885 mg硫酸鎂+150 mg PSA+15 mg GCB）。

1.2 方法

1.2.1 儀器條件

色譜條件：色譜柱Agilent 19091S-433UI HP-5MS Ultra Inert（30 m×0.25 mm，0.25 μm）； 程序升溫：50 ℃保持2 min，以20 ℃·min-1的升溫速率升至 160 ℃后，再以40 ℃·min-1的升溫速率升至280 ℃保持1 min；進樣口溫度：200 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；載氣：氦氣（99.999%），流速1.0 mL·min-1；進樣量：1 μL；進樣方式：不分流進樣。

質(zhì)譜條件：離子源(Xtr EI)；離子源溫度：280 ℃；電子轟擊源：70 eV；四極桿溫度：150 ℃；碰撞氣流量：1.50 mL·min-1；猝滅流量：2.25 mL·min-1；溶劑延遲：5 min；模式：多反應(yīng)監(jiān)測MRM 模式采集。采集條件如下：定量離子對89.0/45.1，碰撞能量15 eV，定性離子對131.0/42.8，碰撞能量15 eV，定性離子對45.0/43.0，碰撞能量15 eV。

1.2.2 樣品前處理

取10 g（精確至0.01 g）均質(zhì)后的樣品于50 mL離心管中，加入6 g NaCl，加入20 mL 乙腈+乙酸 乙 酯（3+1），渦 旋振蕩2 min，5 000 r·min-1離心5 min。吸取上清液8 mL 加到內(nèi)含885 mg 硫酸鎂+150 mg PSA+15 mg GCB 的離心管中，渦旋混勻 1 min，4 200 r·min-1離心5 min，取上清液過微孔濾膜（0.22 μm），用于測定。

1.2.3 標準曲線

稱取適量四聚乙醛標準品，先用少量二氯甲烷溶解，再以乙腈+乙酸乙酯（3+1）將其配制成 100 μg·mL-1的單標儲備液，避光冷藏保存，按需使用；以按上述前處理方法處理得到的基質(zhì)空白溶液將標準品稀釋成0.004 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、 0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1、0.200 μg·mL-1和 0.500 μg·mL-1的基質(zhì)標準工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2.4 添加回收實驗

對小青菜、西紅柿、韭菜、蘋果、棗和蜜桔進行添加回收實驗，添加濃度為0.01 mg·kg-1、 0.10 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1。取樣后添加適量標液混勻靜置0.5 h 后，再對樣品進行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器條件的選擇

對于四聚乙醛化合物，經(jīng)過質(zhì)譜優(yōu)化后，確定儀器條件見1.2.1，采用上述儀器條件對四聚乙醛進行樣品中的定性定量測定，四聚乙醛的標準溶液質(zhì)譜圖見圖1。由譜圖可見，出峰時間為6.216 min，峰形較好。

圖1 四聚乙醛的標準溶液質(zhì)譜圖

2.2 前處理的選擇與優(yōu)化

目前，乙腈和乙酸乙酯作為提取溶劑在農(nóng)藥提取中已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用，因此本研究選擇乙酸乙酯和乙腈作為提取溶劑。在考察了乙腈、乙酸乙酯、乙腈+乙酸乙酯（1+1）和乙腈+乙酸乙酯（3+1）4 種溶劑的提取效果后，發(fā)現(xiàn)乙腈+乙酸乙酯（3+1）的提取效果最好。故本研究采用了乙腈+乙酸乙酯（3+1）作為提取溶劑。

在比較了不同凈化手段（LC-NH2/Envi-carb 固相萃取柱、弗羅里硅土柱、QuEChERS 試劑盒）的回收率之后，對加標量為0.50 mg·kg-1的樣品進行試驗。結(jié)果表明，采用LC-NH2/Envi-carb 固相萃取柱凈化的樣液回收率為83%，采用弗羅里硅土柱凈化的樣液回收率為82%，采用QuEChERS 凈化的樣液回收率為105%，回收率均滿足要求，但考慮到操作的簡單快速，本研究選擇QuEChERS 凈化作為凈化 手段。

2.3 添加回收率

采用陰性樣品添加標液的方法，分別對小青菜、西紅柿、韭菜、蘋果、棗和蜜桔進行添加回收實驗，添加濃度為0.01 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1。按照1.2.2 方法提取，GC-MS/MS 測定，計算添加回收率，結(jié)果見表1。

結(jié)果表明，四聚乙醛在0.004 ～0.500 μg·mL-1線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.999，加標試驗平均回收率在84%～113%，RSD 在0.91%～7.84%，檢出限為0.002 mg·kg-1（S/N=3）。

3 結(jié)論

本文建立了一種樣品前處理簡單快速，方法靈敏度和選擇性高，重復(fù)性好，能夠滿足快速檢測果蔬中四聚乙醛殘留量的氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。與文獻方法相比，本法在保證高靈敏度和準確性的同時，盡可能簡化了前處理，提高了工作效率，為快速測定果蔬中四聚乙醛殘留量的研究提供了數(shù)據(jù) 基礎(chǔ)。