雷公藤中倍半萜生物堿類化學(xué)成分的研究

閆建功，王一竹，吳先富，陳明慧，鄭玉光，王亞丹，馬雙成

?化學(xué)成分 ?

雷公藤中倍半萜生物堿類化學(xué)成分的研究

閆建功1, 2，王一竹3，吳先富2，陳明慧2，鄭玉光1，王亞丹2*，馬雙成2*

1. 河北中醫(yī)學(xué)院 河北省中藥炮制技術(shù)創(chuàng)新中心，河北 石家莊 050200 2. 中國食品藥品檢定研究院，北京 100050 3. 清華大學(xué)第一附屬醫(yī)院 藥學(xué)部，北京 100016

對雷公藤乙醇提取物氯仿部位中的倍半萜生物堿類成分進(jìn)行研究。采用酸提堿沉法，結(jié)合中性氧化鋁、十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）及半制備高效液相等多種色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，并運(yùn)用1D-NMR、2D-NMR、MS、ECD等波譜學(xué)方法對化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。從雷公藤乙醇提取物氯仿部位中分離得到5個(gè)倍半萜生物堿類成分，分別鑒定為(1,4,5,6,7,8,9,10)-1,8,11-triacetoxy-7-nicotinoyloxy-4,5-dihydroxy-dihydroagarofuran（1）、triptersinine U（2）、macroregeline F（3）、雷公藤寧堿B（4）和triptonine B（5）。化合物1為新化合物，命名為雷公藤司寧Z15；化合物3為首次從該植物中分離得到。

雷公藤；倍半萜生物堿；雷公藤寧堿B；雷公藤司寧Z15；macroregeline F

雷公藤Hook. f.為衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，主產(chǎn)于我國福建、臺灣、江蘇、浙江、安徽、湖南等地，具有祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、消腫止痛、殺蟲解毒等功效，臨床上廣泛用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病，療效顯著[1-4]。雷公藤中的化學(xué)成分復(fù)雜，主要包括二萜、三萜、生物堿及木脂素等[5-6]。其中，生物堿類成分含量相對較高，其結(jié)構(gòu)多數(shù)以高度氧化的二氫呋喃倍半萜為母核，取代基變化多樣[7]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，該類成分具有多種藥理活性，如抗炎、免疫抑制、抗腫瘤、抗病毒等[8-12]，因此具有較大的研究和開發(fā)價(jià)值。本研究采用酸提堿沉的方法，從雷公藤乙醇提取物的氯仿部位富集得到總生物堿，進(jìn)一步采用中性氧化鋁、十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）及半制備高效液相等多種色譜方法從中分離得到5個(gè)化合物（圖1），經(jīng)1D-NMR、2D-NMR、MS、ECD等波譜學(xué)方法分別鑒定為(1,4,5,6, 7,8,9,10)-1,8,11-triacetoxy-7-nicotinoyloxy-4,5- dihydroxy-dihydroagarofuran（1）、triptersinine U（2）、macroregeline F（3）、雷公藤寧堿B（wilfornine B，4）和triptonine B（5）。其中，化合物1為新的倍半萜生物堿類化合物，命名為雷公藤司寧Z15（triptersinine Z15）。化合物3為首次從該植物中分離得到。

圖1 化合物1～5的結(jié)構(gòu)

1 儀器與材料

Bruker AVANCE NEO 600 MHz型核磁共振波譜儀（瑞士Bruker公司），Waters synapt G2-S高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Waters公司），Nicolet iN10 MX顯微紅外成像光譜儀（美國ThermoFisher公司），JASCO J-815型圓二色譜儀（日本Jasco公司），Waters e2695型高效液相色譜儀（美國Waters公司），Waters全自動(dòng)純化系統(tǒng)（美國Waters公司），EYELASB-1000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本Eyela公司），AE-240電子分析天平（瑞士Mettler公司），Waters XBridge Prep OBD C18制備色譜柱（150 mm×30 mm，10 μm，美國Waters公司），Dikam Inspire C18半制備色譜柱（250 mm×10 mm，5 μm，北京迪馬科技有限公司），ODS色譜填料（50 μm，日本YMC公司），中性氧化鋁色譜填料（100～200目，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），Milli-Q純水儀（美國Millipore公司），所用試劑為分析純（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）或色譜純（美國ThermoFisher公司）。

雷公藤藥材購自湖南，產(chǎn)地為湖南隆回縣，經(jīng)中國食品藥品檢定研究院康帥副研究員鑒定為衛(wèi)矛科植物雷公藤Hook. f.的干燥根，標(biāo)本（10106900006）保存于中國食品藥品檢定研究院中藥民族藥檢定所標(biāo)本館。

2 提取與分離

雷公藤藥材（50 kg）粉碎后用10倍體積95%乙醇回流提取3次，合并提取液，減壓濃縮得到總浸膏，加水分散后用氯仿萃取3次，合并有機(jī)層，減壓回收溶劑得到氯仿部位。取該部位120 g用適量醋酸乙酯溶解，采用等體積5%鹽酸溶液萃取3次，合并酸液，用氨水調(diào)pH至8～9，濾過，得到總生物堿粗品。將該粗品用醋酸乙酯溶解后通過中性氧化鋁色譜柱，采用醋酸乙酯洗脫以除去雜質(zhì)，回收溶劑得到總生物堿21.36 g。然后將總生物堿進(jìn)行ODS柱色譜分離，以甲醇-水（35∶65～100∶0）為流動(dòng)相梯度洗脫，經(jīng)HPLC分析后合并得到12個(gè)組分（Fr. 1～12）。

Fr. 3（137 mg）通過全自動(dòng)純化系統(tǒng)，使用Dikam Inspire C18半制備柱（250 mm×10 mm，5 μm），以乙腈-水（35∶65）為流動(dòng)相，經(jīng)反復(fù)分離純化得到化合物1（R＝11.98 min，6.45 mg）。

Fr. 5（1.2 g）通過全自動(dòng)純化系統(tǒng)，使用Waters XBridge Prep OBD C18制備柱（150 mm×30 mm，10 μm），以乙腈-水（35∶65～60∶40）為流動(dòng)相，梯度洗脫，得到8個(gè)組分Fr. 5-1～5-8。其中，F(xiàn)r. 5-2（330 mg）進(jìn)一步經(jīng)Dikam Inspire C18半制備柱分離（乙腈-水40∶60），得到化合物2（R＝20.36 min，52.67 mg）；Fr. 5-3（80 mg）經(jīng)半制備柱反復(fù)分離（乙腈-水43∶57），得到化合物3（R＝33.19 min，1.72 mg）和4（R＝42.86 min，6.40 mg）；Fr. 5-7（120 mg）經(jīng)半制備柱反復(fù)分離（乙腈-水50∶50），得到化合物5（R＝39.50 min，14.84 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末（甲醇）；HR-ESI-MS顯示準(zhǔn)分子離子峰[M＋H]+/550.226 8 （計(jì)算值550.228 8），結(jié)合1H-NMR和13C-NMR譜，確定其分子式為C27H35O11N，不飽和度為11。IR光譜在3386、2926、1744、1235 cm?1等處具有吸收帶，提示分子中含有羥基、甲基、羰基及酯鍵等官能團(tuán)。1H-NMR (600 MHz, CDCl3) 數(shù)據(jù)（表1）顯示有6個(gè)甲基信號[H1.62 (3H, s, H-12), 1.64 (3H, s, H-14), 1.61 (3H, s, H-15), 1.91 (3H, s, 1-OAc), 1.95 (3H, s, 8-OAc), 2.05 (3H, s, 11-OAc)]，4個(gè)連氧次甲基信號[H5.28 (1H, dd,= 11.4, 4.2 Hz, H-1), 5.31 (1H, d,= 4.2 Hz, H-5), 5.66 (1H, dd,= 5.4, 4.2 Hz, H-7), 5.55 (1H, d,= 5.4 Hz, H-8)]，1組連氧亞甲基信號H4.87, 4.55 (各1H,= 13.2 Hz, H-11a, 11b)，1個(gè)脂肪族次甲基信號H2.57 (1H, d,= 4.2 Hz, H-6)，2組脂肪族亞甲基信號[H1.88 (1H, m, H-2a), 1.75 (1H, m, H-2b) 和1.94 (1H, m, H-3a), 1.77 (1H, m, H-3b)]，以及1組3-取代的吡啶環(huán)質(zhì)子信號[H9.28 (1H, s, 7-ONic-2), 8.32 (1H, dt,= 7.8, 1.8 Hz, 7-ONic-4), 7.45 (1H, dd,= 7.8, 4.8 Hz, 7-ONic-5), 8.83 (1H, d,= 3.6 Hz, 7-ONic-6)]。13C-NMR (150 MHz, CDCl3) 數(shù)據(jù)（表1）中，除與上述基團(tuán)對應(yīng)的碳信號外，還顯示3個(gè)連氧季碳信號C73.2 (C-4), 91.3 (C-10) 和83.1 (C-13)，1個(gè)脂肪族季碳信號C50.9 (C-9)，以及4個(gè)酯羰基信號C164.6, 169.7, 169.1和170.2。通過分析HSQC譜，進(jìn)一步確定碳、氫的數(shù)據(jù)歸屬。

1H-1H COSY譜顯示存在H-1/H-2/H-3和H-5/H-6/H-7/H-8兩個(gè)自旋偶合系統(tǒng)，結(jié)合HMBC譜中H-1/C-8, C-9；H-2/C-9；H-3/C-4, C-10；H-6/C-5, C-10；H-7/C-5, C-9；H-8/C-1, C-9；H-11/C-1, C-8, C-9, C-10；H-12/C-3, C-4, C-10；H-14/C-6, C-13, C-15以及H-15/C-6, C-13, C-14的遠(yuǎn)程相關(guān)信號，可構(gòu)建出多氧取代的二氫呋喃倍半萜的骨架。與此同時(shí)，HMBC譜中的甲基質(zhì)子與羰基信號H1.91與C169.7,H1.95與C169.1,H2.05與C170.2對應(yīng)相關(guān)，吡啶環(huán)上的質(zhì)子H8.32與C164.6的羰基信號相關(guān)，可以推斷分子中存在3個(gè)乙酰基和1個(gè)煙酰基。而根據(jù)H-1與C169.7, H-8與C169.1, H-11與C170.2和H-7與C164.6分別存在遠(yuǎn)程相關(guān)，可以確定3個(gè)乙酰基分別在1, 8, 11位成酯，而煙酰基則在7位成酯，由此確定了化合物1的平面結(jié)構(gòu)。ROESY譜中，通過H-8/H-1, H-7, H-14以及H-12/H-5, H-11a, H-11b的相關(guān)信號，確定化合物1的相對構(gòu)型。以上2D-NMR譜中主要的相關(guān)信號見圖2。

表1 化合物1的1H- 和13C-NMR數(shù)據(jù)(600/150 MHz, CDCl3)

Table 1 1H- and 13C-NMR data of compound 1(600/150 MHz,CDCl3)

碳位δCδH 177.95.28 (1H, dd, J = 11.4, 4.2 Hz) 225.01.88 (1H, m), 1.75 (1H, m) 337.21.94 (1H, m), 1.77 (1H, m) 473.2 574.95.31 (1H, d, J = 4.2 Hz) 654.02.57 (1H, d, J = 4.2 Hz) 771.65.66 (1H, dd, J = 5.4, 4.2 Hz) 872.45.55 (1H, d, J = 5.4 Hz) 950.9 1091.3 1161.14.87 (1H, d, J = 13.2 Hz)4.55 (1H, d, J = 13.2 Hz) 1221.81.62 (3H, s) 1383.1 1424.81.64 (3H, s) 1529.91.61 (3H, s) 7-ONic-2150.99.28 (1H, s) 7-ONic-3125.7 7-ONic-4137.18.32 (1H, dt, J = 7.8, 1.8 Hz) 7-ONic-5123.57.45 (1H, dd, J = 7.8, 4.8 Hz) 7-ONic-6153.98.83 (1H, d, J = 3.2 Hz) 7-ONic-7164.6 1-OAc21.0/169.71.91 (3H, s) 8-OAc20.7/169.11.95 (3H, s) 11-OAc21.4/170.22.05 (3H, s)

圖2 化合物1的關(guān)鍵1H-1H COSY ()、HMBC () (A) 和ROESY (B) 相關(guān)信號

化合物1的絕對構(gòu)型可能存在2種情況（1a和1b），如圖3-A所示，通過將其實(shí)驗(yàn)獲得的ECD譜與2種構(gòu)型的計(jì)算ECD譜進(jìn)行比較來確定絕對構(gòu)型。具體來講，以化合物1a為模板分子進(jìn)行計(jì)算，運(yùn)用TDDFT理論、B3LYP泛函及6-311G (d, p)基組，以乙腈為溶劑（SMD溶劑化模型）進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，共優(yōu)化得到15個(gè)構(gòu)象。下一步將其在TZVP基組水平上以Cam-B3LYP泛函計(jì)算得到玻爾茲曼加權(quán)平均的ECD譜圖，見圖3-B。化合物1的實(shí)驗(yàn)ECD譜與1a的計(jì)算ECD譜Cotton效應(yīng)基本一致，由此推斷二者的絕對構(gòu)型相同。

綜上所述，化合物1的結(jié)構(gòu)鑒定為(1,4,5, 6,7,8,9,10)-1,8,11-triacetoxy-7-nicotinoyloxy-4,5-dihydroxydihydroagarofuran，將其命名為雷公藤司寧Z15。

化合物2：白色粉末（甲醇）；HR-ESI-MS: 818.254 8 [M＋H]+，分子式C38H43O19N；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.85 (1H, s, H-5), 5.73 (1H, d,= 3.0 Hz, H-1), 5.56 (1H, t,= 4.2 Hz, H-7), 5.41 (1H, d,= 6.0 Hz, H-8), 5.30 (1H, d,= 13.2 Hz, H-11a), 5.28 (1H, d,= 3.6 Hz, H-2), 5.25 (1H, d,= 12.0 Hz, H-15a), 5.07 (1H, d,= 2.4 Hz, H-3), 4.47 (1H, d,= 13.2 Hz, H-11b), 4.20 (1H, d,= 12.0 Hz, H-15b), 2.44 (1H, d,= 3.6 Hz, H-6), 1.75 (3H, s, H-14), 1.58 (3H, s, H-12), 9.01 (1H, d,= 0.6 Hz, 15-ONic-2), 8.77 (1H, dd,= 4.8, 1.2 Hz, 15-ONic-6), 8.00 (1H, d,= 7.8 Hz, 15-ONic-4), 7.30 (1H, dd,= 7.8, 4.8 Hz, 15-ONic-5), 7.92 (1H, s, 3-OFu-2), 7.09 (1H, s, 3-OFu-5), 6.66 (1H, s, 3-OFu-4), 1.87 (3H, s, 1-OAc), 2.00 (3H, s, 2-OAc), 2.19 (3H, s, 5-OAc), 2.15 (3H, s, 7-OAc), 2.16 (3H, s, 8-OAc), 2.27 (3H, s, 11-OAc)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 73.0 (C-1), 69.2 (C-2), 75.4 (C-3), 69.7 (C-4), 73.9 (C-5), 50.9 (C-6), 68.9 (C-7), 71.0 (C-8), 52.0 (C-9), 93.5 (C-10), 60.3 (C-11), 23.0 (C-12), 84.2 (C-13), 18.5 (C-14), 70.3 (C-15), 150.8 (15-ONic-2), 125.1 (15-ONic-3), 136.9 (15-ONic-4), 123.2 (15-ONic-5), 153.8 (15-ONic-6), 165.1 (15-ONic-7), 148.1 (3-OFu-2), 118.8 (3-OFu-3), 109.7 (3-OFu-4), 143.9 (3-OFu-5), 161.0 (3-OFu-6), 169.4/20.5 (1-OAc), 170.1/20.5 (2-OAc), 169.8/21.0 (5-OAc), 168.7/21.5 (7-OAc), 169.0/21.0 (8-OAc), 170.1/21.3 (11-OAc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對照基本一致[13]，故鑒定為triptersinine U。

圖3 化合物1的2種可能絕對構(gòu)型(A)及其實(shí)驗(yàn)和計(jì)算ECD譜(B)

化合物3：白色粉末（甲醇）；HR-ESI-MS830.250 8 [M＋H]+，分子式C39H43O19N；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 8.76 (1H, dd,= 4.8, 1.8 Hz, H-6′), 8.20 (1H, dd,= 7.8, 1.8 Hz, H-4′), 7.34 (1H, dd,= 7.8, 4.8 Hz, H-5′), 5.95 (1H, d,= 12.6 Hz, H-15a), 5.67 (1H, d,= 3.6 Hz, H-1), 5.48 (1H, s, H-8), 5.28 (1H, d,= 3.0 Hz, H-5), 5.17 (1H, t,= 3.0 Hz, H-2), 4.96 (1H, d,= 3.0 Hz, H-3), 4.88 (1H, d,= 13.2 Hz, H-11a), 4.33 (1H, d,= 13.2 Hz, H-11b), 3.93 (1H, m, H-7′a), 3.69 (1H, d,= 12.6 Hz, H-15b), 2.94 (1H, m, H-7′b), 2.50 (1H, m, H-8′a), 2.28 (1H, m, H-8′b), 3.08 (1H, d,= 0.6 Hz, H-6), 2.12 (1H, d,= 5.4 Hz, H-6), 1.94 (3H, s, H-12), 1.79 (3H, s, H-10′), 1.37 (3H, s, H-14), 7.78 (1H, s, 9′-OFu-2), 7.32 (1H, t,= 1.8 Hz, 9′-OFu-5), 6.58 (1H, d,= 1.2 Hz, 9′-OFu-4), 6.04 (1H, d,= 1.2 Hz, 4-OH), 6.00 (1H, d,= 3.6 Hz, 5-OH), 1.78 (3H, s, 1-OAc), 2.17 (3H, s, 2-OAc), 2.00 (3H, s, 8-OAc), 1.93 (3H, s, 11-OAc)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 70.3 (C-1), 69.4 (C-2), 77.6 (C-3), 71.9 (C-4), 76.1 (C-5), 64.1 (C-6), 197.1 (C-7), 79.4 (C-8), 52.1 (C-9), 94.0 (C-10), 60.0 (C-11), 24.5 (C-12), 86.8 (C-13), 18.7 (C-14), 71.2 (C-15), 163.3 (C-2′), 124.2 (C-3′), 138.4 (C-4′), 121.5 (C-5′), 152.8 (C-6′), 31.0 (C-7′), 38.3 (C-8′), 81.9 (C-9′), 21.9 (C-10′), 171.5 (C-11′), 167.7 (C-12′), 149.2 (9′-OFu-2), 118.5 (9′-OFu-3), 110.2 (9′-OFu-4), 143.3 (9′-OFu-5), 162.5 (9′-OFu-6), 168.1/20.2 (1-OAc), 168.0/21.0 (2-OAc), 168.7/20.0 (8-OAc), 169.6/20.5 (11-OAc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對照基本一致[14]，故鑒定化合物3為macroregeline F。

化合物4：白色粉末（甲醇）；HR-ESI-MS: 884.297 7 [M＋H]+，分子式C43H49O19N；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 8.77 (1H, dd,= 4.8, 1.8 Hz, H-6′), 8.15 (1H, dd,= 7.8, 1.8 Hz, H-4′), 7.34 (1H, dd,= 7.8, 4.8 Hz, H-5′), 5.87 (1H, d,= 12.6 Hz, H-15a), 5.57 (1H, d,= 3.6 Hz, H-1), 5.45 (1H, dd,= 4.2, 0.6 Hz, H-7), 5.25 (1H, d,= 3.0 Hz, H-5), 5.19 (1H, d,= 13.2 Hz, H-11a), 5.18 (1H, dd,= 3.6, 2.4 Hz, H-2), 5.16 (1H, d,= 5.4 Hz, H-8), 4.99 (1H, d,= 2.4 Hz, H-3), 4.47 (1H, d,= 13.2 Hz, H-11b), 3.91 (1H, m, H-7′a), 3.62 (1H, d,= 12.6 Hz, H-15b), 2.97 (1H, m, H-7′b), 2.60 (1H, m, H-8′a), 2.36 (1H, m, H-8′b), 2.34 (1H, d,= 4.8 Hz, H-6), 1.89 (3H, s, H-12), 1.79 (3H, s, H-10′), 1.27 (3H, s, H-14), 7.78 (2H, d,= 7.2 Hz, 9′-OBz-2, 6), 7.50 (1H, brt,= 7.2 Hz, 9′-OBz-4), 7.35 (2H, brt,= 7.2 Hz, 9′-OBz-3, 5), 1.56 (3H, s, 1-OAc), 2.14 (3H, s, 2-OAc), 2.10 (3H, s, 7-OAc), 1.85 (3H, s, 8-OAc), 2.11 (3H, s, 11-OAc)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 72.0 (C-1), 69.8 (C-2), 78.4 (C-3), 71.8 (C-4), 74.1 (C-5), 52.2 (C-6), 68.7 (C-7), 71.9 (C-8), 50.6 (C-9), 92.7 (C-10), 61.0 (C-11), 24.2 (C-12), 85.3 (C-13), 17.6 (C-14), 70.9 (C-15), 163.0 (C-2′), 124.7 (C-3′), 138.3 (C-4′), 121.3 (C-5′), 152.7 (C-6′), 31.0 (C-7′), 38.4 (C-8′), 82.0 (C-9′), 22.1 (C-10′), 171.9 (C-11′), 167.8 (C-12′), 129.5 (9′-OBz-1), 130.4 (9′-OBz-2, 6), 128.0 (9′-OBz-3, 5), 133.1 (9′-OBz-4), 166.0 (9′-OBz-7), 168.1/20.1 (1-OAc), 168.2/21.1 (2-OAc), 169.9/21.3 (7-OAc), 168.6/20.3 (8-OAc), 169.7/20.9 (11-OAc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對照基本一致[10]，故鑒定化合物4為雷公藤寧堿B。

化合物5：白色粉末（甲醇）；HR-ESI-MS968.280 9 [M＋H]+，分子式C46H49O22N；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 8.77 (1H, dd,= 4.8, 1.8 Hz, H-6′), 8.14 (1H, dd,= 7.8, 1.8 Hz, H-4′), 7.32 (1H, dd,= 7.8, 4.8 Hz, H-5′), 6.93 (1H, s, H-5), 5.64 (1H, d,= 4.2 Hz, H-1), 5.62 (1H, d,= 12.0 Hz, H-15a), 5.55 (1H, dd,= 6.0, 4.2 Hz, H-7), 5.47 (1H, d,= 13.8 Hz, H-11a), 5.41 (1H, dd,= 4.2, 2.4 Hz, H-2), 5.26 (1H, d,= 6.0 Hz, H-8), 5.02 (1H, d,= 1.8 Hz, H-3), 4.28 (1H, d,= 13.8 Hz, H-11b), 3.80 (1H, d,= 12.0 Hz, H-15b), 3.75 (1H, m, H-7′a), 2.97 (1H, m, H-8′a), 2.86 (1H, m, H-7′b), 2.31 (1H, d,= 4.2 Hz, H-6), 2.28 (1H, m, H-8′b), 1.81 (3H, s, H-10′), 1.59 (3H, d,= 0.6 Hz, H-12), 1.36 (3H, s, H-14), 8.31 (1H, s, 2-OFu-2), 7.49 (1H, t,= 1.8 Hz, 2-OFu-5), 6.89 (1H, d,= 1.8 Hz, 2-OFu-4), 7.75 (1H, d,= 0.6 Hz, 9′-OFu-2), 7.34 (1H, t,= 1.8 Hz, 9′-OFu-5), 6.56 (1H, d,= 1.8 Hz, 9′-OFu-4), 1.78 (3H, s, 1-OAc), 2.17 (3H, s, 5-OAc), 2.14 (3H, s, 7-OAc), 1.92 (3H, s, 8-OAc), 2.28 (3H, s, 11-OAc)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 71.9 (C-1), 69.3 (C-2), 78.3 (C-3), 69.5 (C-4), 73.7 (C-5), 50.9 (C-6), 68.4 (C-7), 71.8 (C-8), 52.2 (C-9), 93.4 (C-10), 60.6 (C-11), 22.9 (C-12), 84.2 (C-13), 17.5 (C-14), 69.8 (C-15), 162.2 (C-2′), 125.6 (C-3′), 138.3 (C-4′), 121.1 (C-5′), 152.3 (C-6′), 30.6 (C-7′), 37.7 (C-8′), 81.4 (C-9′), 23.5 (C-10′), 171.6 (C-11′), 167.8 (C-12′), 148.6 (2-OFu-2), 118.5 (2-OFu-3), 144.1 (2-OFu-4), 109.9 (2-OFu-5), 160.6 (2-OFu-6), 149.0 (9′-OFu-2), 118.9 (9′-OFu-3), 143.2 (9′-OFu-4), 110.3 (9′-OFu-5), 161.8 (9′-OFu-6), 169.8/20.3 (1-OAc), 169.9/21.6 (5-OAc), 170.7/21.0 (7-OAc), 168.6/20.4 (8-OAc), 168.1/21.3 (11-OAc)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對照基本一致[15]，故鑒定化合物5為triptonine B。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會(huì). 中國植物志 (第45卷3分冊) [M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1999: 178.

[2] 時(shí)繼田. 藥用本草 [M]. 天津: 天津古籍出版社, 2007: 125.

[3] 朱勝楠, 張靖, 賈路路, 等. 雷公藤藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展 [J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘, 2019, 19(18): 15-16.

[4] 馬文, 茍斌虎, 謝川, 等. 艾灸聯(lián)合雷公藤總甙治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[J]. 世界中醫(yī)藥, 2020, 15(3): 473-476.

[5] Brinker A M, Ma J, Lipsky P E,. Medicinal chemistry and pharmacology of genus(Celastraceae) [J]., 2007, 68(6): 732-766.

[6] 薛璟, 賈曉斌, 譚曉斌, 等. 雷公藤化學(xué)成分及其毒性研究進(jìn)展 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2010, 25(5): 726-733.

[7] 閆建功, 吳先富, 陳明慧, 等. 雷公藤屬植物中倍半萜吡啶大環(huán)內(nèi)酯類生物堿的波譜學(xué)特征 [J]. 中國中藥雜志, 2021, doi: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20211207.202.

[8] 劉莉, 閆君, 舒積成, 等. 雷公藤生物堿類成分及其藥理活性研究進(jìn)展 [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2019, 31(12): 2170-2181.

[9] Wang C, Li C J, Yang J Z,. Anti-inflammatory sesquiterpene derivatives from the leaves of[J]., 2013, 76(1): 85-90.

[10] Duan H, Takaishi Y, Momota H,. Immunosuppressive sesquiterpene alkaloids from[J]., 2001, 64(5): 582-587.

[11] Yue M, Shen X J, Liu Y X,. Effect of wilfortrine on human hepatic cancer HepG2 cell proliferation potential[J]., 2015, 14(4): 15349-15355.

[12] Horiuch M, Murakami C, Fukamiya N,. Tripfordines A-C, sesquiterpene pyridine alkaloids from, and structure anti-HIV activity relationships ofalkaloids [J]., 2006, 69(9): 1271-1274.

[13] Gao C, Lou L L, Wang D,. Chemical constituents from the roots ofand their cytotoxic activity [J]., 2017, 19(7): 725-731.

[14] Fan D S, Li T, Zheng Z Y,. Macrolide sesquiterpene pyridine alkaloids from the stems of[J]., 2019, 73(1): 23-33.

[15] Morota T, Yang C M, Ikeya Y,. Sesquiterpene alkaloids from[J]., 1995, 39(5): 1219-1222.

Chemical constituents of sesquiterpene alkaloids from

YAN Jian-gong1, 2, WANG Yi-zhu3, WU Xian-fu2, CHEN Ming-hui2, ZHENG Yu-guang1, WANG Ya-dan2, MA Shuang-cheng2

1. Traditional Chinese Medicine Processing Technology Innovation Center of Hebei Province, Hebei University of Chinese Medicine, Shijiazhuang 050200, China 2. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China 3. Department of Pharmacy, the First Hospital of Tsinghua University, Beijing 100016, China

To study the sesquiterpene alkaloids from the chloroform fraction of the ethanolic extract of.Compounds were isolated and purified by acid extraction and alkaline precipitation method, combined with various chromatographic techniques such as neutral alumina, octadecylsilane bonded silica (ODS) and semi-preparative high performance liquid chromatography. Their structures were elucidated by means of various spectroscopic techniques such as 1D-NMR, 2D-NMR, MS, and ECD.A total of five sesquiterpene alkaloids were isolated from the chloroform fraction of the ethanolic extract of, and identified as (1,4,5,6,7,8,9,10)-1,8,11-triacetoxy-7-nicotinoyloxy- 4,5-dihydroxy-dihydroagarofuran (1), triptersinine U (2), macroregeline F (3), wilfornine B (4), and triptonine B (5).Compound 1 is a new sesquiterpene alkaloid named triptersinine Z15, and compound 3 is isolated fromfor the first time.

Hook. f.; sesquiterpene alkaloids; wilfornine B; triptersinine Z15; macroregeline F

R284.1

A

0253 - 2670(2022)07 - 1933 - 06

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.07.001

2022-02-09

中國食品藥品檢定研究院中藥所學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目：雷公藤及制劑的質(zhì)量研究（1020050090113）

閆建功，男，在讀碩士，主要從事中藥活性物質(zhì)基礎(chǔ)研究工作。E-mail: yan_jiangong@sina.cn

馬雙成，研究員，主要從事中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究及質(zhì)量控制工作。E-mail: masc@nifdc.org.cn

王亞丹，副研究員，主要從事中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究及質(zhì)量控制工作。E-mail: y.dwang@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]