鈦表面不同硅烷偶聯c（RGDfK）環肽的表征及生物相容性分析

鈦的骨結合能力與表面結構和化學組成密切相關，對鈦金屬進行表面處理及負載涂層，可改變鈦表面的微觀結構和化學組成，從而提高細胞早期黏附和成骨分化水平

。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp，RGD）多肽是一種有效且常用的刺激細胞黏附的肽序列，被發現能促進成骨細胞的生長，促使骨組織再生

。以往研究中，學者以硅烷偶聯的方式形成了鈦-硅烷-RGD 多肽的三層結構，證實可以促進細胞黏附、增殖以及成骨分化

。硅烷種類繁多，尤其是末端基團的不同可能給硅烷提供不同的化學活性，然而尚未見研究對比鈦表面以不同末端基團的硅烷偶聯RGD 多肽的效率及所實現的細胞活性。本研究使用氨基、巰基、氯基、烯酰氧基4 種不同末端的硅烷，即3-氨丙基三乙氧基硅烷（3-aminopropyltriethoxysilane，APTES）、3-氯丙基三乙氧基硅烷（3-chloropro-pyltriethoxysilane，CPTES）、3-巰基丙基三甲氧基硅烷（3-mercaptopropyltriethoxysilane，MPTS）、3-異丁烯酰氧丙基三甲氧基硅烷（γ-methacryloxypropyltrimethoxysilane，γ-MPS）作為偶聯劑將c(RGDfK)環肽固定于鈦表面，對各組的化學結合進行表征分析，并對比其對MC3T3-E1 細胞黏附、增殖及分化的影響。

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1 材料和方法

1.1 主要材料與試劑

小鼠前成骨細胞MC3T3-E1 細胞（中國科學院細胞庫，中國），鈦片（陜西盛輝鈦業有限公司，中國），APTES、CPTES、MPTS、γ-MPS（麥克林，中國），c（RGDfK）（合肥國肽生物科技有限公司，中國），磷酸緩沖鹽溶液（phosphate buffered saline，PBS）（白鯊，中國），胎牛血清（Cell Sciences，美國），青霉素/鏈霉素溶液（Gibco，美國），α-MEM（α-minimum essential medium，α-MEM）培養基（Gibco，美國），4'，6-二氨基-2-苯基吲哚（4，6-diamino-2-phenyl indole，DAPI）（Apexbio，美國），鬼筆環肽（Apexbio，美國……