橋尾蛋白磷酸化參與大鼠螺旋神經節神經元GABAA受體內化△

林曉宇 韋芳玉 覃江圓 葉莞麗 易健啟 陳慧英 劉金蘭 覃繼新 蘇紀平

GABAA受體(GABA type A receptors，GABAARs)是神經系統中重要的抑制性受體，介導GABA發揮快速的突觸抑制作用，與興奮性受體共同維持神經元和神經網絡的興奮-抑制平衡[1]。GABAARs在胞膜表達，存在內化與外化的動態平衡，當胞膜GABAARs表達下降，興奮-抑制失衡，將導致神經元興奮毒性，從而介導多種神經系統疾病，如腦缺血、癲癇等。維持GABAARs在細胞膜上的動態平衡受多個環節、多種因素的影響，包括受體自身的翻譯后修飾以及受體轉運等，其中，與GABAARs相互作用的橋尾蛋白(gephyrin)對受體內化具有重要作用。橋尾蛋白(gephyrin)與GABAARsα1-3、γ2亞基直接結合或共定位，負責將GABAARs錨定在細胞膜上，敲除橋尾蛋白后突觸后膜的GABAARs減少。橋尾蛋白的功能與其C域上存在多個磷酸化修飾位點有關，研究證明，糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β，GSK3β)磷酸化修飾橋尾蛋白S270位點[2～4]，C域上絲氨酸S270磷酸化增強會減弱微小抑制性突觸后電流，抑制S270磷酸化增加GABAARs突觸后密度[2]。盡管有報道耳蝸存在橋尾蛋白[5]，但是，關于橋尾蛋白在聽覺神經系統的作用卻知之甚少。

Qin等[6]發現水楊酸鈉(sodium salicylate，SS)抑制螺旋神經節神經元(spiral ganglion neurons，SGNs)膜上的GABAARs表達，可逆地抑制GABAARs電流，SGNs興奮毒性與SS誘導的GABAARsβIII亞基S383磷酸化增強有關，然而，GABAARs磷酸化后的內化與橋尾蛋白的關系尚不清楚。考慮在SS作用下，SGNs中的橋尾蛋白S270磷酸化增強，介導GABAARs的內化增強，使膜上GABAARs表達減少，從而介導SGNs的興奮毒性作用;鋰離子通過競爭性結合GSK3β活性需求的Mg2+位點抑制GSK3β，體外1～2 mM的鋰離子濃度即可抑制GSK3β活性[7]，故可通過LiCl抑制S270磷酸化觀察GABAARs內化是否恢復。……