非小細(xì)胞肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與外周血CD4/CD8比值關(guān)系的研究

彭勇 李龍 楊松 張義晗 王元漢

(貴州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院(貴州省腫瘤醫(yī)院)胸外科,貴州 貴陽 550001)

2018年全球癌癥數(shù)據(jù)顯示，肺癌的發(fā)病率及死亡率均位居第一位[1-3]。多項(xiàng)相關(guān)研究顯示在惡性腫瘤形成過程中腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫抑制因子抑制淋巴細(xì)胞分化，使得T淋巴細(xì)胞中CD4+細(xì)胞比例降低，免疫反應(yīng)誘導(dǎo)及效應(yīng)不足，特異抗腫瘤效應(yīng)下降，CD8+T細(xì)胞反應(yīng)性增多，使得其直接作用于B細(xì)胞表面的同種異型受體，使與腫瘤抗原結(jié)合的受體被封閉，CD8+T細(xì)胞升高則免疫反應(yīng)下降，CD4/CD8比值下降，免疫抑制效應(yīng)高于免疫誘導(dǎo)，多提示預(yù)后不佳[4]。本研究納入不同分期、年齡、性別、吸煙史的可手術(shù)切除的非小細(xì)胞肺癌患者，采集其圍手術(shù)期及術(shù)后不同時(shí)期隨訪的相關(guān)資料及外周血T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)據(jù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 將2014年3月至2015年7月所有于我科進(jìn)行根治手術(shù)的Ⅰa-Ⅲa期非小細(xì)胞肺癌納入研究，研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)備案并批準(zhǔn)。進(jìn)行相關(guān)資料的收集，并按照計(jì)劃隨訪復(fù)查，隨訪滿5年或隨訪至復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移為觀察終點(diǎn)，最終從124名入組患者中篩選出77例能夠按照計(jì)劃完成隨訪的患者入組。所有患者根據(jù)術(shù)后病理分期，按照當(dāng)時(shí)最新版本的NCCN肺癌治療指南進(jìn)行不同的隨訪或后續(xù)治療，包括輔助化療、輔助放化療、輔助分子靶向治療等，放化療結(jié)束后進(jìn)入定期隨訪，靶向治療持續(xù)到腫瘤進(jìn)展。其中男性患者45人，女性患者32人，年齡36-72(54.2±9.0)歲。術(shù)后5年內(nèi)未發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的患者54例，5年內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的患者23例。肺腺癌42例，肺鱗癌35例，Ⅰa期患者8例，1例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅰb期患者23例，2例出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅱa期患者22例，3例出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅱb期患者16例，8例出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅲa期患者10例，9例出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。收集并整體所有入組患者每個(gè)隨訪時(shí)期的影像學(xué)資料及流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)報(bào)告。

1.2方法 我院檢驗(yàn)科擁有獲得SFDA認(rèn)證的FACSCantoⅡ型流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，能夠進(jìn)行淋巴細(xì)胞免疫學(xué)分析及多倍體分析。并配有專用的FACSCantoⅡclinical臨床軟件，實(shí)現(xiàn)了一管式淋巴細(xì)胞亞群全套分析，結(jié)果真實(shí)可靠。

2 結(jié) 果

2.1將77例患者分成未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組，并按照病理分型及病理分期進(jìn)行亞組的分類。見表1。

表1 所有患者的病理分型、分期及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況

2.2將兩個(gè)組的患者按照年齡、病理類型、病理分期、性別、吸煙史進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前的CD4/CD8比值只與術(shù)后病理分期相關(guān)(P<0.05)，與其他各項(xiàng)因素?zé)o關(guān)(P>0.05)。見表2。

表2 未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組與復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前CD4/CD8水平是否與年齡、癌種、分期、性別、吸煙史相關(guān)

2.3將所有患者按照病理分期分成早期(I期)組及中期組(II期、III期)，比較兩組患者術(shù)前的平均CD4/CD8比值，分別為(1.40±0.23)及(1.00±0.25)，P<0.01，有顯著差異。見表3。將復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前的平均CD4/CD8比值(0.92±0.23)與未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前的平均CD4/CD8值(1.25±0.29)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表4。

表3 不同分期術(shù)前CD4/CD8比值

表4 復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組與未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前CD4/CD8比值

2.4將所有患者術(shù)前的CD4/CD8值(1.15±0.31)與術(shù)后數(shù)天的(0.82±0.24)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表5。

表5 所有患者術(shù)前與術(shù)后數(shù)日的CD4/CD8對(duì)比

2.5復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組中位復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移時(shí)間32個(gè)月，CD4/CD8比值0.73±0.16，選取未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組36個(gè)月CD4/CD8比值：(1.43±0.26)，進(jìn)行兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。將所有復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者各個(gè)隨訪時(shí)間節(jié)點(diǎn)的CD4/CD8值描繪成23條曲線圖，發(fā)現(xiàn)患者在復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移前，曲線都有下降的趨勢(shì)。見表6。

表6 復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移時(shí)與未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組相同時(shí)期CD4/CD8比值比較

3 討 論

非小細(xì)胞肺癌術(shù)后患者，根據(jù)術(shù)后不同的病理分期進(jìn)行不同的隨訪或輔助治療，治療完成后需要進(jìn)行計(jì)劃性隨訪，隨訪內(nèi)容包括顱腦核磁共振、胸部、上腹部增強(qiáng)CT、全身骨掃描等影像學(xué)檢查及包括腫瘤標(biāo)志物、循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)、循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)[5]等相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查。依靠上述措施來“監(jiān)視”機(jī)體的無瘤狀態(tài)，然而影像學(xué)檢查具有“監(jiān)視滯后性”，腫瘤標(biāo)志物具有非特異性，均無法起到滿意的復(fù)發(fā)前預(yù)判作用，ctDNA在預(yù)測(cè)肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移上有較為靈敏的優(yōu)勢(shì)[6]，但較為昂貴的費(fèi)用及醫(yī)保政策的原因，目前仍難以大面積開展。機(jī)體本身具有抗腫瘤的免疫反應(yīng)機(jī)制，由細(xì)胞免疫反應(yīng)與體液免疫共同參與，淋巴細(xì)胞亞群在特異性細(xì)胞免疫殺傷和機(jī)體免疫功能調(diào)節(jié)等方面扮演十分重要的角色[7]。CD4和CD8T淋巴細(xì)胞在肺癌患者的免疫反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用[8]。本次研究針對(duì)不同分期不同病理的77例患者，經(jīng)過5年的隨訪，將患者分成復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組及未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組。通過本組數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，患者術(shù)前的CD4/CD8與患者的年齡、病理學(xué)類型、吸煙史、性別等沒有關(guān)系，與國內(nèi)相關(guān)報(bào)道相似[9]，其與患者的術(shù)后病理分期有關(guān)，中晚期肺癌術(shù)前的CD4/CD8比值明顯低于早期肺癌術(shù)前的數(shù)值，相關(guān)報(bào)道也證實(shí)了這一點(diǎn)[4]，這也提示了中晚期非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)前就處于免疫抑制狀態(tài)，腫瘤的負(fù)荷降低了患者的免疫應(yīng)答。本研究發(fā)現(xiàn)，患者術(shù)后CD4/CD8比值普遍較術(shù)前下降，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明肺癌患者術(shù)后細(xì)胞免疫功能仍處于抑制狀態(tài)，這可能與手術(shù)創(chuàng)傷、麻醉打擊、機(jī)體應(yīng)急有一定關(guān)系[10]。未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組顯示，手術(shù)1年后患者的CD4/CD8比值逐漸回升至術(shù)前水平或更高的水平，這與術(shù)后或放化療后機(jī)體恢復(fù)有關(guān)，亦與腫瘤負(fù)荷的消除從而導(dǎo)致免疫抑制緩解有關(guān)。復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組的數(shù)據(jù)顯示，患者術(shù)后一段時(shí)間內(nèi)CD4/CD8比值得到一定程度的提升，但隨著體內(nèi)殘存腫瘤細(xì)胞的死灰復(fù)燃，并逐漸出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移病灶，此時(shí)機(jī)體的免疫應(yīng)答再次下降，通過對(duì)轉(zhuǎn)移組23例患者的相關(guān)分析，我們發(fā)現(xiàn)患者在復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移前6月至12月有明顯的CD4/CD8比值下降趨勢(shì)，并下降至一個(gè)相對(duì)較低的水平，隨后患者出現(xiàn)了被影像學(xué)證實(shí)的局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移病灶，因此此項(xiàng)指標(biāo)在肺癌術(shù)后患者的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移方面有一定的預(yù)測(cè)作用。

本次研究發(fā)現(xiàn)CD4/CD8比值的動(dòng)態(tài)變化是一個(gè)重要的參考指標(biāo)，連續(xù)的降低趨勢(shì)及較低的比值水平是肺癌術(shù)后患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的高危因素，如果結(jié)合腫瘤標(biāo)志物、ctDNA、CTC等指標(biāo)的變化，可以進(jìn)行復(fù)發(fā)前預(yù)警。如果能夠在高危時(shí)間節(jié)點(diǎn)前采取相應(yīng)的治療措施，比如化療、靶向治療、免疫治療等，或許會(huì)對(duì)部分肺癌術(shù)后患者帶來益處。本次研究歷時(shí)周期較長，且納入病例較少，后續(xù)在臨床工作的價(jià)值仍需要相關(guān)大樣本研究的進(jìn)一步證實(shí)。