多囊卵巢綜合征患者血清miR-23a、IL-17A、sCD68水平與卵巢功能的關(guān)系

楊冬梅

湖北省武穴市婦幼保健院婦科 435400

多囊卵巢綜合征(PCOS)是育齡女性中常見(jiàn)的婦科異質(zhì)性?xún)?nèi)分泌系統(tǒng)疾病，臨床特征表現(xiàn)為持續(xù)性無(wú)排卵、胰島素抵抗、卵巢多囊樣改變及高雄激素血癥為主[1]，其并發(fā)心血管疾病、Ⅱ型糖尿病、代謝綜合征、子宮內(nèi)膜癌等疾病的風(fēng)險(xiǎn)大[2]。關(guān)于PCOS疾病的發(fā)病及生理機(jī)制尚未明確，可能與慢性炎性因子相關(guān)[3]，IL-17A是T細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的早期啟動(dòng)因子，可以通過(guò)促進(jìn)釋放前炎性細(xì)胞因子來(lái)放大炎癥反應(yīng)，IL-17A水平在PCOS患者體內(nèi)表達(dá)較高，會(huì)加速病情進(jìn)展[4]；sCD68是一種單核/巨噬細(xì)胞的特異性表面分子標(biāo)志物，與PCOS患者出現(xiàn)肥胖、高雄激素血癥關(guān)聯(lián)性高，其在卵巢型子宮內(nèi)膜異位癥疾病中發(fā)揮關(guān)鍵作用[5]；miR-23a是基因間的miRNA簇之一，被證實(shí)與細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育及分化等過(guò)程密切相關(guān)[6]，但將該指標(biāo)運(yùn)用在PCOS患者中的研究較少，故本研究通過(guò)對(duì)253例PCOS患者一系列臨床指標(biāo)進(jìn)行分析，旨在為育齡女性獲得理想的診斷和治療提出科學(xué)意見(jiàn)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將本院2018年2月—2021年2月收治的253例PCOS患者作為觀(guān)察組，回顧性分析其臨床資料，另選同期在我院行健康體檢的經(jīng)期規(guī)律且正常的84例患者作為健康對(duì)照組。觀(guān)察組納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均符合2003年鹿特丹PCOS國(guó)際診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)均未進(jìn)行卵巢相關(guān)手術(shù)或放療、化療；(3)2個(gè)月內(nèi)均未使用激素類(lèi)藥物、胰島素、降脂類(lèi)藥物且近3個(gè)月內(nèi)未接受促排卵治療；(4)無(wú)卵巢早衰、子宮畸形、宮腔粘連、甲狀腺功能異常等疾??；(5)無(wú)全身性疾病、血液系統(tǒng)疾??；(6)無(wú)惡性腫瘤；(7)無(wú)精神疾病患者；(8)無(wú)心、肝、腎等功能異常；(9)臨床資料均完整。兩組患者均為育齡期女性，兩組一般資料差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，存在可比性，詳見(jiàn)表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 指標(biāo)檢測(cè)及療效評(píng)價(jià) 在患者經(jīng)期3～5d時(shí)，清晨抽取其空腹靜脈血5ml，以3 000r/min離心5min，分離血清后將樣本放置在-80℃環(huán)境下保存待測(cè)。miR-23a檢測(cè)：使用TIANGEN (購(gòu)自北京天根生化科技有限公司) 試劑盒, 用miRcute miRNA提取分離試劑盒分離血漿總miRNA, 根據(jù)A260/A280比值確定樣品總RNA的純度和濃度，隨后用miRcute miRNA c DNA第一鏈合成試劑盒采用加尾法對(duì)成熟miRNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，生成miRNA對(duì)應(yīng)的c DNA第一鏈，以U6 snRNPs為內(nèi)參，并在冰上對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行配置，隨后進(jìn)行PCR擴(kuò)增處理并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)miR-23a水平，儀器為2720型擴(kuò)增儀，購(gòu)自美國(guó)ABI公司。IL-17A、sCD68檢測(cè)：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒分別購(gòu)自廈門(mén)慧嘉生物科技有限公司、中國(guó)CusabioBiotech公司，檢測(cè)儀器為MR-96A酶標(biāo)儀，購(gòu)自武漢科爾達(dá)醫(yī)療科技有限公司。所有指標(biāo)檢測(cè)過(guò)程均由專(zhuān)業(yè)醫(yī)師團(tuán)隊(duì)按照試劑盒及說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格操作。

對(duì)觀(guān)察組253例患者進(jìn)行為期3個(gè)月促排卵治療，治療結(jié)束后根據(jù)獲得卵數(shù)評(píng)價(jià)患者卵巢功能，獲得卵數(shù)≤5個(gè)為卵巢功能低反應(yīng)，獲得卵數(shù)>5個(gè)為卵巢功能正常反應(yīng)。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清miR-23a、IL-17A、sCD68水平比較 觀(guān)察組患者miR-23a水平顯著低于健康對(duì)照組，IL-17A及sCD68水平顯著高于健康對(duì)照組，組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，詳見(jiàn)表2。

表2 兩組患者血清miR-23a、IL-17A、sCD68水平比較

2.2 不同卵巢功能患者血清miR-23a、IL-17A、sCD68水平比較 卵巢功能低反應(yīng)患者miR-23a水平低于卵巢功能正?；颊?，IL-17A、sCD68水平均顯著高于卵巢功能正常患者，組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，詳見(jiàn)表3。

表3 不同卵巢功能患者血清miR-23a、IL-17A、sCD68水平比較

2.3 血清miR-23a、IL-17A、sCD68水平與卵巢功能相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，卵巢功能與miR-23a水平顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.492，P<0.05)；卵巢功能與IL-17A、sCD68水平均顯著正相關(guān)(r=0.730、0.571，P<0.05)，詳見(jiàn)表4，圖1～3。

圖1 miR-23a與卵巢功能相關(guān)性散點(diǎn)圖

表4 血清miR-23a、IL-17A、sCD68水平與卵巢功能相關(guān)性分析

3 討論

PCOS作為一種女性?xún)?nèi)分泌紊亂且生殖障礙的綜合征，近年來(lái)成為困擾女性生育的重要疾病之一，該疾病在育齡女性中的發(fā)病率較高且預(yù)后復(fù)雜。因PCOS患者機(jī)體普遍存在慢性炎癥反應(yīng)，臨床對(duì)其研究目標(biāo)已由高雄激素血癥、月經(jīng)紊亂等轉(zhuǎn)移到至血糖、血脂代謝異常等方面上來(lái)[7]。

圖2 IL-17A與卵巢功能相關(guān)性散點(diǎn)圖

本文結(jié)果顯示，觀(guān)察組患者miR-23a水平低于健康對(duì)照組，這可能是因?yàn)閙iR-23a能夠影響卵泡發(fā)育，促進(jìn)卵母細(xì)胞生存，同時(shí)引起Caspase依賴(lài)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控卵巢顆粒細(xì)胞的凋亡，當(dāng)miR-23a水平出現(xiàn)異常時(shí)，代表患者的免疫功能受損，免疫力下降，常導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)慢性炎癥，嚴(yán)重會(huì)引發(fā)免疫性疾病，POCS患者及卵巢低反應(yīng)患者體內(nèi)miR-23a水平較卵巢功能正?；颊叩?，POCS患者卵泡液是卵泡發(fā)育和成熟的重要場(chǎng)所，當(dāng)該水平在此環(huán)境中呈現(xiàn)異常表達(dá)時(shí)，生長(zhǎng)環(huán)境受到干擾，誘發(fā)卵母細(xì)胞凋亡，從而導(dǎo)致患者卵巢功能下降，排卵也出現(xiàn)異常，極大影響生育結(jié)局。本文結(jié)果顯示，觀(guān)察組IL-17A、sCD68水平均顯著高于健康對(duì)照組，這可能是因?yàn)镻OCS患者自身處于炎癥狀態(tài)中，當(dāng)IL-17A水平升高，患者體內(nèi)炎性反應(yīng)增強(qiáng)，促進(jìn)了胰島素抵抗，導(dǎo)致POCS病情進(jìn)展，而sCD68在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及粒細(xì)胞中表達(dá)，廣泛用于檢測(cè)患者體內(nèi)存在的巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞在POCS患者胎盤(pán)、子宮、卵巢等組織中分布，患者發(fā)生巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，使其處于慢性輕度炎癥狀態(tài)，sCD68從單核/巨噬細(xì)胞表面裂解釋放至血液，從而在血清中檢測(cè)到其水平升高，并協(xié)同釋放更多的炎性因子，其水平上升預(yù)示著患者體內(nèi)炎性反應(yīng)加??；另外，卵巢功能與miR-23a、IL-17A、sCD68水平相關(guān)性顯著，這可能是因?yàn)榈捅磉_(dá)的miR-23a及高表達(dá)的IL-17A、sCD68預(yù)示著患者存在卵巢低反應(yīng)性，卵巢功能下降，導(dǎo)致患者促排卵的治療效果差。

圖3 sCD68與卵巢功能相關(guān)性散點(diǎn)圖

綜上所述，miR-23a、IL-17A、sCD68水平均與PCOS患者卵巢功能相關(guān)性顯著，提示關(guān)注以上指標(biāo)能夠有助于患者及時(shí)調(diào)整治療方案，為其預(yù)后保駕護(hù)航。