中美現行藥典無菌檢查法比對

李玉立，江志杰，劉文杰，張光華

（北京市藥品檢驗研究院·北京市疫苗檢驗中心·國家藥品監督管理局仿制藥研究與評價重點實驗室·中藥成分分析與生物評價北京市重點實驗室，北京 102206）

無菌檢查法是針對無菌工藝產品和最終滅菌產品的無菌性而建立的檢查法，1936 年版《美國藥典》第十一章開始引用單個培養基的直接接種法進行無菌檢查，1953年版《中國藥典》收載了“藥品的滅菌檢查法”［1］。鑒于《中國藥典》無菌檢查法與國際通用標準在檢查理念、培養體系、方法要求等諸多方面存在顯著差異，《中國藥典》于2015年版開始借鑒國外藥典先進技術經驗，以新的控制理念為指導，在檢測范圍及環境要求、培養體系、方法適用性等方面作了較大修訂，逐步與國際通用標準一致［2］。2020 年版《中國藥典（四部）》參考人用藥品注冊技術要求國際協調會（ICH）協調案和相關國內外標準，結合我國醫藥產業實際情況和技術進步要求，進一步細化了無菌檢查法的通用性和規范性要求，明確了環境監控的范圍，修訂了培養基的保存和使用時限及無菌檢查法的關鍵操作步驟等［3-4］，從而使該版《中國藥典（四部）》的無菌檢查法［5］與ICH 協調案框架下的《美國藥典》《歐洲藥典》《英國藥典》《日本藥典》進一步接軌。由于以上4 部國外藥典已通過ICH 完成協調，主要技術基本一致，因此，現僅以網絡最新（截至發稿時）版《美國藥典·國家處方集》（USP-NF2021）無菌檢查法所載內容及要求為參考，并將2020年版《中國藥典（四部）》與之進行比對，為相關從業人員無菌操作及質量控制等工作提供借鑒。

1 USP-NF2021 無菌檢查法主要內容

USP-NF2021 通則<71>無菌檢查法章節及主要內容見表1，表中注1～注14 為與2020 年版《中國藥典（四部）》存在差異的版塊，后續進行詳細比對。

表1 USP-NF2021無菌檢查法主要內容Tab.1 Main contents of sterility test methods in USP-NF2021

2 中美現行藥典比對

2.1 方法的差異

2020年版《中國藥典（四部）》與USP-NF2021無菌檢查法方法的差異見表2。

表2 中美現行藥典無菌檢查法方法差異Tab.2 Differences of sterility test methods between Chinese Pharmacopeia and United States Pharmacopeia

續表2 中美現行藥典無菌檢查法方法差異Continued Tab.2 Differences of sterility test methods between Chinese Pharmacopeia and United States Pharmacopeia

2.2 要求的差異

陽性對照試驗：USP-NF2021 規定，在方法驗證時進行陽性對照試驗，常規檢驗僅求陰性對照試驗，未明確要求進行陽性對照試驗；2020 年版《中國藥典（四部）》要求每批次檢驗時均需進行陽性對照試驗。USPNF2021 認為，通過方法適用性試驗即可確認該產品無菌檢查方法符合要求，后續常規檢驗中無須每批次進行陽性對照確認，定期進行確認即可。2020 年版《中國藥典（四部）》則規定，應同時進行供試品的陽性對照試驗。通過對成品每次無菌檢驗的陽性試驗的確認，其作用相當于一次現時的、小規模的培養基靈敏度檢查和方法適用性試驗［1］，更有助于確認試驗條件的符合性和檢驗結果的準確性。

方法適用性試驗：USP - NF2021 要求，對于有抑菌性的供試品，沖洗不超過5 次，試驗菌不生長即認為“不污染”，認可供試品的抑菌性對試驗菌的抑制作用。2020 年版《中國藥典（四部）》則要求，對于有抑菌性的供試品，必須通過增加沖洗次數及加入中和劑等方法去除供試品的抑菌性，使對應試驗菌生長。USP - NF2021 認可供試品的抑菌性可抑制對應試驗菌，2020 年版《中國藥典（四部）》則要求去除供試品的抑菌性以確保抑菌性對潛在其他敏感菌抑制，更注重全面的無菌狀態監測。這種差異可能與國內外醫藥工業體系的成熟度相關，2020 年版《中國藥典（四部）》的要求可以更全面地監控產品真實無菌狀態。

小劑量注射劑無菌檢查［14］：USP - NF2021 不要求對小劑量注射劑進行稀釋，而是直接進行薄膜過濾培養。國內對小劑量注射劑的無菌檢查均采用0.9%無菌氯化鈉溶液等進行稀釋后進行薄膜過濾培養。由于國外藥典常規檢驗不進行陽性對照，每批樣品沖洗到2個薄膜上進行培養，國內每批樣品需進行陽性對照試驗，每批樣品需沖洗到3個薄膜上進行培養，為了確保每個薄膜樣品的一致性，需對小劑量注射劑進行稀釋，以使3 個薄膜上的供試品具有較好的均一性，以確保陽性對照試驗結果的可靠性。

3 藥典無菌檢查法修訂建議

USP-NF2021與2020年版《中國藥典（四部）》的無菌檢查部分均未規定沖洗時的流速，基于長期試驗操作的經驗積累，過快的沖洗流速會損傷微生物，從而導致檢驗結果不能反映供試品真實的無菌狀態。因此，建議未來修訂本國藥典時，增加對沖洗流速的相關要求，以更準確地體現產品真實的無菌狀態。