白參菌工廠化栽培技術(shù)*

王寶印

（鄒城市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，山東 鄒城 273500）

白參菌（Schizophyllum communer），別名裂褶菌，隸屬于真菌門（Eumycota）擔(dān)子菌亞門（Basid iomycotina）傘菌目 （Agaricales）裂褶菌科（Schizophyllaceae）裂褶菌屬 （Schizophyllum）[1]。白參菌子實(shí)體小，覆瓦狀散生或叢生，扇形或腎形，無柄或短柄，蓋面密生絨毛、白色至淺灰色；蓋緣內(nèi)卷，有條紋、多瓣裂，菌褶狹窄，沿褶緣縱裂向外反卷[2]。野生的白參菌主要分布在中國東北三省、河北、山東等地。春秋季節(jié)，多生于闊葉樹木或枯木上[3]。

白參菌含有特殊香味，質(zhì)地柔軟細(xì)嫩，味道鮮美，含有豐富的氨基酸和人體必需的微量元素。白參菌還含有多種活性成分如裂褶菌多糖、裂褶菌素和甾醇等，具有清肝明目、防治神經(jīng)衰弱、抗癌、抗炎癥等功效，具有顯著的藥用價(jià)值[4]。

我國研究白參菌的時(shí)間比較早，20世紀(jì)80年代開始了人工馴化野生白參菌，在1996年，云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食用菌研究所對(duì)野生白參菌菌株進(jìn)行采集馴化，篩選了優(yōu)良菌株并進(jìn)行出菇試驗(yàn)。利用木屑為主要培養(yǎng)基可采收三潮白參菌，生物學(xué)效率可達(dá)40%左右，為之后白參菌的栽培推廣奠定了基礎(chǔ)[5]。目前野生的白參菌受大自然季節(jié)限制，數(shù)量較少、根部泥土較難清理。白參菌生產(chǎn)以季節(jié)性農(nóng)戶栽培為主，普遍存在產(chǎn)量低、栽培技術(shù)不穩(wěn)定、保鮮時(shí)間短等問題。針對(duì)以上問題，從液體菌種制備、栽培基質(zhì)配方、出菇房精準(zhǔn)化管控等方面開展了白參菌工廠化栽培技術(shù)的研究。

1 供試菌種

白參菌種BS01，來源于濟(jì)寧恒禾生物科技有限公司。該菌種優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)、抗逆性強(qiáng)。

2 白參菌生物學(xué)特性

2.1 子實(shí)體外觀形態(tài)

白參菌子實(shí)體較小，菌蓋直徑0.6 cm～4.2 cm，無菌柄或短菌柄，質(zhì)地柔軟，白色至灰白色，薄，面上具絨毛或粗毛，扇形，邊緣往往深裂呈掌狀或瓣?duì)睢＞獗。咨＞拚瑥幕枯椛涠觯咨蚧野咨笃趲Х圩仙伛薜倪吘壙v裂反卷[6]。

2.2 營養(yǎng)物質(zhì)

白參菌生長發(fā)育需要碳源、氮源、無機(jī)鹽、維生素。而白參菌又屬于木腐菌，因此工廠化栽培所需碳源可以由木屑、棉籽殼、玉米芯及農(nóng)業(yè)秸稈等提供；氮源可由玉米粉、麥麩等提供，最佳碳氮比為40∶1。無機(jī)鹽和維生素是白參菌生長發(fā)育必不可少的，由于用量較少，一般的碳氮源和給基質(zhì)中添加的水足夠提供，無需另外添加[7]。

2.3 生長環(huán)境條件

2.3.1 溫度

白參菌屬于中高溫品種，菌絲生長階段最適宜培養(yǎng)溫度23℃～25℃，出菇階段最適宜的出菇溫度為18℃～20℃。

2.3.2 濕度

白參菌菌絲生長階段空間濕度不宜超過70%，一般情況下以空氣中自然濕度即可；菌包制作階段，培養(yǎng)基中含水量控制在60%～62%之間；出菇階段最適空間相對(duì)濕度85%～90%。

2.3.3 光照強(qiáng)度

菌絲生長階段無需光照，黑暗條件下培養(yǎng)；出菇階段光照強(qiáng)度控制在300 lx左右。

2.3.4 二氧化碳濃度

白參菌屬于好氧型食用菌類。菌絲生長階段需要清新的空氣，控制培養(yǎng)室內(nèi)二氧化的體積分?jǐn)?shù)在0.25%以下；出菇階段二氧化碳的體積分?jǐn)?shù)為0.1%以下。若室內(nèi)二氧化碳濃度過高，易導(dǎo)致白參菌分化異常，或者出菇為畸形，控制好室內(nèi)的二氧化碳濃度是決定出菇正常與否的關(guān)鍵條件。

2.3.5 酸堿度

白參菌菌絲喜酸，菌絲生長階段最適宜pH在4.5～5.5之間，即制作菌包培養(yǎng)基要求滅菌后pH在4.5～5.5之間；出菇階段最適宜pH在4.0～4.5之間。培養(yǎng)料或培養(yǎng)基 pH過高過低均會(huì)導(dǎo)致菌絲生長異常，甚至停止生長。

3 栽培技術(shù)

3.1 菌種制備

3.1.1 母種

試管培養(yǎng)基配方（PDA）：土豆200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g，水1 000 mL，pH自然。

按照配方制作斜面固體培養(yǎng)基，在超凈工作臺(tái)中接入白參菌菌種后，置于培養(yǎng)室。溫度控制在23℃～25℃之間，黑暗培養(yǎng)。定期觀察菌絲正常與否，是否存在污染情況，如果有污染及時(shí)挑出。白參菌菌絲6 d長滿試管。

3.1.2 液體三角瓶菌種

液體培養(yǎng)基配方：土豆200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨5 g、磷酸二氫鉀3.0 g、硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH自然。

按照配方制作液體培養(yǎng)基，待三角瓶冷卻至23℃，在超凈工作臺(tái)中接入白參菌母種。置于恒溫?fù)u床，轉(zhuǎn)速在172 r·min-1、溫度控制在23℃～25℃之間，黑暗培養(yǎng)。定期檢查菌絲球生長狀態(tài)，當(dāng)三角瓶靜止時(shí)菌液不分離，菌絲球大小均勻，直徑在2 mm～3 mm，菌液不渾濁，即達(dá)到發(fā)酵終點(diǎn)。搖床培養(yǎng)時(shí)間為6 d，即可接入發(fā)酵罐中。

3.1.3 液體發(fā)酵罐菌種

1000L發(fā)酵罐配方：黃豆粉1 kg、玉米粉1 kg（黃豆粉和玉米粉要粉末狀，不能有小顆粒，避免接種時(shí)堵住槍頭）、酵母膏1 kg、葡萄糖4 kg、白砂糖4 kg、硫酸鎂1 kg、磷酸二氫鉀2 kg、消泡劑80 g，水800 L，pH自然。

按照配方制作發(fā)酵罐，嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行滅菌，待罐溫降至23℃，接入發(fā)酵完成的液體三角瓶菌種。發(fā)酵罐室內(nèi)溫度控制在23℃～25℃，黑暗培養(yǎng)。發(fā)酵罐內(nèi)保持二氧化碳體積分?jǐn)?shù)在0.3%以下，保證發(fā)酵罐內(nèi)氧氣充足。當(dāng)發(fā)酵液體停止供氣時(shí)，菌液不分離，菌絲球大小均勻，大小在2 mm～3 mm，排氣口菌香氣味，無臭腥等其他異味，即發(fā)酵結(jié)束。發(fā)酵罐培養(yǎng)時(shí)間為4 d，經(jīng)檢測(cè)無污染，即可接入制作的菌包中。

3.2 菌包制作

栽培料配方：硬雜木屑50%、玉米芯28%、麥麩18%、玉米粉2%、輕質(zhì)碳酸鈣1%、石膏1%，含水量60%～62%。

保證所有的原材料新鮮無霉變，按照上述配方準(zhǔn)確稱取各種原材料，依次加入到攪拌機(jī)中。經(jīng)3次攪拌后，快速水分測(cè)定儀測(cè)定含水量在60%～62%之間，pH計(jì)測(cè)定培養(yǎng)料pH在4.5～5.5之間，即可傳入全自動(dòng)打包機(jī)料筒內(nèi)，進(jìn)行打包。平均每包重量1.20 kg～1.25 kg，裝料高度控制在 19.0 cm～19.5 cm。裝袋結(jié)束后及時(shí)裝入高溫高壓滅菌鍋內(nèi)，滅菌溫度124℃時(shí)保持150 min。滅菌后測(cè)定pH控制在4.0～4.5，保持菌包內(nèi)孔洞完整。滅菌結(jié)束后將菌包移入萬級(jí)凈化車間，保證冷卻一、冷卻二、冷卻三車間環(huán)境潔凈度在萬級(jí)。當(dāng)菌包中心溫度降至23℃，即可進(jìn)行接種。

我們?cè)诔聊胁⒓缦蚧刈摺ｋm然我已走過這段路，但忽然發(fā)覺倒回頭來看時(shí)，路上的景氣竟截然不同。也許，景色是沒什么變化的，變的只是我的心境。但我是根本不相信在羅馬這樣的城市里會(huì)有什么浪漫的呀！我還沒那么幼稚。

3.3 接種

3.3.1 液體菌種品質(zhì)的測(cè)定指標(biāo)

1）菌絲球大小的測(cè)定方法

發(fā)酵完成后進(jìn)行取樣，發(fā)酵液中取出20個(gè)菌絲球測(cè)量直徑，再除以20得到平均直徑進(jìn)行比較即可，平均直徑較小（一般在2 mm左右）的菌種品質(zhì)較好。

2）菌絲球密度的測(cè)定方法

取2 mL發(fā)酵液置于平皿中，在下面放置一張黑白相間的格子紙，然后進(jìn)行計(jì)數(shù)。平均菌絲球密度在32個(gè)/mL～35個(gè)/mL之間較好。

3）菌絲干重的測(cè)定方法

液體菌種發(fā)酵結(jié)束后，取發(fā)酵液50 mL，3 000 r·min-1離心10 min收集菌絲體，干燥箱80℃干燥至恒重，用電子天平稱量。以菌絲體干重在2.8 g～3 g之間為標(biāo)準(zhǔn)。

4）顯微鏡觀察方法

取少量發(fā)酵液進(jìn)行顯微鏡的微觀觀察，觀察菌絲的生長情況。重點(diǎn)觀察菌絲分枝、隔膜、鎖狀聯(lián)合等是否正常，觀察是否有游動(dòng)的細(xì)菌、酵母菌等雜菌。

3.3.2 液體菌種的選擇

發(fā)酵罐接種后的第3周、第4周進(jìn)行取樣，將取料口通125℃蒸汽進(jìn)行消毒，滅菌20 min。取50 mL發(fā)酵液到無菌三角瓶中，在超凈工作臺(tái)中將其回接到苯酚紅細(xì)菌檢測(cè)液體培養(yǎng)基和細(xì)菌固體培養(yǎng)基中，放置35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。次日觀察回接情況，苯酚紅培養(yǎng)基是否變黃，細(xì)菌培養(yǎng)基是否生長雜菌；另取少量發(fā)酵液進(jìn)行鏡檢，觀察是否有細(xì)菌等污染。使用當(dāng)日，先取樣鏡檢，鏡檢正常，2次回接的苯酚紅液體培養(yǎng)基和細(xì)菌固體培養(yǎng)基正常，發(fā)酵罐菌種菌絲球大小在2 mm～3 mm，菌絲球密度均勻，菌種為菌香味道，無臭刺鼻等味道，即可使用。

3.3.3 自動(dòng)接種機(jī)消毒

將蒸汽發(fā)生器加熱到128℃，通過發(fā)酵罐連接接種機(jī)的管道將蒸汽通入自動(dòng)接種機(jī)中，確保接種機(jī)每根管道冷水排干凈，當(dāng)壓力表壓力達(dá)到0.1 MPa開始計(jì)時(shí)，滅菌60 min。計(jì)時(shí)結(jié)束，通入液體菌種進(jìn)行冷卻，接種機(jī)管道冷卻至23℃，開始接種。

3.3.4 接種

接種人員嚴(yán)格按照百級(jí)凈化車間標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行著裝、消毒。開始接種時(shí)，先測(cè)量12支接種槍頭是否噴料正常，每包接種量控制在25 g～30 g之間，確保菌種不外漏，噴射后沿著套環(huán)向下流，槍頭直噴射料面至孔洞內(nèi)，直到洞底部為標(biāo)準(zhǔn)。

3.4 菌包培養(yǎng)

3.4.1 菌絲定植培養(yǎng)

接種后的菌包移入培養(yǎng)房進(jìn)行菌絲定植培養(yǎng)，培養(yǎng)房溫度控制在23℃～25℃，前7天不通風(fēng)，第8天進(jìn)行通風(fēng)。保持培養(yǎng)房內(nèi)二氧化碳體積分?jǐn)?shù)0.3%～0.5%之間，定期測(cè)量包心溫度，不能超過26℃。菌絲完全蓋住料面后，即第10天轉(zhuǎn)入大培養(yǎng)庫。

3.4.2 菌絲發(fā)熱期培養(yǎng)

進(jìn)庫后，培養(yǎng)房溫度保持在21℃～23℃，長滿菌絲后溫度提高至23℃～25℃，18 d菌包長滿，第19天進(jìn)入出菇房。

3.5 出菇管理

菌包移入到網(wǎng)格式出菇房，具體管理如下。

第1天，將菌包插入網(wǎng)格中，去掉蓋子套環(huán)，割掉袋口5 cm，確保不影響料面；控制出菇房溫度18℃～20℃，光照300 lx左右，采用超聲波加濕保持菇房內(nèi)空間濕度88%左右。

第2天～第6天，原基形成階段，菇房溫度保持18℃～20℃，光照300 lx左右，濕度88%，二氧化碳體積分?jǐn)?shù)控制在0.03%～0.05%之間。第5天料面出現(xiàn)白色子實(shí)體狀隆起，原基將逐漸長大，并明顯長出袋口。

第7天～第10天，保持上述溫度濕度光照，隨著原基的分化，需增加換氣次數(shù)，控制室內(nèi)二氧化碳的體積分?jǐn)?shù)在0.01%～0.03%之間。

第11天，達(dá)到成熟標(biāo)準(zhǔn)，見圖1。

圖1 白參菌子實(shí)體Fig.1 The fruit body of Schizophyllum communer

如圖1所示，當(dāng)子實(shí)體葉片平展即可采收，采收的前一天停止?jié)菜?/p>

第12天，第一潮菇采收后，將料面清理干凈，房間停止?jié)菜? d，再按上述方法出菇管理，進(jìn)行第二潮菇培養(yǎng)。10天后又產(chǎn)出第二潮菇。工廠化管理一般采收2潮菇，每包平均產(chǎn)量120 g～150 g，生物學(xué)效率45%左右。

4 采收保鮮

4.1 鮮品保鮮

當(dāng)白參菌子實(shí)體葉片平展時(shí)達(dá)到采收標(biāo)準(zhǔn)，用采菇刀從子實(shí)體基部割下，清理菇根基料；按照銷售要求，稱重裝盒包好保鮮膜，放入泡沫箱中；轉(zhuǎn)入2℃～4℃冷庫，貨架期為12 d～14 d。

4.2 干品烘干

將白參菌按照級(jí)別分好類；采用烘干箱進(jìn)行烘干，溫度升至60℃，直至白參菌烘干為止；烘干后，使用塑料袋包裝，置于干燥無蟲的房間。

5 小結(jié)

白參菌作為一種食藥兼具的珍稀食用菌類，在我國云南省采食野生白參菌較多。由于其獨(dú)特的香味和較高的藥用價(jià)值，目前已作為高檔的食用菌走進(jìn)百姓的餐桌。新鮮的白參菌價(jià)格在市場批發(fā)價(jià)為20元/kg～25元/kg不等，白參菌干品價(jià)格在100元/kg～120元/kg，對(duì)于生產(chǎn)廠家而言，經(jīng)濟(jì)效益較為可觀。隨著消費(fèi)者的認(rèn)可與青睞，目前白參菌市場呈供小于求趨勢(shì)，工廠化生產(chǎn)的白參菌大小均勻、朵型好，分類標(biāo)準(zhǔn)，更利于白參菌在市場的流通與推廣。通過對(duì)白參菌的液體菌種制作、裝袋配方、養(yǎng)菌、催蕾出菇、采收、包裝冷藏等方面進(jìn)行研究，對(duì)白參菌工廠化生產(chǎn)具有一定的指導(dǎo)意義，但是白參菌配方的優(yōu)化、產(chǎn)量的提高、品質(zhì)的提升仍需進(jìn)行下一步探索。