子宮內(nèi)膜異位癥患者腸道菌群測定的臨床價值

謝麗明，陳亞軍，李九鳳，李麗琴

（1.韶關市婦幼保健院檢驗與遺傳中心；2.韶關市婦幼保健院婦產(chǎn)科，廣東韶關 512026）

子宮內(nèi)膜異位癥是臨床常見的婦科疾病。有研究指出，子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病率為5%～15%，影響育齡期女性健康和生活質(zhì)量，故及時判斷患者子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展情況及嚴重程度十分重要[1-2]。既往臨床對子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病的相關因素有諸多研究，如炎癥反應、經(jīng)血逆流等，但仍有較多未發(fā)生炎癥反應、經(jīng)血逆流的女性出現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥，故臨床對判斷子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展及病情嚴重程度效果欠佳，如何選擇高效、安全的輔助診斷指標是子宮內(nèi)膜異位癥病情觀察的難點[3-4]。近年有研究表明，腸道菌群與炎癥性疾病的關系較為密切，或是引起子宮內(nèi)膜異位癥的重要因素，但目前臨床關于腸道菌群與子宮內(nèi)膜異位癥炎性因子水平的關系尚存在爭議[5]。因此，本研究對此展開初步探討，旨在為臨床提供可靠的參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年1月韶關市婦幼保健院收治的82例子宮內(nèi)膜異位癥患者，將其納入觀察組，另選取同期院內(nèi)82例健康體檢者，將其納入對照組進行回顧性分析。兩組研究對象一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。本研究經(jīng)韶關市婦幼保健院倫理委員會批準。納入標準：①符合《宮內(nèi)膜異位癥長期管理中國專家共識》[6]中子宮內(nèi)膜異位癥的診斷標準，并經(jīng)超聲內(nèi)鏡確診；②無腸道疾病家族史者；③年齡≥18歲；④近3個月內(nèi)無抗生素治療史者。排除標準：①哺乳期或妊娠期者；②血液系統(tǒng)疾病者；③伴其他惡性腫瘤疾病者；④急、慢性胃腸道疾病或盆腔炎者；⑤臨床資料不全者。

表1 兩組研究對象一般資料比較

1.2 研究方法 糞便樣本采集。采集研究對象糞便0.5 g，其中觀察組患者于術前收集，對照組患者于月經(jīng)結束后7 d內(nèi)收集。采用稀釋液稀釋糞便樣本，按10倍稀釋法稀釋至10-8，取10 μL接種，大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌、奇異菌、普氏菌采用氧培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基培養(yǎng)，于37 ℃環(huán)境中培養(yǎng)48 h后，計數(shù)菌落數(shù)；采用格蘭染色、生化鑒定，計算每克糞便所含菌群數(shù)。實驗室指標。于清晨采集研究對象空腹肘靜脈血5 mL，置于EDTA抗凝采血管，室溫靜置1 h，以3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心15 min，分離血清，于-80 ℃環(huán)境中保存。以酶聯(lián)免疫吸附法測定血清白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-17（IL-17）、白細胞介素-22（IL-22）、白細胞介素-33（IL-33），試劑盒由賽默飛公司提供。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 22.0軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料以[例(%)]表示，組間比較行χ2檢驗；計量資料以（）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。采用Pearson分析兩變量相關性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象腸道菌群數(shù)量比較 觀察組研究對象大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌數(shù)量均高于對照組，奇異菌、普氏菌數(shù)量低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組研究對象腸道菌群數(shù)量比較（CFU/g）

2.2 兩組研究對象炎性因子水平比較 觀察組研究對象IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組研究對象炎性因子水平比較（ng/L，）

表3 兩組研究對象炎性因子水平比較（ng/L，）

注：IL-6：白細胞介素-6；IL-17：白細胞介素-17；IL-22：白細胞介素-22；IL-33：白細胞介素-33。

組別 例數(shù) IL-6 IL-17 IL-22 IL-33觀察組 82 171.63±32.22 79.63±25.14 559.62±119.36 349.33±94.19對照組 82 102.11±28.49 52.14±10.42 298.61±85.63 231.22±83.85 t值 14.637 9.147 16.089 8.481 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 各腸道菌群數(shù)量與子宮內(nèi)膜異位癥患者炎性細胞因子的相關性分析 經(jīng)Pearson檢驗，大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌數(shù)量與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈正相關，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），奇異菌、普氏菌與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈負相關，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 各腸道菌群數(shù)量與子宮內(nèi)膜異位癥患者炎性細胞因子的相關性分析

3 討論

目前臨床對子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機制尚不明確，有學者提出異位種植學說，認為隨經(jīng)血逆流，部分經(jīng)期脫落的子宮內(nèi)膜會進入盆腔種植，從而引起子宮內(nèi)膜異位癥，該學說雖獲得多數(shù)研究證實，但經(jīng)血逆流現(xiàn)象在女性群體中較為常見，并不都引發(fā)子宮內(nèi)膜異位癥故該病的發(fā)病機制研究仍是臨床十分關注的問題[7-8]。近年有諸多研究表明，腸道菌群穩(wěn)態(tài)失衡與多種炎性疾病發(fā)生、發(fā)展有關系[9]。既往也有研究指出，子宮內(nèi)膜異位癥與炎癥反應密切相關，盆腔局部異常的炎癥環(huán)境或是引起異位內(nèi)膜組織定植、生長的重要因素[10]。為進一步了解子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展與腸道菌群、炎性因子的相關機制，本研究針對此方面展開初步討論。

本研究中，觀察組研究對象大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌菌群數(shù)均高于對照組，奇異菌、普氏菌菌群數(shù)低于對照組，提示子宮內(nèi)膜異位癥患者存在腸道菌群紊亂，與既往報道[11]相似。腸道菌群具有調(diào)節(jié)免疫、預防病原體感染及提供屏障等作用，子宮內(nèi)膜異位癥患者常伴有周期性腸道癥狀及嚴重痛經(jīng)，體內(nèi)志賀菌、大腸桿菌等革蘭陰性菌數(shù)量異常增高，可通過脂多糖對異位病灶免疫微環(huán)境造成影響，進而促進疾病發(fā)展，加重患者病情，并可導致相關癥狀發(fā)生；同時細菌內(nèi)毒素脂多糖入血可持續(xù)激活程序性死亡蛋白-1通路，使其和程序性死亡蛋白配體-1過度表達，抑制T細胞活化和增殖，引起免疫耐受，為異位內(nèi)膜組織提供了一定的生長條件。

有研究表明，腸道菌群失衡會引起全身炎癥反應[12]。本研究中，觀察組研究對象IL-6、IL-17、IL-22、IL-33均高于對照組，提示子宮內(nèi)膜異位癥患者炎癥反應水平較高，或與腸道菌群失衡有關。分析原因，腸道菌群失衡，革蘭陰性菌大量繁殖，可增高腸壁通透性，破壞腸道免疫完整性，使細菌內(nèi)毒素脂多糖大量入血，引起全身炎癥性反應[13]。IL-6、IL-17為急性期反應常見的炎癥細胞因子，對多種炎癥反應細胞增殖及細胞毒性淋巴細胞形成過程有一定促進作用，有利于生成抗凋亡因子，大量堆積在患者腸道黏膜；IL-22、IL-33可引起子宮內(nèi)膜組織黏附、入侵和種植，可被子宮內(nèi)膜異位癥引起的損傷所激活，主要對免疫細胞和腸道細菌進行調(diào)節(jié)。菌群失調(diào)所致的炎癥反應可促使子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔內(nèi)巨噬細胞大量分泌IL-6、IL-17等炎性細胞因子，增加盆腹腔血管穿透性，產(chǎn)生炎性滲出物，導致腹腔液內(nèi)微環(huán)境異常，從而引起盆腔粘連、異常子宮出血、不孕等子宮內(nèi)膜異位癥常見臨床癥狀。

此外，本研究通過觀察腸道菌群與子宮內(nèi)膜異位癥患者炎性細胞因子的相關性發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌、鏈球菌、志賀菌數(shù)量與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈正相關，奇異菌、普氏菌數(shù)量與IL-6、IL-17、IL-22、IL-33水平呈負相關，說明腸道菌群不僅與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展密切相關，還與炎癥反應關系密切，推測腸道菌群不但參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機制，更在其炎癥反應發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機制密切相關，且與炎癥因子有關，可作為臨床評價患者病情變化及預后的有效指標，但基于所選樣本量過低、研究時間過短等因素，本研究存在一定局限性，在今后可針對此方向進一步論證，為該領域提供客觀理論依據(jù)。