新型冠狀病毒滅活類疫苗接種后抗體產生的規律分析*

林 松 涂文瑞 路寧娜 江瑩瑩 溫立新 楊祖偉 王丹丹 林美霞

1 福建中醫藥大學附屬三明中西醫結合醫院檢驗科，福建省三明市 365001； 2 福建省職業病與化學中毒預防控制中心

新型冠狀病毒引起的新型冠狀病毒肺炎開始爆發流行，截至 2021年1月，我國范圍內得到一定的控制，但境外地區疫情仍然不容樂觀。疫苗接種是預防控制乃至消滅傳染病最經濟、安全和有效的手段。疫苗接種產生抗體的有效性，對提高社會的認可度、提高自愿接種率，加快群體對新冠病毒免疫屏障的建立，降低疫情的反彈與暴發的風險有重大意義[1]。目前，我國對相關人群主要接種的是滅活類疫苗，但關于疫苗相關抗體規律還尚不明確，現階段中和抗體相關配套試劑還不完善， 故選擇通過2019-nCoVIgM和IgG抗體檢測，進一步了解接種新冠肺炎疫苗接種后，產生相應的特異性抗體規律和特征。

1 對象和方法

1.1 研究對象 選取福建中醫藥大學附屬三明中西醫結合醫院醫務人員144名，無高血壓、糖尿病等基礎病，體檢生化指標無異常人群。其中95名作為實驗組，接種北京生物制品研究所有限責任公司提供的新型冠狀病毒滅活疫苗(Vero細胞)SARS-CoV-2 Vaccine(Vero Cell)，Inactived.2劑，男27名，女68名，平均年齡(33.5±8.1)歲。49名生化指標檢測正常本院醫務人員檢測血清抗體作為對照組，其中男25名，女24名，平均年齡(37.2±9.4)歲。本研究經醫院醫學倫理委員會批準通過，人群自愿參與本研究，并簽署知情同意書。

1.2 方法 疫苗為北京生物制品研究所有限責任公司，提供的新型冠狀病毒滅活疫苗(Vero細胞)，規格：6.5U/0.5ml/瓶，批號202011179、202011153等。標本采集時間以注射疫苗當天日期為第1天計時時間節點，單位為“天”，分為5個疫苗檢測組：注射第一劑抗體第7天組；注射第二劑抗體第7天組；注射第二劑抗體第30天組；注射第二劑抗體第60天組；注射第二劑抗體第180天組。分別空腹采集靜脈血5ml，離心機3 600r/min，10min，取血清檢測。對以上5個疫苗檢測組和1個對照組，檢測2019-nCoV IgM和IgG水平，比較各時間節點血清2019-nCoV IgM和IgG陽性例數、檢測中位數及陽性檢出率。按照試劑說明書：檢測值>10.00AU/ml定義為陽性。陽性率=陽性檢出例數/各疫苗檢測組例數×100%

1.3 儀器與試劑 檢測儀器為深圳亞輝龍生物科技股份有限公司生產的iFlash-3000全自動化學發光免疫分析儀。檢測試劑為深圳亞輝龍生物科技股份有限公司配套的2019-nCoV IgM和IgG抗體化學發光檢測試劑盒，其中檢測抗原為2019-nCoV刺突蛋白S和核衣殼蛋白N抗原為磁微粒包被。

1.4 統計學方法 采用SPSS25.0進行數據分析。計量資料采用中位數(四分位數)或(均數±標準差)表示，比較采用非參數獨立樣本Kruskal-Wallis檢驗，多重比較采用全部成對比較；計數資料采用n(%)表示，比較采用χ2檢驗或Fisher精確概率法，多重比較采用Bonferroni法。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 測量值比較 各組IgG檢測值中位數比較，總體差異具有統計學意義，其中接種第二針后第30天組IgG檢測值中位數最高，但和第二針后第7天組檢測值中位數比較，差異無統計學意義；和其他組別比較，差異具有統計學意義。各組IgM檢測值中位數比較，總體差異具有統計學意義，其中接種第二針后7天IgM檢測值中位數最高，和其他組別比較，差異均具有統計學意義，見表1。

表1 IgG、IgM檢測值分析表

2.2 陽性率比較 各組IgG陽性率比較，總體差異具有統計學意義(P<0.05)，其中接種第二針后30天組陽性率最高，但和第二針后7天組陽性率比較，差異無統計學意義(P>0.05)；和其他組別比較，差異具有統計學意義(P<0.05)。各組IgM陽性率比較，總體差異具有統計學意義(P<0.05)，其中接種第二針后7天陽性率最高，但和第一針后第7天、第二針后第7天組陽性率比較，差異無統計學意義(P>0.05)；和其他組別比較，差異均具有統計學意義(P<0.05)。合并組陽性率，各組陽性率比較，總體差異具有統計學意義(P<0.05)，其中接種第二針后第30天組陽性率最高，但和第二針后第7天組陽性率比較，差異無統計學意義(P>0.05)；和其他組別比較，差異具有統計學意義。見表2。

表2 IgG、IgM陽性率分析表[n(%)]

3 討論

本研究采用磁微粒化學發光檢測技術對接受注射疫苗人員的血清進行2019-nCoV IgM和IgG抗體檢測，并評估抗體檢測出現的時間節點、峰值等規律。通過對95例接種新冠抗體疫苗的435份血清標本及對照組進行檢測，發現關于新冠病毒抗體IgM和IgG的一些規律：(1)IgM在接種疫苗后首次出現抗體時間為接種第一針后約第7天； IgM檢測值陽性率最高、檢測值中位數最高出現在接種第二針后約第7天。(2)IgG在接種疫苗后首次出現抗體時間為第二針后約第7天;IgG檢測值陽性率最高、檢測值中位數最高出現在接種第二針后約第30天。(3)接種北京生物制品研究所有限責任公司新型冠狀病毒滅活疫苗(Vero細胞)，在我院醫務人員中產生IgG抗體的總陽性率為96.8%，大多數人均可產生IgG抗體。根據針對新冠病例的研究表明：新冠確診患者的IgM 抗體在發病后1 ～3周急劇上升,在發病后第3周達到峰值,IgG 抗體在發病后3～ 6周上升幅度最大,發病后第9周達到峰值,并在發病30周后仍具有較高的水平[2-10]。本研究結果與其有一定正相關性。可以在一定范圍內作為新型冠狀病毒的篩查和診斷的補充方法。(4)IgM和IgG可同時檢測，以覆蓋人群接種后6個月的抗體水平檢測。

疫苗刺激機體后，免疫系統對滅活病毒進行免疫防御并產生特異性抗體。其中特異性IgM 抗體是機體感染后早期產生的抗體，可提示現行感染或新近感染。IgG抗體是再次免疫應答產生的主要抗體，提示病情進入恢復期或存在既往感染[11-13]。因此，IgM和IgG抗體聯合檢測不僅可以對感染性疾病進行早期診斷，而且有助于對疫苗刺激產生相應抗體階段進行評估。根據一些針對新冠肺炎確診病例血液標本IgM和IgG研究表明：特異性抗體IgM產生的時間，30～40d抗體滴度達到峰值[14-15]，與本文結果基本吻合。

而抗原抗體血清學檢測的標本來源于血清標本，采集和保存較為簡單，且穩定性方面較好，將抗體動態監測應用在COVID-19疫苗的效果監測方面，在中和抗體檢測使用前起到補充作用，將可以為臨床提供更多的參考數據。當然，使用不同產商試劑測試及方法學的局限可能會獲得不同的結果，可需進一步比較監測。