2018—2020年新疆地區肥育豬主要病毒性傳染病的抗體檢測與分析

常軍帥，程露露，楊盛源，屈勇剛，梁 晏，李 娜，陳 寧，黨瑞瑩，邱國斌

（1.石河子大學動物科技學院，新疆 石河子 832003；2.動物疾病防控兵團重點實驗室，新疆 石河子 832003；3.第四師畜牧獸醫站，新疆 可克達拉 831304）

肥育豬通常指體重30 kg以上的商品豬群，可細分為肥育前期（30～60 kg）和肥育后期（60 kg以上）[1]。肥育豬是生豬養殖的最后階段，要想獲得更高的經濟效益，就要提高存活率，降低料重比，用最短的時間、最低的成本來完成肥育豬的飼養過程。該階段豬群的消化系統、免疫系統逐漸完善，對疾病的抵抗力也在不斷增強。肥育豬患病后死亡率低，但造成的料重比增高，嚴重影響了豬場的經濟效益，并且患病豬長期向外排毒，威脅其他豬群健康。在生產中，危害肥育豬健康的主要為病毒性傳染病：偽狂犬病（Pseudorabies，PR），其病原體為偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV），肥育豬患病后只有輕微的呼吸系統癥狀，體溫略有升高，2～3 d可自愈，經常被誤診為豬流感，患病豬長期向外排毒[2]；豬圓環病毒病（Porcine circovirus diseases,PCVD），主要是由豬圓環病毒2型（Porcine circovirus type 2, PCV2）引起，通過感染肥育豬淋巴結，降低機體免疫系統，感染PCVD后常繼發其他疾病或加重已患病的臨床癥狀，嚴重影響了疫苗免疫效果；豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），其主要特點是導致呼吸道疾病和繁殖障礙，其病原為豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV），肥育豬患病呈一過性反應，臨床可見呼吸急促、咳嗽、腹瀉、體溫升高等癥狀，采食量減少，料重比增高[3]；豬瘟（Classical swine fever, CSF） ，是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病，世界動物衛生組織（Office International Des Epizooties, OIE）將CSF列為必須上報的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病，肥育豬患病后高燒不退、便秘、皮膚呈出血點，實質性器官發生病變[4]。因此，為預防各種病毒性傳染病帶來的危害，生產中常采用疫苗免疫來保障豬群健康。

為監測豬群抗體水平，以便定期調整免疫程序，生產中常采用酶聯免疫吸附法（ELISA）進行抗體檢測。該方法具有很高的特異性和靈敏度，可在短時間內大批量檢測血清樣品，已被列為標準方法，在許多國家使用[4]。本試驗采用ELISA方法對采集到的216份肥育豬血清進行了PRV-gB、PRV-gE、PCV2、PRRSV、CSFV的抗體檢測，以期為該區的肥育豬的健康養殖提供幫助。

1 材料

1.1 樣品

2018年1月至2020年12月期間從新疆石河子市、巴音郭楞蒙古自治州、伊犁、塔城地區、奎屯市、阿克蘇市，隨機采集肥育豬216份血清樣品，送至石河子大學動物科技學院傳染病實驗室進行檢測。

1.2 材料和儀器

豬瘟病毒（CSFV）ELISA抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病病毒gB（PRV-gB）ELISA抗體檢測試劑盒、藍耳病病毒（PRRSV）ELISA抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病病毒gE（PRV-gE）ELISA檢測試劑盒均購自北京愛德士元亨生物科技有限公司；豬圓環病毒2型（PCV2）ELISA抗體檢測試劑盒，購自哈爾濱元亨生物藥業有限公司；獸用一次性采血器5 mL為美康實業有限公司產品；自動酶標儀、微量移液器購自賽默飛世爾科技公司。

2 方法

2.1 樣品處理

將肥育豬固定好后，使用酒精棉球對前腔靜脈窩消毒，采集5 mL血液，室溫下斜置30 min，收集血清，放于4 ℃短期保存。

2.2 ELISA檢測方法

根據不同檢測項目的說明書，進行PRV-gB、PRV-gE、PCV2、PRRSV、CSFV的抗體檢測。注意各個檢測過程中的溫度及避光要求。

2.3 結果判定

PRV-gB、PRV-gE：當陰性OD650平均值-陽性OD650平均值≥0.3時，試驗成立。計算S/N。當S/N＞0.70時，為陰性；當0.60＜S/N≤0.70時，為可疑；當S/N≤0.60時，為陽性。

PCV2：試驗成立的條件是陰性對照的OD450均值≤0.15，陽性對照OD450均值≥0.60。計算臨界值，被檢樣品OD450值＜臨界值，判定為抗體陰性；被檢樣品OD450值≥臨界值，則判定為抗體陽性。

PRRSV：試驗成立后，計算S/P值。S/P≥0.40為陽性，S/P＜0.40判為陰性。

CSFV：試驗判定成立后，計算阻斷率。當阻斷率≤30%時，為陰性；當30%＜阻斷率＜40%時，為可疑；當阻斷率≥40%時，為陽性。

當出現可疑時，再次檢測。不符合陽性標準，統一安排陰性處理（PRV-gE相反）。

2.4 數據分析

使用SPSS 20.0對數據進行統計分析，計算總體平均數。

3 結果

3.1 PRV-gB抗體檢測結果

在2018—2020年中，新疆地區肥育豬整體PRV-gB抗體陽性率為90.68%（107/118），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gB抗體陽性率分別是100.00%（40/40）、80.00%（28/35）、90.70%（39/43）；平均S/N值為0.24。結果見表1。

表1 不同年份的肥育豬PRV-gB抗體檢測結果

3.2 PRV-gE抗體檢測結果

在2018—2020年中，新疆地區肥育豬整體PRV-gE抗體陽性率為17.80%（21/118），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gE抗體陽性率分別是12.50%（5/40）、11.43%（4/35）、27.91%（12/43）；平均S/N值為0.67。結果見表2。

表2 不同年份的肥育豬PRV-gE抗體檢測結果

3.3 PCV2抗體檢測結果

由表3可知，在2018—2020年中，新疆地區肥育豬整體PCV2抗體陽性率為90.22%（83/92），其中2018年、2019年、2020年的PCV2抗體陽性率分別是100.00%（9/9）、88.64%（39/44）、89.74%（35/39）。在平均OD450值中，2018年的最低，為1.40；2019年最高，為1.65。

表3 不同年份的肥育豬PCV2抗體檢測結果

3.4 PRRSV抗體檢測結果

由表4可知，在2018—2020年中，新疆地區肥育豬整體PRRSV抗體陽性率為84.26%（182/216），其中2018年、2019年、2020年的PRRSV抗體陽性率分別是100.00%（20/20）、100.00%（35/35）、78.88%（127/161）。在平均S/P值中，2020年的最低，為1.32；2019年最高，為3.12。

表4 不同年份的肥育豬PRRSV抗體檢測結果

3.5 CSFV抗體檢測結果

在2018—2020年中，新疆地區肥育豬整體CSFV抗體陽性率為85.34%（99/116），其中2018年、2019年、2020年的CSFV抗體陽性率分別是82.86%（29/35）、85.71%（30/35）、86.96%（40/46）。結果見表5。

表5 不同年份的肥育豬CSFV抗體檢測結果

4 討論與分析

4.1 肥育豬抗體整體分析

通過對2018—2020年新疆地區的肥育豬進行PRV、PCV2、PRRSV、CSFV的抗體檢測得出，這4種病毒性傳染病的抗體陽性率均超過了國家標準（70%），說明隨著豬只日齡增大，免疫系統逐漸完善，疫苗的免疫產生較高的抗體水平，對豬群起到了保護作用，減少了料重比的增加[5]。

4.2 肥育豬PRV抗體分析

呂遠蓉等[6]曾對四川省南充市規模化豬場的PRV-gB、PRV-gE抗體水平進行檢測，肥育豬的陽性率分別為67.50%（135/200）和28.50%（57/200）；張利平等[7]得出河南省肥育豬群的PRV-gB、PRV-gE抗體陽性率分別為92.59%（625/675）和38.07%（257/675），新疆地區肥育豬的PRV-gE抗體陽性率為17.80%（21/118），均低于上述地方，可能是由于各地飼養管理、疫苗免疫程序等不同所致，PRV-gE抗體陽性則表示豬群中存在PRV感染，生產中需及時淘汰陽性病豬，定期檢測，才可使豬場逐漸凈化PRV。新疆地區肥育豬的PRV-gB抗體陽性率為90.68%（107/118），低于河南省卻遠高于四川省南充市，需結合PRV-gE檢測結果來進行管理。

4.3 肥育豬PCV2抗體分析

在2018—2020年中，新疆地區肥育豬整體PCV2抗體陽性率為90.22%（83/92），免疫效果良好。PCV2為豬的免疫抑制性疾病，感染該病后常造成豬群免疫力下降，為其他病原入侵機體提供了機會。為提高免疫合格率，肥育豬還需科學飼養管理、做好日常清理工作、制定更合理的免疫程序、規范疫苗的儲存及運輸、正確選擇和使用疫苗[8]。

4.4 肥育豬PRRSV抗體分析

雖然肥育豬整體PRRSV抗體陽性率為84.26%（182/216），但2019年PRRSV的平均S/P卻高達3.12。ELISA抗體檢測的缺點在于不能區分是疫苗或野毒感染造成肥育豬存在的抗體，生產中可針對S/P過高的樣品進行抗原檢測分析，減少病毒存在傳播的機會[9]。

4.5 肥育豬CSFV抗體分析

在2018—2020年中，新疆地區肥育豬整體CSFV抗體陽性率分別是82.86%（29/35）、85.71%（30/35）、86.96%（40/46），呈逐步上升趨勢，說明該地區對CSF免疫工作重視。范慶紅[5]檢測得出山東省萊州市肥育豬CSFV抗體陽性率為83.22%（119/143），與本次結果基本一致，說明這兩地豬群得到了有效地保護。

4.6 肥育豬飼養管理措施

肥育豬科學飼養管理主要包括：在保育豬轉至肥育圈舍分圈密度要適宜，每頭豬最佳占地面積約1.6～2.0 m2；單個圈舍內豬只體重相差不超過5 kg；肥育豬怕熱，飼養溫度最好在18～22 ℃；定期驅蟲，一般在90日齡和145日齡驅蟲兩次；注意空氣流通，防止糞便堆積產生有害氣體損壞豬群呼吸系統；定期清理糞便，按時消毒。肥育豬群只有科學飼養管理，才會對疫苗產生良好的抗體。