Ki-67、共刺激分子B7H3在老年急性淋巴細(xì)胞白血病中表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系

劉 洋

黑龍江省佳木斯市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 154002

急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)是一種起源于淋巴細(xì)胞的B系或T系細(xì)胞在骨髓內(nèi)異常增生而形成的惡性腫瘤性疾病[1]。當(dāng)前對(duì)ALL的治療目標(biāo)已不再是單純的獲得短期緩解，而是力爭(zhēng)實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期無(wú)病生存，改善患者生活質(zhì)量。Ki-67是一種與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的細(xì)胞核抗原，B7H3是近些年新發(fā)現(xiàn)的具有共刺激作用的B7家族成員，能夠通過(guò)抑制T細(xì)胞活化和增殖來(lái)調(diào)控免疫應(yīng)答[2]。本文旨在分析Ki-67和B7H3在老年ALL患者中的表達(dá)，并探究上述因子表達(dá)與ALL患者預(yù)后關(guān)系，以期為提高ALL診療準(zhǔn)確度、改善ALL預(yù)后提供理論依據(jù)，現(xiàn)詳述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年3月—2021年3月于我院接受治療的60例急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)老年患者為實(shí)驗(yàn)組，另選取同期于我院接受治療的100例急性非淋巴細(xì)胞白血病(ANLL)老年患者為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)實(shí)驗(yàn)組患者均經(jīng)骨髓涂片及活檢確診為ALL且存在相關(guān)臨床癥狀；(2)病歷資料齊全；(3)未接受放化療、免疫治療；(4)調(diào)研經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施；(5)研究對(duì)象及其家屬對(duì)本次調(diào)研過(guò)程、方法、原理等清楚明白并簽署知情同意書(shū)；(6)年齡≥60歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并精神障礙者；(2)合并其他惡性腫瘤者；(3)既往放化療史；(4)合并嚴(yán)重肝、腎功能障礙者。兩組患者一般臨床資料諸如性別、年齡、平均體重、受教育程度、基礎(chǔ)疾病史等對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者一般臨床資料差異性比較

1.2 干預(yù)方法 分別采集兩組患者的骨髓組織，使用100g/L甲醛固定后使用常規(guī)石蠟包埋處理，制成組織芯塊后應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法(EnVison)檢測(cè)兩組石蠟標(biāo)本中Ki-67抗原和B7H3蛋白表達(dá)情況。

1.3 觀察指標(biāo) (1)對(duì)比兩組患者Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)差異性；(2)分析Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)與ALL患者臨床特征相關(guān)性；(3)分析Ki-67抗原表達(dá)與ALL患者預(yù)后生存相關(guān)性；(4)分析B7H3抗原表達(dá)與ALL患者預(yù)后生存相關(guān)性；(5)分析Ki67與B7H3共陰共陽(yáng)或交叉陽(yáng)與患者預(yù)后生存的相關(guān)性。

1.4 評(píng)測(cè)標(biāo)準(zhǔn) Ki-67及B7H3染色標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)細(xì)胞著色強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)如下：無(wú)色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，褐色、黑色為3分；陽(yáng)性細(xì)胞比例按如下標(biāo)準(zhǔn)：≤10%為1分，11%～50%為2分，51%～75%為3分，75%以上為4分；兩項(xiàng)相乘<3分為陰性，≥3分為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)差異性比較 實(shí)驗(yàn)組患者中Ki-67抗原表達(dá)陽(yáng)性率、B7H3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率均高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)差異性比較[n(%)]

2.2 Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)與ALL患者臨床特征相關(guān)性分析 Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)與ALL患者縱隔增寬具有相關(guān)性(P<0.05)，與性別、年齡、卡式狀態(tài)評(píng)分無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表3 Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)與ALL患者臨床特征相關(guān)性分析

2.3 Ki-67抗原表達(dá)與ALL患者預(yù)后生存相關(guān)性分析 經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，Ki-67表達(dá)陽(yáng)性ALL患者1年生存率、平均無(wú)進(jìn)展生存期(PFS)以及平均總生存時(shí)間(OS)均明顯低于Ki-67表達(dá)陰性患者(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 Ki-67抗原表達(dá)與ALL患者預(yù)后生存相關(guān)性分析

2.4 B7H3抗原表達(dá)與ALL患者預(yù)后生存相關(guān)性分析 經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，B7H3表達(dá)陽(yáng)性患者的1年生存率、平均PFS以及平均OS時(shí)間均明顯低于B7H3表達(dá)陰性患者(P<0.05)。見(jiàn)表5。

表5 B7H3抗原表達(dá)與ALL患者預(yù)后生存相關(guān)性分析

2.5 Ki67與B7H3共陰共陽(yáng)或交叉陽(yáng)與患者預(yù)后生存的相關(guān)性分析 Ki67陽(yáng)性且B7H3陽(yáng)性患者的1年生存率、平均PFS以及平均OS時(shí)間均明顯低于Ki67陰性且B7H3陰性患者(P<0.05)。見(jiàn)表6。

表6 Ki67與B7H3共陰共陽(yáng)或交叉陽(yáng)與患者預(yù)后生存的相關(guān)性分析

3 討論

當(dāng)前ALL的診斷方式包括細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等，隨著近些年國(guó)內(nèi)微觀技術(shù)的不斷發(fā)展，ALL的診斷準(zhǔn)確率不斷提升，ALL患者的生存率也有了明顯改觀，目前分子生物學(xué)檢測(cè)因操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確率高等優(yōu)勢(shì)成為臨床上ALL常用鑒別手段之一[3]。Ki-67同細(xì)胞增殖存在密切的相關(guān)性，故而可將其作為監(jiān)測(cè)細(xì)胞增殖的指標(biāo)，用于判斷腫瘤的良惡性以及良惡性程度，同時(shí)還可以用于分析細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞周期以及腫瘤生長(zhǎng)方式、侵襲方式、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為中。B7H3是近些年新發(fā)現(xiàn)的具有共刺激作用的B7家族成員，近些年的多項(xiàng)實(shí)踐指出B7H3在多種腫瘤細(xì)胞上呈現(xiàn)異常表達(dá)，可能與腫瘤免疫逃逸密切相關(guān)[4]。

本文通過(guò)設(shè)立不同分組的方式，就Ki-67和B7H3在老年ALL患者中的表達(dá)以及與預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組患者的Ki-67抗原表達(dá)陽(yáng)性率、B7H3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率均高于對(duì)照組，提示ALL患者存在明顯的Ki-67以及B7H3高表達(dá)狀態(tài)。一項(xiàng)針對(duì)38例ALL患者和30例ANLL患者的調(diào)研結(jié)果顯示，ALL患者的骨髓或血樣中P53及Ki67的表達(dá)陽(yáng)性率明顯更高，ALL患者中Ki-67表達(dá)陽(yáng)性率為45.5%[5]，與本文類(lèi)似。還有研究顯示，B7H3在不同類(lèi)型白血病患者中表達(dá)程度有明顯差異，ALL患者中陽(yáng)性率為42%，ANLL中則為10.2%[6]，這也與本文類(lèi)似。分析認(rèn)為，Ki-67是一種與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的蛋白，同正常細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞的增殖特性更為突出，且增殖速度會(huì)隨著腫瘤惡性程度的增加而升高，因而通過(guò)對(duì)Ki-67表達(dá)的檢測(cè)可以準(zhǔn)確、客觀地反映腫瘤的增殖速度、惡性程度，本文中對(duì)ALL臨床病理特征的分析也證實(shí)了該觀點(diǎn)，出現(xiàn)縱隔增寬患者的Ki-67陽(yáng)性率明顯更高。同理B7H3是一種能夠?qū)細(xì)胞產(chǎn)生活化增殖協(xié)同作用的細(xì)胞因子，能夠刺激CD4+和CD8+T細(xì)胞的增殖，從而發(fā)揮免疫應(yīng)答協(xié)同刺激作用，已有多個(gè)研究指出B7H3在腫瘤細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)，且表達(dá)量與患者總體生存率以及腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[7]，本文中對(duì)Ki-67以及B7H3表達(dá)狀態(tài)同生存指標(biāo)的比較也印證了該觀點(diǎn)。但在Ki67與B7H3共陰共陽(yáng)或交叉陽(yáng)與患者預(yù)后生存的相關(guān)性分析中，Ki67與B7H3交叉陽(yáng)性例數(shù)較少，可在下一步研究中擴(kuò)大樣本例數(shù)進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

綜上所述，老年ALL患者Ki-67抗原及B7H3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率較ANLL患者明顯升高，上述因子表達(dá)同ALL的縱膈增寬狀態(tài)有明顯相關(guān)性，且與ALL患者預(yù)后具有密切聯(lián)系，可將其作為判斷ALL患者預(yù)后的重要臨床指標(biāo)。