中藥復方添加劑對生長肥育豬免疫功能和抗氧化能力的影響

王艷豐，張丁華

（河南農業職業學院牧業工程學院，河南 鄭州 451450）

近年來，隨著我國規模化豬場快速發展，集約化程度越來越高，豬病也變得日趨復雜，新病不斷涌現，老病呈現新形式，根本原因在于豬群免疫力低下。大量研究表明，豬群普遍存在免疫抑制性因素，如疾病因素、營養因素、藥物因素、免疫因素、環境因素、應激因素、霉菌毒素等，其中豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬圓環病毒2型、豬瘟病毒、偽狂犬病病毒、豬巨細胞病毒和霉菌毒素等被認為是引起豬產生免疫抑制的主要原因[1-2]。目前對豬群免疫抑制尚無有效治療方法，主要是疫苗預防、對癥治療及防止繼發感染等，但效果均不太理想，同時抗生素對免疫抑制性疾病效果甚微。

中藥屬于天然藥物，含有多糖、苷類、生物堿類、有機酸類、揮發油等免疫活性成分，能增強機體細胞免疫和體液免疫功能[3-4]，將是今后防控豬免疫抑制性疾病的重要手段。全國獸用抗菌藥使用減量化行動方案（2021—2025年）指出：要根據養殖管理和防疫實際，推廣應用獸用中藥等無殘留的綠色獸藥，替代部分獸用抗菌藥品種，并逐步提高使用比例，實現畜禽產品生態綠色。鑒于此，本試驗綜合前期試驗結果，選擇在飼糧中添加不同比例補中益氣中藥，以生長肥育豬為研究對象，探究中藥復方對生長肥育豬免疫功能和抗氧化能力的影響，以期為中藥復方在生豬飼養中應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗藥品與試劑

黃芪、黨參、熟地、枸杞、板藍根、山楂、當歸、何首烏、甘草均購自禹州中藥材專業市場。將上述中藥按2∶2∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1比例，烘干粉碎制成100～200目超微粉作為中藥復方備用。白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白細胞介素-4（interleukin-4，IL-4）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、丙二醛（MDA）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2 試驗動物及分組

試驗地點為商丘市睢縣某規模化豬場，試驗時間為2020年8月25日至10月30日。將60頭3月齡健康狀況良好、體重相近的杜長大生長肥育豬隨機分為5組，每組12頭，分別為試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組和對照組。將各組豬進行分欄飼養，自由采食和飲水，免疫及消毒程序按豬場常規程序進行，預試期和正式試驗期分別為7 d和60 d。試驗正式期內，試驗Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組分別在基礎飼糧中添加0.5%、1.0%、1.5%、2.0%中藥復方，對照組僅飼喂基礎飼糧。

1.3 試驗飼糧組成及營養水平

基礎飼糧參照豬飼養標準（NY/T 65—2004）和NRC（2012）推薦的肥育豬營養需要進行配制，飼糧組成及營養水平見表1。

表1 試驗基礎飼糧配方及營養水平

1.4 免疫功能和抗氧化活性指標測定

試驗結束后每組挑選3頭豬前腔靜脈采血，每頭3 mL，然后以3 000 r/min離心10 min，分離血清于-20 ℃保存待檢。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒檢測豬血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、細胞因子（IL-2、IL-4、IL-6）及抗氧化性能指標（MDA、T-SOD、CAT、GSH-Px）的水平，具體步驟按試劑盒說明書進行。

1.5 數據分析與統計

試驗數據采用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析和多重比較，結果以平均值±標準差表示，P<0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 中藥復方對生長肥育豬血清免疫球蛋白含量的影響

由表2可見，與對照組相比，各試驗組豬血清IgG、IgA、IgM含量均有不同程度提高，其中試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組豬血清IgG、IgA、IgM含量顯著升高（P<0.05），而試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組間豬血清IgG、IgA、IgM含量差異不顯著（P＞0.05）。

表2 中藥復方對生長肥育豬血清免疫球蛋白含量的影響

2.2 中藥復方對生長肥育豬血清抗氧化酶指標的影響

由表3可見，與對照組相比，各試驗組GSHPx含量均顯著提高（P<0.05），其中以Ⅳ組GSHPx含量最高；試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組的T-SOD和CAT含量均較對照組顯著提高（P<0.05），Ⅲ組、Ⅳ組的MDA含量較對照組顯著降低（P<0.05）；試驗Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組間GSH-Px、T-SOD和CAT含量差異不顯著（P>0.05）。

表3 中藥復方對生長肥育豬血清抗氧化酶指標的影響

2.3 中藥復方對生長肥育豬血清細胞因子水平的影響

由表4可見，與對照組相比，各試驗組IL-2、IL-4含量均顯著提高（P<0.05），其中以Ⅳ組IL-2、IL-4含量最高，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組間IL-2、IL-4含量差異不顯著（P>0.05）；試驗Ⅳ組的IL-6含量較對照組顯著提高（P<0.05），各試驗組間IL-6含量差異不顯著（P>0.05）。

表4 中藥復方對生長肥育豬血清細胞因子水平的影響

3 討論

3.1 中藥復方對生長肥育豬血清免疫球蛋白含量的影響

動物機體免疫包括體液免疫和細胞免疫，免疫球蛋白是體液免疫應答的信號分子，由B淋巴細胞產生，主要包括IgG、IgA和IgM。血清中IgG、IgA、IgM是機體防御系統中的重要成員，是衡量機體免疫功能的重要指標[5]。大量研究表明，中藥可提高機體血清中IgG、IgA、IgM的含量。研究發現飼糧中添加紫錐菊可顯著提高保育豬血清IgG、IgA的含量，增強機體免疫功能[5]；以黃芪、板藍根、益母草、黨參、山楂、當歸等組成的中藥復方，可顯著提高脾臟指數、血清IgG和IgA含量[6]；以杜仲、黃芪、紫蘇、黨參、山楂等組成的中藥復方，可顯著提高斷奶仔豬血清IgG、IgM、IgA水平，且隨著飼料中中藥濃度的增加而增加[7]。本試驗結果也表明，飼糧中添加中藥復方，可顯著提高豬血清IgG、IgA、IgM的含量，增強機體免疫功能。但也有報道在飼糧中添加中藥后，豬血清IgG、IgM、IgA含量無顯著變化，有的甚至出現IgG下降[6]，分析原因可能與添加的中藥劑量、種類及配伍等有關。

3.2 中藥復方對生長肥育豬血清抗氧化酶指標的影響

抗氧化酶系統具有清除活性氧自由基的功能，是維持動物健康的重要防線[8]。機體內的各種抗氧化酶相互合作，共同構成機體對抗自由基的第一道防線，其中以SOD、GSH-Px和CAT最重要[9]。SOD的主要作用是清除體內自由基，保護脫氫酶免受超氧自由基影響失活[10]。CAT、GSH-Px的活性及T-AOC均能夠反映機體的抗氧化能力。MDA是脂質過氧化反應的穩定產物，具有很強的生物毒性，能破壞組織細胞完整性，其含量越高說明體內過氧化反應越強烈，細胞受到的氧化損傷越強[8]。大量研究表明，飼糧中添加中藥可以提高豬CAT、SOD、GSHPx的活力，且能顯著降低保育豬血清MDA的含量，提高豬抗氧化能力[6-10]。本試驗結果也顯示，中藥復方各試驗組GSH-Px、T-SOD和CAT含量均顯著提高，并能顯著降低生長肥育豬血清MDA含量。

3.3 中藥復方對生長肥育豬血清細胞因子水平的影響

細胞因子在免疫應答與免疫調節中發揮重要作用，IL-2、IL-4、IL-6屬于適應性免疫和促炎性細胞因子，當病原微生物入侵時，機體的免疫系統隨即被激活，促使機體分泌細胞因子以清除病原微生物。IL-2能促進T淋巴細胞增殖與分化，誘導具有細胞毒樣活力的殺傷細胞；IL-4由活化的Th2細胞產生，能促進B細胞增殖、分化、免疫球蛋白產生[11]；IL-6由各種類型的淋巴細胞和非淋巴細胞產生，可以維持抗原特異性免疫應答、參與宿主防御機制等[12]。研究發現，飼糧中添加1%和2%黨參多糖均能顯著提高仔豬血清IL-2、IL-4和IL-6含量[13]；在斷奶仔豬飲水中添加3 g/L或6 g/L蒲公英水提物，均可顯著提高IL-2、IL-6的含量[14]；在飼糧中添加50～100 mg/kg姜黃素，也可以顯著提高IL-2、IL-6含量[15]。此外，中藥復方也具有良好的效果。胡健等[16]用麥冬、冬青葉、銀杏葉、益母草、艾葉、魚腥草等組成的中藥復方，以0.3%比例添加于飼糧中，可以顯著提高IL-6含量，增強斷奶仔豬的免疫能力和抗氧化功能。本試驗結果也表明，中藥復方可以提高豬血清IL-2、IL-4和IL-6含量。

4 結論

綜上所述，飼糧中添加1.0%、1.5%和2%中藥復方均能顯著提高生長肥育豬的免疫功能和抗氧化能力，結合經濟成本，建議添加比例以1.0%和1.5%為宜。