云南省文山州地區(qū)豬戊型肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查

左永光，楊廷環(huán)，李蛟龍

（1.云南省富寧縣洞波鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，云南 文山壯族苗族自治州 663404；2.云南省硯山縣維摩鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，文山壯族苗族自治州 663199；3.云南省丘北縣曰者鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，文山壯族苗族自治州 663215）

戊型肝炎（Hepatitis E, HE）是由戊型肝炎病毒（Hepatitis E Virus, HEV）引起的一種急性病毒性肝炎，主要通過(guò)糞-口途徑傳播的重要的人畜共患傳染病[1-2]。20世紀(jì)70年代該病在印度克什米爾地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)，戊型肝炎在發(fā)展中國(guó)家呈流行形勢(shì)，而在發(fā)達(dá)國(guó)家則呈散發(fā)性流行[3]。20世紀(jì)80年代在我國(guó)新疆地區(qū)首次暴發(fā)戊型肝炎，近年來(lái)，在四川[4]、廣東[5]、上海[6]、重慶[7]、西藏[8]等地區(qū)都有豬戊型肝炎流行情況的報(bào)道。有研究發(fā)現(xiàn)，豬中的戊型肝炎病毒感染率高達(dá)70%以上[9]。

為了解文山州地區(qū)豬戊型肝炎病毒的感染情況，以期為此類疫病防控提供參考。筆者采集了文山州8個(gè)縣市2 548份健康豬的血液樣品，采用ELISA方法對(duì)豬戊型肝炎病毒的感染情況進(jìn)行調(diào)查，并對(duì)不同養(yǎng)殖方式、不同地區(qū)、不同類別豬群的豬戊型肝炎病毒感染情況進(jìn)行比較分析。

1 材料與方法

1.1 血清樣品

2021年4—11月期間共采集到文山州8個(gè)縣市的血清樣品2 548份，其中規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)42戶978份，散養(yǎng)戶279戶438份，在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院進(jìn)行檢測(cè)。采集分離到的血清放置于EP管內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 主要試劑和儀器

豬戊型肝炎病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自百沃特（天津）生物技術(shù)有限公司。全自動(dòng)酶標(biāo)儀購(gòu)自賽默飛世爾（上海）儀器有限公司，恒溫水浴鍋、37 ℃恒溫箱、微量移液槍等。

1.3 豬血清戊型肝炎病毒抗體檢測(cè)

采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）測(cè)定血清樣本中豬戊型肝炎病毒（HEV）。用純化的戊型肝炎病毒抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中戊型肝炎病毒相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的戊型肝炎病毒抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定血清樣品中是否存在豬戊型肝炎病毒。

1.4 結(jié)果判定

陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00，陰性對(duì)照平均值≤0.10方能判定試驗(yàn)有效。臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15，樣品OD值<臨界值為戊型肝炎抗體陰性；樣品OD值≥臨界值為戊型肝炎抗體陽(yáng)性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同養(yǎng)殖方式的豬戊型肝炎抗體檢測(cè)結(jié)果

本次試驗(yàn)共檢測(cè)了2 548份血清樣品，共檢測(cè)出陽(yáng)性數(shù)470份，總陽(yáng)性率為18.45%。其中規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的樣品數(shù)1 376份，陽(yáng)性數(shù)為287份，陽(yáng)性率為20.86%；散養(yǎng)戶的樣品份數(shù)為1 172份，陽(yáng)性數(shù)為183份，陽(yáng)性率為15.61%。規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的陽(yáng)性率高于散養(yǎng)戶（表1）。

表1 文山州地區(qū)不同養(yǎng)殖方式豬戊型肝炎的血清抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同類別豬群的豬戊型肝炎的感染情況

不同類別豬群的豬戊型肝炎的感染狀況存在著一定的差異，其中母豬的陽(yáng)性率最高為27.61%（209/757），公豬的陽(yáng)性率最低為11.45%（56/489），仔豬的陽(yáng)性率為15.75%（205/1 302），見表2。

表2 文山州地區(qū)不同類別豬群豬戊型肝炎的血清抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 不同地區(qū)的豬戊型肝炎的感染情況

不同地區(qū)的豬戊型肝炎的感染情況存在著一定的差異，其中D縣血清樣品抗體陽(yáng)性率為25.69%（65/253），E縣的血清抗體陽(yáng)性率最低為12.43%（43/346），見表3。

表3 文山州不同地區(qū)豬戊型肝炎的血清抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討論

本次調(diào)查對(duì)文山州地區(qū)的2 548份健康豬的血清樣品進(jìn)行了血清學(xué)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)被調(diào)查的規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶的豬戊型肝炎抗體陽(yáng)性率為18.45%，表明在文山州地區(qū)存在著豬戊型肝炎流行的情況。對(duì)比云南省不同地區(qū)的豬群戊型肝炎調(diào)查，2009年李文貴等[10]報(bào)道了云南省部分地區(qū)的豬戊型肝炎抗體陽(yáng)性率為64.4%。2012年黃芬等[11]對(duì)云南某農(nóng)村豬戊型肝炎分子流行病學(xué)調(diào)查中檢測(cè)陽(yáng)性率為10.26%。2015年嚴(yán)紅亞等[12]對(duì)云南省部分豬場(chǎng)豬戊型肝炎檢測(cè)體抗體陽(yáng)性率為12.7%。2018年艾志瓊等[13]對(duì)大理地區(qū)屠宰生豬的戊型肝炎病毒的流行病學(xué)調(diào)查抗體陽(yáng)性率為23.7%。2020年王源等[14]對(duì)昆明市某豬場(chǎng)豬戊型肝炎病毒流行情況調(diào)查中陽(yáng)性率為38.9%。與本次試驗(yàn)中云南省文山州部分地區(qū)流行情況相比陽(yáng)性率存在一定的差異。這說(shuō)明云南省豬戊型肝炎的流行情況呈一定的流行趨勢(shì)且存在一定的地域差異。

本次共調(diào)查了文山州8個(gè)縣市的2 548份血清樣品。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在文山州部分地區(qū)均有陽(yáng)性檢出，不同地區(qū)陽(yáng)性率存在一定差異的，其中D地區(qū)陽(yáng)性率較高，為25.69%，而E地區(qū)陽(yáng)性率最低，僅為12.43%。抗體陽(yáng)性率的地區(qū)差異可能與不同地區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶的飼養(yǎng)環(huán)境、日常飼養(yǎng)管理水平、生物安全防護(hù)措施等多種因素有關(guān)。

此外，本次試驗(yàn)共檢測(cè)了2 548份血清樣品，共檢測(cè)出陽(yáng)性數(shù)470份。其中規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的樣品數(shù)1 376份，陽(yáng)性數(shù)為287份，陽(yáng)性率為20.86%；散養(yǎng)戶的樣品數(shù)為1 172份，陽(yáng)性數(shù)為183份，陽(yáng)性率為15.61%。規(guī)模化豬場(chǎng)陽(yáng)性率高于散養(yǎng)戶，其原因可能與規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)養(yǎng)殖密度大，豬群接觸傳播的可能性增加等有關(guān)，說(shuō)明規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)該病的重點(diǎn)防控；不同類別豬群的豬戊型肝炎的感染狀況存在著一定的差異，其中母豬的陽(yáng)性率最高為27.61%，其次是仔豬的陽(yáng)性率為15.75%，公豬的陽(yáng)性率為11.45%，母豬的抗體陽(yáng)性率較高的原因可能是由于母豬和公豬的飼養(yǎng)周期較長(zhǎng)，增加了感染的幾率，這說(shuō)明在平時(shí)防控豬戊型肝炎時(shí)應(yīng)重點(diǎn)防治母豬和仔豬。目前，豬戊型肝炎病毒垂直傳播還未見報(bào)道，但本次調(diào)查中仔豬的抗體陽(yáng)性率較高，很可能是由于仔豬受母源抗體的影響，這與檢測(cè)到母豬血清中豬戊型肝炎病毒抗體陽(yáng)性率較高相符。

綜上所述，文山州地區(qū)豬戊型肝炎病毒抗體陽(yáng)性率較高，需要加強(qiáng)對(duì)豬群密切接觸者如獸醫(yī)、飼養(yǎng)員等的豬戊型肝炎病毒感染情況的研究。本實(shí)驗(yàn)室將進(jìn)一步開展戊型肝炎病毒抗體監(jiān)測(cè)，為更好地防止該病蔓延、跨種間傳播提供更多防治依據(jù)。